Streptococcus parasanguinis is a primary colonizer of dental plaque and an opportunistic pathogen for subacute endocarditis. A putative fibronectin binding protein (Spaf_1409) that lacks both an N-terminal signal peptide and a C-terminal cell wall-anchoring motif was identified from the S. parasanguinis FW213 genome. Spaf_1409 was abundantly present in the cytoplasm and also was found in the cell wall preparation and culture supernatant. By using an isogenic mutant strain, MPH4, Spaf_1409 was found to mediate the binding of S. parasanguinis FW213 to fibronectin. Inactivation of Spaf_1409 did not significantly alter the mass of static biofilm, but reduced the resistance of S. parasanguinis against the shearing force in a flow cell biofilm system, resulting in scattered biofilm. The mortality in Galleria mellonella larvae infected with MPH4 was higher than in those infected with wild-type S. parasanguinis. However, fewer viable bacterial cells were recovered from larvae infected with MPH4, compared to those infected with wild-type S. parasanguinis, up to 42 h post infection, suggesting that the infection by MPH4, but not the growth, was responsible for the elevated mortality. The phagocytic analysis using flow cytometry indicated that Spaf_1409 participates in the recognition of S. parasanguinis FW213 by RAW264.7 macrophages, suggesting that inactivation of Spaf_1409 intensified the immune responses in larvae, leading to larval death. Taken together, the data indicate that Spaf_1409 plays different roles in the development of dental biofilm and in systemic infections.

中文翻译：

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副血链球菌 FW213 纤连蛋白结合蛋白的功能分析

副血链球菌是牙菌斑的主要定植菌和亚急性心内膜炎的机会性病原体。从 S. parasanguinis FW213 基因组中鉴定出缺乏 N 端信号肽和 C 端细胞壁锚定基序的假定纤连蛋白结合蛋白 (Spaf_1409)。Spaf_1409 大量存在于细胞质中，也存在于细胞壁制备物和培养上清液中。通过使用同基因突变菌株 MPH4，发现 Spaf_1409 可介导副血球菌 FW213 与纤连蛋白的结合。Spaf_1409 的失活并没有显着改变静态生物膜的质量，但降低了副血球菌对流动细胞生物膜系统中剪切力的抵抗力，导致生物膜分散。感染 MPH4 的大孔菌幼虫的死亡率高于感染野生型 S. parasanguinis 的幼虫。然而，与感染野生型副血链球菌的幼虫相比，感染 MPH4 的幼虫在感染后 42 小时内回收的活细菌细胞较少，这表明 MPH4 感染而不是生长是导致升高的原因死亡。流式细胞仪的吞噬细胞分析表明Spaf_1409参与了RAW264.7巨噬细胞对副血球菌FW213的识别，表明Spaf_1409的失活增强了幼虫的免疫反应，导致幼虫死亡。总之，数据表明 Spaf_1409 在牙齿生物膜的形成和全身感染中发挥不同的作用。副血统。然而，与感染野生型副血链球菌的幼虫相比，感染 MPH4 的幼虫在感染后 42 小时内回收的活细菌细胞较少，这表明 MPH4 感染而不是生长是导致升高的原因死亡。流式细胞仪的吞噬细胞分析表明Spaf_1409参与了RAW264.7巨噬细胞对副血球菌FW213的识别，表明Spaf_1409的失活增强了幼虫的免疫反应，导致幼虫死亡。总之，数据表明 Spaf_1409 在牙齿生物膜的形成和全身感染中发挥不同的作用。副血统。然而，与感染野生型副血链球菌的幼虫相比，感染 MPH4 的幼虫在感染后 42 小时内回收的活细菌细胞较少，这表明 MPH4 感染而不是生长是导致升高的原因死亡。流式细胞仪的吞噬细胞分析表明Spaf_1409参与了RAW264.7巨噬细胞对副血球菌FW213的识别，表明Spaf_1409的失活增强了幼虫的免疫反应，导致幼虫死亡。总之，数据表明 Spaf_1409 在牙齿生物膜的形成和全身感染中发挥不同的作用。感染后长达 42 小时，这表明 MPH4 感染而不是生长是导致死亡率升高的原因。流式细胞仪的吞噬细胞分析表明Spaf_1409参与了RAW264.7巨噬细胞对副血球菌FW213的识别，表明Spaf_1409的失活增强了幼虫的免疫反应，导致幼虫死亡。总之，数据表明 Spaf_1409 在牙齿生物膜的形成和全身感染中发挥不同的作用。感染后长达 42 小时，这表明 MPH4 感染而不是生长是导致死亡率升高的原因。流式细胞仪的吞噬细胞分析表明Spaf_1409参与了RAW264.7巨噬细胞对副血球菌FW213的识别，表明Spaf_1409的失活增强了幼虫的免疫反应，导致幼虫死亡。总之，数据表明 Spaf_1409 在牙齿生物膜的形成和全身感染中发挥不同的作用。表明 Spaf_1409 的失活增强了幼虫的免疫反应，导致幼虫死亡。总之，数据表明 Spaf_1409 在牙齿生物膜的形成和全身感染中发挥不同的作用。表明 Spaf_1409 的失活增强了幼虫的免疫反应，导致幼虫死亡。总之，数据表明 Spaf_1409 在牙齿生物膜的形成和全身感染中发挥不同的作用。