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使用 NHS 酯进行位点特异性蛋白质标记和泛素连接酶机制分析
Journal of the American Chemical Society ( IF 15.0 ) Pub Date : 2018-07-17 , DOI: 10.1021/jacs.8b05098 Daniel R. Dempsey 1 , Hanjie Jiang 2 , Jay H. Kalin 1 , Zan Chen 2 , Philip A. Cole 1, 2
Journal of the American Chemical Society ( IF 15.0 ) Pub Date : 2018-07-17 , DOI: 10.1021/jacs.8b05098 Daniel R. Dempsey 1 , Hanjie Jiang 2 , Jay H. Kalin 1 , Zan Chen 2 , Philip A. Cole 1, 2
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N-羟基琥珀酰亚胺 (NHS)-酯广泛用于在游离氨基上非选择性地标记蛋白质。这种广泛的标记可能是不利的，因为它会干扰蛋白质结构或功能，并且因为化学计量控制不佳。在这里，我们描述了一种将 NHS 酯转化为 N 端 Cys 残基上的位点特异性蛋白质标记的简单方法。MESNA 添加将 NHS 酯转化为用于 N-Cys 修饰的化学选择性硫酯。该标记策略用于阐明泛素 E3 连接酶 WWP2 的机制特征，包括其与其底物之一、肿瘤抑制因子 PTEN 的相互作用以及其自身泛素化分子。我们建议这种方便的蛋白质标记策略将允许扩大 NHS 酯在生化研究中的应用。
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更新日期：2018-07-17
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