当前位置：
X-MOL 学术
›
Bioorgan. Chem.
›
论文详情
Our official English website, www.x-mol.net, welcomes your
feedback! (Note: you will need to create a separate account there.)
Lens culinaris β-galactosidase (Lsbgal): Insights into its purification, biochemical characterization and trisaccharides synthesis.
Bioorganic Chemistry ( IF 4.5 ) Pub Date : 2019-12-23 , DOI: 10.1016/j.bioorg.2019.103543 Anjali Yadav 1 , Arvind M Kayastha 1
Bioorganic Chemistry ( IF 4.5 ) Pub Date : 2019-12-23 , DOI: 10.1016/j.bioorg.2019.103543 Anjali Yadav 1 , Arvind M Kayastha 1
Affiliation
|
Present work describes the purification of an acidic β-galactosidase from Lens culinaris (Lsbgal) to homogeneity via 857 fold with specific activity of 87 U/mg. The molecular mass of purified Lsbgal was estimated ~ 76 kDa by Size Exclusion Chromatography on Superdex-200 (ÄKTA purifier) and on SDS-PAGE, showed hetero-dimeric subunits i.e. 45 kDa and 30 kDa. The purified Lsbgal showed glycoproteinous nature when applied to Con-A Sepharose chromatography. Biochemical studies revealed that optimum condition for purified Lsbgal against o, nitophenyl β-d-galactopyranoside (ONPG) as a substrate was pH 3.0, 58 °C with an activation energy (Ea) 8.1 kcal/mole and Q10 1.8. Lsbgal hydrolyses ONPG with Km value 1.21 mM and Vmax 90.90 µmoles/min/mg. Purified Lsbgal when incubated with high lactose concentration showed transgalactosylation activity which lead to the formation of trisaccharides as a major product of total GOS. Therefore, the purified Lsbgal could be used as potential alternative in food industry and would be further explicated for trisaccharides synthesis.
中文翻译：
扁豆β-半乳糖苷酶（Lsbgal）：深入了解其纯化，生化特性和三糖合成。
当前的工作描述了从酸性透镜（Lsbgal）纯化酸性β-半乳糖苷酶（Lsbgal）到857倍，具有87 U / mg的比活性。通过在Superdex-200（ÄKTA纯化器）和SDS-PAGE上的尺寸排阻色谱法，估计纯化的Lsbgal的分子量约为76 kDa，显示出异二聚体亚基，即45 kDa和30 kDa。当纯化的Lsbgal应用于Con-A琼脂糖层析时，显示出糖蛋白性质。生化研究表明，针对邻苯基硝基苯β-d-吡喃半乳糖苷（ONPG）纯化的Lsbgal的最佳条件是pH 3.0、58°C，活化能（Ea）8.1 kcal / mol和Q10 1.8。Lsbgal水解Km值为1.21 mM和Vmax为90.90 µmoles / min / mg的ONPG。纯化的Lsbgal与高乳糖浓度温育时，表现出转半乳糖基化活性，这导致三糖的形成是总GOS的主要产物。因此，纯化的Lsbgal可用作食品工业中的潜在替代品，并将进一步用于三糖的合成。
更新日期：2019-12-23
中文翻译：
扁豆β-半乳糖苷酶（Lsbgal）：深入了解其纯化，生化特性和三糖合成。
当前的工作描述了从酸性透镜（Lsbgal）纯化酸性β-半乳糖苷酶（Lsbgal）到857倍，具有87 U / mg的比活性。通过在Superdex-200（ÄKTA纯化器）和SDS-PAGE上的尺寸排阻色谱法，估计纯化的Lsbgal的分子量约为76 kDa，显示出异二聚体亚基，即45 kDa和30 kDa。当纯化的Lsbgal应用于Con-A琼脂糖层析时，显示出糖蛋白性质。生化研究表明，针对邻苯基硝基苯β-d-吡喃半乳糖苷（ONPG）纯化的Lsbgal的最佳条件是pH 3.0、58°C，活化能（Ea）8.1 kcal / mol和Q10 1.8。Lsbgal水解Km值为1.21 mM和Vmax为90.90 µmoles / min / mg的ONPG。纯化的Lsbgal与高乳糖浓度温育时，表现出转半乳糖基化活性，这导致三糖的形成是总GOS的主要产物。因此，纯化的Lsbgal可用作食品工业中的潜在替代品，并将进一步用于三糖的合成。
京公网安备 11010802027423号