目标识别是新分子设计和铅优化中新型农药开发的重要基础。3-（4-甲基-1,2,3-噻二唑基）-6-三氯甲基[1,2,4]三唑[3,4- b ] [1,3,4]噻唑（YZK-C22）是新颖的具有特定抗真菌活性的杀真菌剂候选物。我们研究了其作用方式，我们的研究表明，YZK-C22对酿酒酵母没有交叉耐药性具有经典杀真菌剂目标的突变体。Mec1和Rad53是响应DNA复制损伤的两种激酶，功效测试表明YZK-C22不能通过抑制DNA修复来发挥其杀真菌活性。通过药物亲和力反应靶标稳定性（DARTS）进行的靶标筛选表明，丙酮酸激酶（PK）是糖酵解途径中的关键酶，是YZK-C22的有效杀真菌新靶标。通过等压标记鉴定了主要参与代谢过程的58种差异表达蛋白（DEP），用于酿酒酵母的相对和绝对定量分析（iTRAQ）。用5 mg / L YZK-C22处理，柠檬酸盐循环中的蛋白质表达下降，这与DARTS的结果一致。分子对接分析进一步证实，YZK-C22可以停靠在PK的活性中心，而不是磷酸烯醇丙酮酸。啤酒酵母PK的酶活性受到竞争性抑制，K _i为3.33±0.28μmol/ L，补充丙酮酸可释放啤酒酵母对细胞的生长抑制作用，而啤酒酵母的生长受到抑制。通过添加PK的底物（磷酸烯醇丙酮酸）或变构调节剂（1,6-双磷酸果糖）无法回收。本研究发现并验证了新型有效杀真菌剂YZK-C22的主要目标。我们的结果为新型杀菌剂的开发提供了成功，有价值和适用的目标发现和鉴定案例。



"点击查看英文标题和摘要"