在天然金属蛋白中金属离子和氨基酸之间形成配位相互作用时，结合的金属离子对于稳定蛋白质结构或作为酶辅因子至关重要。尽管尺寸很小，但当金属离子与工程改造的生物纳米孔的受限环境结合时，其会在单通道记录期间导致可检测到的扰动。所有此类报道的工作都是使用工程改造的α-溶血素纳米孔进行的，观察到的事件振幅极小（约1-3 pA）。作者推测，α-溶血素的圆柱形孔限制可能不适用于探测极小的分析物。耻垢分枝杆菌孔蛋白A（MspA）是一个圆锥形的纳米孔，经过工程设计可与Ca2+、Mn2 +、Co2 +、Ni2+、Zn2+、Pb2+和Cd2+相互作用，并且观察到较大的事件振幅（最高10 pA）。测得的速率常数表明，单个离子与氨基酸的配位遵循硬-软-酸-碱理论，该理论从未在单分子情况下得到系统验证。通过将测量pH值从6.8调节到8.0，可使单个离子结合事件的持续时间延长约46倍。因此，MspA可作为探测各种极小分析物（例如单原子和多原子离子、小分子或化学中间体）的出色模板，而硬-软-酸-碱相互作用的原理可能对孔设计具有指导意义。

在天然金属蛋白中金属离子和氨基酸之间形成配位相互作用时，结合的金属离子对于稳定蛋白质结构或作为酶辅因子因子。所有此类报道的工作都是使用工程改造的α-溶血素纳米孔进行的，观察到的事件振幅极小（约1-3 pA）。作者推测，α-溶血素的对准孔限制可能无法用于探测极性小的分析物。pub垢分枝杆菌孔蛋白A（MspA）是一个圆锥形的纳米孔，经过工程设计可与Ca2 +，Mn2 +，Co2 +，Ni2 +，Zn2 +，Pb2 +和Cd2 +相互作用，并且观察到相互作用的事件振幅（最高10 pA）。位一致硬-软-酸-碱理论，该理论从未在单分子情况下得到系统验证。将通过测量pH值从6.8调节到8.0，可以替换离子结合事件的持续时间延长约46倍。因此，MspA可作为探测各种极小分析物（例如单原子和多原子离子，小分子或化学中间体）的出色模板，而硬-软-酸-碱相互作用的原理可能对孔设计具有指导意义。