Cryopreservation abilities of dental tissue-derived mesenchymal stromal cells (DMSCs) including dental pulp stem cells (DPSCs) and dental follicle stem cells (DFSC) play an important role in the applications of these cells in clinical settings. In this context, we checked whether storage at - 80 °C in 10% DMSO for a longer period has any adverse effect on the functionality and genetic stability. We carried our studies on DPSC and DFSC samples that were revived after a maximum of 5 years of cryopreservation. We observed that even after long-term uncontrolled freezing at - 80 °C, these cells survived and proliferated efficiently. The assessment was made based on their post-thaw morphology, immunophenotypes, differentiation potential, growth kinetics, and genetic features. These cells retained the expression of stemness markers, differentiation ability and maintained their normal karyotype. Our results indicated no significant morphological or immunophenotypic differences between the cryopreserved DMSCs and the fresh DMSCs. Our study implies that mesenchymal stromal cells derived from the dental tissue origin are very robust and do not require any sophisticated preservation protocols. Thus, these can be an ideal source for research, stem cell banking, as well as successful clinical applications in tissue engineering and cell-based therapeutics. Graphical Abstract Schematic diagram showing the cryopreservation of DMSCs by uncontrolled freezing at -80 c has no adverse effects on their functionality and genetic stability.

中文翻译：

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长期冷冻保存后，通过不受控制的冷冻评估牙科间质基质细胞的融化后质量。

包括牙髓干细胞（DPSC）和毛囊干细胞（DFSC）在内的牙源性间充质基质细胞（DMSC）的冷冻保存能力在这些细胞在临床中的应用中起着重要作用。在这种情况下，我们检查了在-80°C的10％DMSO中储存更长时间是否对功能和遗传稳定性有不利影响。我们对DPSC和DFSC样品进行了研究，这些样品在冷冻保存最多5年后得以恢复。我们观察到，即使在-80°C下长期不受控制的冷冻后，这些细胞也可以存活并有效增殖。评估是基于它们的解冻后形态，免疫表型，分化潜能，生长动力学和遗传特征。这些细胞保留了干性标志物的表达，分化能力强，并保持其正常的核型。我们的结果表明，冷冻保存的DMSC与新鲜DMSC之间没有明显的形态学或免疫表型差异。我们的研究表明，源自牙齿组织来源的间充质基质细胞非常健壮，不需要任何复杂的保存方案。因此，这些可以成为研究，干细胞储存以及组织工程和基于细胞的治疗剂的成功临床应用的理想来源。图形化摘要示意图显示了通过在-80 c处不受控制的冷冻进行DMSC的冷冻保存，对其功能和遗传稳定性没有不利影响。我们的结果表明，冷冻保存的DMSC与新鲜DMSC之间没有明显的形态学或免疫表型差异。我们的研究表明，源自牙齿组织来源的间充质基质细胞非常健壮，不需要任何复杂的保存方案。因此，这些可以成为研究，干细胞储存以及组织工程和基于细胞的治疗剂的成功临床应用的理想来源。图形化摘要示意图显示了通过在-80 c处不受控制的冷冻进行DMSC的冷冻保存，对其功能和遗传稳定性没有不利影响。我们的结果表明，冷冻保存的DMSC与新鲜DMSC之间没有明显的形态学或免疫表型差异。我们的研究表明，源自牙齿组织来源的间充质基质细胞非常健壮，不需要任何复杂的保存方案。因此，这些可以成为研究，干细胞储存以及组织工程和基于细胞的治疗剂的成功临床应用的理想来源。图形化摘要示意图显示了通过在-80 c处不受控制的冷冻进行DMSC的冷冻保存，对其功能和遗传稳定性没有不利影响。这些可以成为研究，干细胞储存以及组织工程和基于细胞的疗法的成功临床应用的理想来源。图形化摘要示意图显示了通过在-80 c处不受控制的冷冻进行DMSC的冷冻保存，对其功能和遗传稳定性没有不利影响。这些可以成为研究，干细胞储存以及组织工程和基于细胞的疗法的成功临床应用的理想来源。图形化摘要示意图显示了通过在-80 c处不受控制的冷冻进行DMSC的冷冻保存，对其功能和遗传稳定性没有不利影响。