Endothelial colony-forming cells (ECFCs) are human vasculogenic cells described as potential cell therapy product and good candidates for being a vascular liquid biopsy. Since interleukin-8 (IL-8) is a main actor in senescence, its ability to interact with ECFCs has been explored. However, expression of CXCR1 and CXCR2, the two cellular receptors for IL-8, by ECFCs remain controversial as several teams published contradictory reports. Using complementary technical approaches, we have investigated the presence of these receptors on ECFCs isolated from cord blood. First, CXCR1 and CXCR2 were not detected on several clones of cord blood- endothelial colony-forming cell using different antibodies available, in contrast to well-known positive cells. We then compared the RT-PCR primers used in different papers to search for the presence of CXCR1 and CXCR2 mRNA and found that several primer pairs used could lead to non-specific DNA amplification. Last, we confirmed those results by RNA sequencing. CXCR1 and CXCR2 were not detected in ECFCs in contrary to human-induced pluripotent stem cell-derived endothelial cells (h-iECs). In conclusion, using three different approaches, we confirmed that CXCR1 and CXCR2 were not expressed at mRNA or protein level by ECFCs. Thus, IL-8 secretion by ECFCs, its effects in angiogenesis and their involvement in senescent process need to be reanalyzed according to this absence of CXCR-1 and − 2 in ECFCs.

Graphical Abstract

内皮集落形成细胞 (ECFC) 是人类血管生成细胞，被描述为潜在的细胞治疗产品，也是血管液体活检的良好候选者。由于白细胞介素 8 (IL-8) 是衰老的主要参与者，因此已经探索了其与 ECFC 相互作用的能力。然而，由于几个团队发表了相互矛盾的报告，ECFCs 对 IL-8 的两种细胞受体 CXCR1 和 CXCR2 的表达仍然存在争议。使用互补的技术方法，我们研究了这些受体在从脐带血中分离出来的 ECFC 上的存在。首先，与众所周知的阳性细胞相比，使用不同的可用抗体在几个脐带血内皮集落形成细胞克隆上未检测到 CXCR1 和 CXCR2。然后，我们比较了不同论文中使用的 RT-PCR 引物来寻找 CXCR1 和 CXCR2 mRNA 的存在，发现使用的几个引物对可能导致非特异性 DNA 扩增。最后，我们通过 RNA 测序证实了这些结果。与人类诱导的多能干细胞衍生的内皮细胞 (h-iECs) 相反，在 ECFCs 中未检测到 CXCR1 和 CXCR2。总之，使用三种不同的方法，我们确认 CXCR1 和 CXCR2 不在 ECFC 的 mRNA 或蛋白质水平上表达。因此，需要根据 ECFCs 中 CXCR-1 和 - 2 的缺失重新分析 ECFCs 的 IL-8 分泌、其在血管生成中的作用及其对衰老过程的参与。与人类诱导的多能干细胞衍生的内皮细胞 (h-iECs) 相反，在 ECFCs 中未检测到 CXCR1 和 CXCR2。总之，使用三种不同的方法，我们确认 CXCR1 和 CXCR2 不在 ECFC 的 mRNA 或蛋白质水平上表达。因此，需要根据 ECFCs 中 CXCR-1 和 - 2 的缺失重新分析 ECFCs 的 IL-8 分泌、其在血管生成中的作用及其对衰老过程的参与。与人类诱导的多能干细胞衍生的内皮细胞 (h-iECs) 相反，在 ECFCs 中未检测到 CXCR1 和 CXCR2。总之，使用三种不同的方法，我们确认 CXCR1 和 CXCR2 不在 ECFC 的 mRNA 或蛋白质水平上表达。因此，需要根据 ECFCs 中 CXCR-1 和 - 2 的缺失重新分析 ECFCs 的 IL-8 分泌、其在血管生成中的作用及其对衰老过程的参与。

图形概要