Recessive dystrophic epidermolysis bullosa (RDEB) is a debilitating genodermatosis caused by loss-of-function mutations in COL7A1 encoding type VII collagen (C7), the main component of anchoring fibrils at the dermal-epidermal junction. With no curative treatments presently available, retrovirally transduced autologous epidermal grafts and intradermal lentivirally engineered fibroblast injections are being investigated. Alternative approaches aim to infuse allogeneic mesenchymal stromal cells (MSCs) to provide a more generalized treatment for RDEB. We investigated whether healthy human MSCs could be engineered to overexpress C7 and correct RDEB in a human:murine chimeric model. Initially, engineered MSCs incorporated ex vivo into RDEB grafts, their presence confirmed by fluorescence in situ hybridization, revealed recovery of function of the dermal-epidermal junction with no signs of blister formation. Importantly, the detection of anchoring fibrils by transmission electron microscopy corroborated structural recovery. Next, MSCs cotransduced to express C7 and luciferase were delivered intradermally into grafted RDEB skin, resulting in localized MSC persistence with deposition of de novo C7 at the site. Notably, C7 expression was sufficient to restore anchoring fibril density to normal levels. In contrast, intravenously injected engineered MSCs were undetectable within grafts and lacked anchoring fibril reconstitution. Our data suggest that although localized correction may be achievable using engineered MSCs, strategies for systemic administration require further modeling.

中文翻译：

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经过工程改造以表达VII型胶原的人间质基质细胞可以在隐性营养不良性表皮松解性Bullosa皮肤移植嵌合体中恢复锚定的原纤维。

隐性营养不良性大疱性表皮松解症（RDEB）是由编码VII型胶原（C7）的COL7A1的功能丧失突变引起的衰弱性遗传病，该突变是在真皮-表皮交界处锚定原纤维的主要成分。目前尚无治疗方法，正在研究逆转录病毒转导的自体表皮移植物和皮内慢病毒工程化成纤维细胞注射剂。替代方法旨在注入同种异体间充质基质细胞（MSC），以提供更广泛的RDEB治疗。我们调查了健康的人类MSC是否可以在人：鼠嵌合体模型中过表达C7并纠正RDEB。最初，经过工程改造的MSC离体并入RDEB移植物中，通过荧光原位杂交证实了它们的存在，揭示了真皮-表皮连接处功能的恢复，没有水泡形成的迹象。重要的是，通过透射电子显微镜对锚定原纤维的检测证实了结构恢复。接下来，将共转导以表达C7和荧光素酶的MSC皮内递送至移植的RDEB皮肤中，导致局部MSC持续存在，并从头沉积C7。值得注意的是，C7表达足以将锚定纤丝密度恢复至正常水平。相比之下，静脉内注射的工程MSC在移植物中无法检测到，并且缺乏锚定原纤维的重建。我们的数据表明，尽管使用工程化的MSC可以实现局部校正，但系统性给药策略仍需进一步建模。透射电镜检测锚定原纤维证实了结构恢复。接下来，将共转导以表达C7和荧光素酶的MSC皮内递送至移植的RDEB皮肤中，导致局部MSC持续存在，并从头沉积C7。值得注意的是，C7表达足以将锚定纤丝密度恢复至正常水平。相比之下，静脉内注射的工程MSC在移植物中无法检测到，并且缺乏锚定原纤维的重建。我们的数据表明，尽管使用工程化的MSC可以实现局部校正，但系统性给药策略仍需进一步建模。透射电镜检测锚定原纤维证实了结构恢复。接下来，将共转导以表达C7和荧光素酶的MSC皮内递送至移植的RDEB皮肤中，导致局部MSC持续存在，并从头沉积C7。值得注意的是，C7表达足以将锚定纤丝密度恢复至正常水平。相比之下，静脉内注射的工程MSC在移植物中无法检测到，并且缺乏锚定原纤维的重建。我们的数据表明，尽管使用工程化的MSC可以实现局部校正，但系统性给药策略仍需进一步建模。共转导表达C7和萤光素酶的MSC被皮内递送至移植的RDEB皮肤中，导致局部MSC持续存在，并从头沉积了C7。值得注意的是，C7表达足以将锚定纤丝密度恢复至正常水平。相比之下，静脉内注射的工程MSC在移植物中无法检测到，并且缺乏锚定原纤维的重建。我们的数据表明，尽管使用工程化的MSC可以实现局部校正，但系统性给药策略仍需进一步建模。共转导表达C7和萤光素酶的MSC被皮内递送至移植的RDEB皮肤中，导致局部MSC持续存在，并从头沉积了C7。值得注意的是，C7表达足以将锚定纤丝密度恢复至正常水平。相比之下，静脉内注射的工程MSC在移植物中无法检测到，并且缺乏锚定原纤维的重建。我们的数据表明，尽管使用工程化的MSC可以实现局部校正，但系统性给药策略仍需进一步建模。静脉内注射的工程MSC在移植物中无法检测到，并且缺乏锚定的原纤维重构。我们的数据表明，尽管使用工程化的MSC可以实现局部校正，但系统性给药策略仍需进一步建模。静脉内注射的工程MSC在移植物中无法检测到，并且缺乏锚定的原纤维重构。我们的数据表明，尽管使用工程化的MSC可以实现局部校正，但系统性给药策略仍需进一步建模。