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LasB and CbpD Virulence Factors of Pseudomonas aeruginosa Carry Multiple Post-Translational Modifications on Their Lysine Residues.
Journal of Proteome Research ( IF 3.8 ) Pub Date : 2019-01-31 , DOI: 10.1021/acs.jproteome.8b00556
Charlotte Gaviard 1, 2 , Pascal Cosette 1, 2 , Thierry Jouenne 1, 2 , Julie Hardouin 1, 2
Affiliation  

Pseudomonas aeruginosa is a multi-drug resistant human pathogen largely involved in nosocomial infections. Today, effective antibacterial agents are lacking. Exploring the bacterial physiology at the post-translational modifications (PTM) level may contribute to the renewal of fighting strategies. Indeed, some correlations between PTMs and the bacterial virulence, adaptation, and resistance have been shown. In a previous study performed in P. aeruginosa, we reported that many virulence factors like chitin-binding protein CbpD and elastase LasB were multiphosphorylated. Besides phosphorylation, other PTMs, like those occurring on lysine, seem to play key roles in bacteria. In the present study, we investigated for the first time the lysine succinylome and acetylome of the extracellular compartment of P. aeruginosa by using a two-dimensional immunoaffinity approach. Some virulence factors were identified as multimodified on lysine residues, among them, LasB and CbpD. Lysine can be modified by a wide range of chemical groups. In order to check the presence of other chemical groups on modified lysines identified on LasB and CbpD, we used 1- and 2- dimensional gel electrophoresis approaches to target lysine modified by 7 other modifications: butyrylation, crotonylation, dimethylation, malonylation, methylation, propionylation, and trimethylation. We showed that some lysines of these two virulence factors were modified by these 9 different PTMs. Interestingly, we found that the PTMs recovered on these two virulence factors were different than those previously reported in the intracellular compartment.

中文翻译:

铜绿假单胞菌的LasB和CbpD毒力因子在其赖氨酸残基上进行多个翻译后修饰。

铜绿假单胞菌是一种多药耐药的人类病原体,主要与医院感染有关。如今,缺乏有效的抗菌剂。在翻译后修饰(PTM)水平上探索细菌生理学可能有助于战斗策略的更新。实际上,已经显示了PTM与细菌毒力,适应性和抗性之间的一些相关性。在先前在铜绿假单胞菌中进行的研究中,我们报道了许多甲壳素结合蛋白CbpD和弹性蛋白酶LasB等毒力因子均被多磷酸化。除磷酸化外,其他PTM(如赖氨酸上的PTM)似乎在细菌中也起着关键作用。在本研究中,我们首次研究了P细胞胞外区的赖氨酸琥珀酰和乙酰基。铜绿假单胞菌通过使用二维免疫亲和方法。一些毒力因子在赖氨酸残基上被鉴定为多重修饰的,其中包括LasB和CbpD。赖氨酸可以被多种化学基团修饰。为了检查在LasB和CbpD上鉴定的修饰的赖氨酸上是否存在其他化学基团,我们使用了一维和二维凝胶电泳方法来靶向经其他7种修饰修饰的赖氨酸:丁酰化,巴豆酰化,二甲基化,丙二酰化,甲基化,丙酰化和三甲基化。我们表明,这两种毒力因子中的一些赖氨酸已被这9种不同的PTM修饰。有趣的是,我们发现在这两种毒力因子上回收的PTM与以前在细胞内区室中报道的PTM不同。一些毒力因子在赖氨酸残基上被鉴定为多重修饰的,其中包括LasB和CbpD。赖氨酸可以被多种化学基团修饰。为了检查在LasB和CbpD上鉴定的修饰的赖氨酸上是否存在其他化学基团,我们使用了一维和二维凝胶电泳方法来靶向经其他7种修饰修饰的赖氨酸:丁酰化,巴豆酰化,二甲基化,丙二酰化,甲基化,丙酰化和三甲基化。我们表明,这两种毒力因子中的一些赖氨酸已被这9种不同的PTM修饰。有趣的是,我们发现在这两种毒力因子上回收的PTM与以前在细胞内区室中报道的PTM不同。一些毒力因子在赖氨酸残基上被鉴定为多重修饰的,其中包括LasB和CbpD。赖氨酸可以被多种化学基团修饰。为了检查在LasB和CbpD上鉴定的修饰的赖氨酸上是否存在其他化学基团,我们使用了一维和二维凝胶电泳方法来靶向经7种其他修饰修饰的赖氨酸:丁酰化,巴豆酰化,二甲基化,丙二酰化,甲基化,丙酰化和三甲基化。我们表明,这两种毒力因子中的一些赖氨酸已被这9种不同的PTM修饰。有趣的是,我们发现在这两种毒力因子上回收的PTM与以前在细胞内区室中报道的PTM不同。赖氨酸可以被多种化学基团修饰。为了检查在LasB和CbpD上鉴定的修饰的赖氨酸上是否存在其他化学基团,我们使用了一维和二维凝胶电泳方法来靶向经其他7种修饰修饰的赖氨酸:丁酰化,巴豆酰化,二甲基化,丙二酰化,甲基化,丙酰化和三甲基化。我们表明,这两种毒力因子中的一些赖氨酸已被这9种不同的PTM修饰。有趣的是,我们发现在这两种毒力因子上回收的PTM与以前在细胞内区室中报道的PTM不同。赖氨酸可以被多种化学基团修饰。为了检查在LasB和CbpD上鉴定的修饰的赖氨酸上是否存在其他化学基团,我们使用了一维和二维凝胶电泳方法来靶向经7种其他修饰修饰的赖氨酸:丁酰化,巴豆酰化,二甲基化,丙二酰化,甲基化,丙酰化和三甲基化。我们表明,这两种毒力因子中的一些赖氨酸已被这9种不同的PTM修饰。有趣的是,我们发现在这两种毒力因子上回收的PTM与以前在细胞内区室中报道的PTM不同。我们使用了一维和二维凝胶电泳方法来靶向被7种其他修饰修饰的赖氨酸:丁酰化,巴豆酰化,二甲基化,丙二酰化,甲基化,丙酰化和三甲基化。我们表明,这两种毒力因子中的一些赖氨酸已被这9种不同的PTM修饰。有趣的是,我们发现在这两种毒力因子上回收的PTM与以前在细胞内区室中报道的PTM不同。我们使用了一维和二维凝胶电泳方法来靶向被7种其他修饰修饰的赖氨酸:丁酰化,巴豆酰化,二甲基化,丙二酰化,甲基化,丙酰化和三甲基化。我们表明,这两种毒力因子中的一些赖氨酸已被这9种不同的PTM修饰。有趣的是,我们发现在这两种毒力因子上回收的PTM与以前在细胞内区室中报道的PTM不同。
更新日期:2019-02-07
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