One of the challenges of hydrophilic interaction liquid chromatography (HILIC) is the development of hydrolytically stable stationary phases. In this work, reproducible synthesis, characterization, and application of two new stable cyclofructan-6 (CF6) based stationary phases for HILIC, and mixed-mode chromatography are described. Herein, CF6 was covalently bonded to benzoic acid (BCF-6) and propyl sulfonic acid (SCF-6) groups, respectively. In past reports, sulfonating cyclofructan and bonding it to silica was challenging in terms of reproducibility. The derivatized cyclofructan was then bonded to 2.7 µm superficially porous particles (SPPs), producing a hydrolytically stable phase. The selectivity of the new SPP silica stationary phases was compared to a commercial native cyclofructan-based HILIC column. All the columns in this study were tested for their efficiency, hydrophilicity, and electrostatic character to assess their unique selectivity among 33 commercial columns. All three cyclofructan-6 based stationary phases were subjected to stability tests under a constant flow rate of HILIC mobile phases using acidic, neutral, and basic probe molecules. No significant shift in retention time was observed over one week of continuous operation. The BCF-6 stationary phase showed a significant change in retention of acidic, neutral, and basic as a function of pH in the range 5.5 to 3.5 as compared to FructoShell-N and SCF-6. The two new columns were evaluated using 49 different analytes, including a wide range of structural moieties. Most of the test probes are of biological and pharmaceutical interest.

Graphic abstract

中文翻译：

---

用于使用表面多孔颗粒的亲水相互作用液相色谱的可电离环果聚糖 6 基固定相

亲水相互作用液相色谱 (HILIC) 的挑战之一是开发水解稳定的固定相。在这项工作中，描述了用于 HILIC 和混合模式色谱的两种新型稳定环果聚糖 (CF6) 固定相的可重现合成、表征和应用。在此，CF6 分别与苯甲酸 (BCF-6) 和丙磺酸 (SCF-6) 基团共价键合。在过去的报告中，磺化环果聚糖并将其与二氧化硅结合在重现性方面具有挑战性。然后将衍生化的环果聚糖与 2.7 µm 表面多孔颗粒 (SPP) 结合，产生水解稳定相。将新型 SPP 硅胶固定相的选择性与基于商业天然环果聚糖的 HILIC 色谱柱进行了比较。本研究中的所有色谱柱都经过了柱效、亲水性和静电特性的测试，以评估它们在 33 种商业色谱柱中的独特选择性。在恒定流速的 HILIC 流动相下，使用酸性、中性和碱性探针分子对所有三种基于环果聚糖 6 的固定相进行稳定性测试。在连续运行一周后，未观察到保留时间的显着变化。与 FructoShell-N 和 SCF-6 相比，BCF-6 固定相在 5.5 至 3.5 范围内的 pH 值函数中显示出酸性、中性和碱性的保留显着变化。使用 49 种不同的分析物对这两个新色谱柱进行了评估，包括各种结构部分。大多数测试探针具有生物学和药学意义。和静电特性来评估它们在 33 种商业色谱柱中的独特选择性。在恒定流速的 HILIC 流动相下，使用酸性、中性和碱性探针分子对所有三种基于环果聚糖 6 的固定相进行稳定性测试。在连续运行一周后，未观察到保留时间的显着变化。与 FructoShell-N 和 SCF-6 相比，BCF-6 固定相在 5.5 至 3.5 范围内的 pH 值函数中显示出酸性、中性和碱性的保留显着变化。使用 49 种不同的分析物对这两个新色谱柱进行了评估，包括各种结构部分。大多数测试探针具有生物学和药学意义。和静电特性来评估它们在 33 种商业色谱柱中的独特选择性。在恒定流速的 HILIC 流动相下，使用酸性、中性和碱性探针分子对所有三种基于环果聚糖 6 的固定相进行稳定性测试。在连续运行一周后，未观察到保留时间的显着变化。与 FructoShell-N 和 SCF-6 相比，BCF-6 固定相在 5.5 至 3.5 范围内的 pH 值函数中显示出酸性、中性和碱性的保留显着变化。使用 49 种不同的分析物对这两个新色谱柱进行了评估，包括各种结构部分。大多数测试探针具有生物学和药学意义。在恒定流速的 HILIC 流动相下，使用酸性、中性和碱性探针分子对所有三种基于环果聚糖 6 的固定相进行稳定性测试。在连续运行一周后，未观察到保留时间的显着变化。与 FructoShell-N 和 SCF-6 相比，BCF-6 固定相在 5.5 至 3.5 范围内的 pH 值函数中显示出酸性、中性和碱性的保留显着变化。使用 49 种不同的分析物对这两个新色谱柱进行了评估，包括各种结构部分。大多数测试探针具有生物学和药学意义。在恒定流速的 HILIC 流动相下，使用酸性、中性和碱性探针分子对所有三种基于环果聚糖 6 的固定相进行稳定性测试。在连续运行一周后，未观察到保留时间的显着变化。与 FructoShell-N 和 SCF-6 相比，BCF-6 固定相在 5.5 至 3.5 范围内的 pH 值函数中显示出酸性、中性和碱性的保留显着变化。使用 49 种不同的分析物对这两个新色谱柱进行了评估，包括各种结构部分。大多数测试探针具有生物学和药学意义。在连续运行一周后，未观察到保留时间的显着变化。与 FructoShell-N 和 SCF-6 相比，BCF-6 固定相在 5.5 至 3.5 范围内的 pH 值函数中显示出酸性、中性和碱性的保留显着变化。使用 49 种不同的分析物对这两个新色谱柱进行了评估，包括各种结构部分。大多数测试探针具有生物学和药学意义。在连续运行一周后，未观察到保留时间的显着变化。与 FructoShell-N 和 SCF-6 相比，BCF-6 固定相在 5.5 至 3.5 范围内的 pH 值函数中显示出酸性、中性和碱性的保留显着变化。使用 49 种不同的分析物对这两个新色谱柱进行了评估，包括各种结构部分。大多数测试探针具有生物学和药学意义。

图形摘要