Antibody reagents are the key components of multiparametric flow cytometry analysis. Their quality performance is an absolute requirement for reproducible flow cytometry experiments. While there is an enormous body of antibody reagents available, there is still a lack of consensus about which criteria should be evaluated to select antibody reagents with the proper performance, how to validate antibody reagents for flow cytometry, and how to interpret the validation results. The achievements of cytometry moved the field to a higher number of measured parameters, large data sets, and computational data analysis approaches. These advancements pose an increased demand for antibody reagent performance quality. This review summarizes the codevelopment of cytometry, antibody development, and validation strategies. It discusses the diverse issues of the specificity, cross-reactivity, epitope, titration, and reproducibility features of antibody reagents, and this review discusses the validation principles and methods that are currently available and those that are emerging. We argue that significant efforts should be invested by antibody users, developers, manufacturers, and publishers to increase the quality and reproducibility of published studies. More validation data should be presented by all stakeholders; however, the data should be presented in sufficient experimental detail to foster reproducibility, and community effort shall lead to the public availability of large data sets that can serve as a benchmark for antibody performance. © 2019 International Society for Advancement of Cytometry.

中文翻译：

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流式细胞术抗体验证的相关性。

抗体试剂是多参数流式细胞术分析的关键组成部分。它们的质量性能是可重复的流式细胞术实验的绝对要求。尽管有大量可用的抗体试剂，但对于应该评估哪些标准以选择具有适当性能的抗体试剂、如何验证用于流式细胞术的抗体试剂以及如何解释验证结果，仍然缺乏共识。细胞计数的成就使该领域转向更多的测量参数、大数据集和计算数据分析方法。这些进步对抗体试剂的性能质量提出了更高的要求。本综述总结了细胞计数、抗体开发和验证策略的共同发展。它讨论了抗体试剂的特异性、交叉反应性、表位、滴定和再现性特征的各种问题，本综述讨论了当前可用和新兴的验证原理和方法。我们认为，抗体用户、开发商、制造商和出版商应作出重大努力，以提高已发表研究的质量和可重复性。所有利益相关者应提供更多验证数据；然而，数据应以足够的实验细节呈现，以促进可重复性，社区的努力将导致大数据集的公共可用性，可作为抗体性能的基准。© 2019 国际细胞计量学促进会。和抗体试剂的重现性特征，本综述讨论了当前可用和新兴的验证原理和方法。我们认为，抗体用户、开发商、制造商和出版商应作出重大努力，以提高已发表研究的质量和可重复性。所有利益相关者应提供更多验证数据；然而，数据应以足够的实验细节呈现，以促进可重复性，社区的努力将导致大数据集的公共可用性，可作为抗体性能的基准。© 2019 国际细胞计量学促进会。和抗体试剂的重现性特征，本综述讨论了当前可用和新兴的验证原理和方法。我们认为，抗体用户、开发商、制造商和出版商应作出重大努力，以提高已发表研究的质量和可重复性。所有利益相关者应提供更多验证数据；然而，数据应以足够的实验细节呈现，以促进可重复性，社区的努力将导致大数据集的公共可用性，可作为抗体性能的基准。© 2019 国际细胞计量学促进会。这篇评论讨论了目前可用的和正在出现的验证原则和方法。我们认为，抗体用户、开发商、制造商和出版商应作出重大努力，以提高已发表研究的质量和可重复性。所有利益相关者应提供更多验证数据；然而，数据应以足够的实验细节呈现，以促进可重复性，社区的努力将导致大数据集的公共可用性，可作为抗体性能的基准。© 2019 国际细胞计量学促进会。这篇评论讨论了目前可用的和正在出现的验证原则和方法。我们认为，抗体用户、开发商、制造商和出版商应作出重大努力，以提高已发表研究的质量和可重复性。所有利益相关者应提供更多验证数据；然而，数据应以足够的实验细节呈现，以促进可重复性，社区的努力将导致大数据集的公共可用性，可作为抗体性能的基准。© 2019 国际细胞计量学促进会。所有利益相关者应提供更多验证数据；然而，数据应以足够的实验细节呈现，以促进可重复性，社区的努力将导致大数据集的公共可用性，可作为抗体性能的基准。© 2019 国际细胞计量学促进会。所有利益相关者应提供更多验证数据；然而，数据应以足够的实验细节呈现，以促进可重复性，社区的努力将导致大数据集的公共可用性，可作为抗体性能的基准。© 2019 国际细胞计量学促进会。