A new in vivo gene mutation assay has been developed based on the phosphatidylinositol glycan anchor biosynthesis, Class A gene (Pig-a in rodents) as an endogenous reporter. Although a large number of chemicals have been evaluated in the rat Pig-a assay in 28-day repeat dose regimens, there was limited reporting of rat Pig-a assay after a single dose. A collaborative study by the Mammalian Mutagenicity Study group, which is a subgroup of the Japanese Environmental Mutagen Society, was conducted to verify the usefulness of the rat Pig-a assay after a single dose as a short-term genotoxicity test. As a part of this collaborative study, the in vivo mutagenicity of a single dose of pyrene (Pyr) was investigated in the red blood cell (RBC Pig-a assay) and in reticulocytes (PIGRET) of rats. Eight-week old male rats were orally dosed with Pyr at 500, 1000, and 2000 mg/kg or ethylnitrosourea (ENU) at 10 and 40 mg/kg as a positive control. The animals in each group were examined for Pig-a mutant frequencies (MF) except for animals in the 2000mg/kg group because of mortality or severe toxicity. The Pig-a MF in RBCs and reticulocytes, as CD59 negative cells, were evaluated once a week for 4 weeks after the dosing. With a single exposure to ENU, the Pig-a MF in both RBCs and reticulocytes increased in a time- and dose-dependent manner. In contrast, no statistically significant effect was observed in rats dosed with Pyr at 500 and 1000 mg/kg. Therefore, Pyr was concluded to be negative in the RBC Pig-a assay and the PIGRET assay after a single oral administration in rats. The result was consistent with previously reported Pig-a assays with repeat dose regimens.

中文翻译：

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芘未在大鼠红细胞Pig-a试验和PIGRET试验中诱导基因突变。

基于磷脂酰肌醇聚糖锚定生物合成，A 类基因（啮齿动物中的 Pig-a）作为内源性报告基因，开发了一种新的体内基因突变检测。尽管在大鼠 Pig-a 试验中以 28 天重复给药方案评估了大量化学品，但单次给药后大鼠 Pig-a 试验的报告有限。哺乳动物致突变性研究组（日本环境诱变剂协会的一个亚组）进行了一项合作研究，以验证大鼠 Pig-a 试验在单次给药后作为短期遗传毒性试验的有效性。作为这项合作研究的一部分，在大鼠的红细胞（RBC Pig-a 试验）和网织红细胞 (PIGRET) 中研究了单剂量芘 (Pyr) 的体内致突变性。八周大的雄性大鼠口服 Pyr 500，1000 和 2000 mg/kg 或 10 和 40 mg/kg 的乙基亚硝基脲 (ENU) 作为阳性对照。除 2000mg/kg 组动物因死亡率或重度毒性外，检查各组动物的 Pig-a 突变频率 (MF)。RBC 和网织红细胞中的 Pig-a MF，作为 CD59 阴性细胞，在给药后每周评估一次，持续 4 周。单次暴露于 ENU 时，红细胞和网织红细胞中的 Pig-a MF 以时间和剂量依赖性方式增加。相比之下，在以 500 和 1000 mg/kg 剂量服用 Pyr 的大鼠中没有观察到统计学上的显着影响。因此，在大鼠单次口服给药后，Pyr 在 RBC Pig-a 测定和 PIGRET 测定中被推断为阴性。结果与先前报道的具有重复给药方案的 Pig-a 测定一致。和 2000 mg/kg 或 10 和 40 mg/kg 的乙基亚硝基脲 (ENU) 作为阳性对照。除 2000mg/kg 组动物因死亡率或重度毒性外，检查各组动物的 Pig-a 突变频率 (MF)。RBC 和网织红细胞中的 Pig-a MF，作为 CD59 阴性细胞，在给药后每周评估一次，持续 4 周。单次暴露于 ENU 时，红细胞和网织红细胞中的 Pig-a MF 以时间和剂量依赖性方式增加。相比之下，在以 500 和 1000 mg/kg 剂量服用 Pyr 的大鼠中没有观察到统计学上的显着影响。因此，在大鼠单次口服给药后，Pyr 在 RBC Pig-a 测定和 PIGRET 测定中被推断为阴性。结果与先前报道的具有重复给药方案的 Pig-a 测定一致。和 2000 mg/kg 或 10 和 40 mg/kg 的乙基亚硝基脲 (ENU) 作为阳性对照。除 2000mg/kg 组动物因死亡率或重度毒性外，检查各组动物的 Pig-a 突变频率 (MF)。RBC 和网织红细胞中的 Pig-a MF，作为 CD59 阴性细胞，在给药后每周评估一次，持续 4 周。单次暴露于 ENU 时，红细胞和网织红细胞中的 Pig-a MF 以时间和剂量依赖性方式增加。相比之下，在以 500 和 1000 mg/kg 剂量服用 Pyr 的大鼠中没有观察到统计学上的显着影响。因此，在大鼠单次口服给药后，Pyr 在 RBC Pig-a 测定和 PIGRET 测定中被推断为阴性。结果与先前报道的具有重复给药方案的 Pig-a 测定一致。除 2000mg/kg 组动物因死亡率或重度毒性外，检查各组动物的 Pig-a 突变频率 (MF)。RBC 和网织红细胞中的 Pig-a MF，作为 CD59 阴性细胞，在给药后每周评估一次，持续 4 周。单次暴露于 ENU 时，红细胞和网织红细胞中的 Pig-a MF 以时间和剂量依赖性方式增加。相比之下，在以 500 和 1000 mg/kg 剂量服用 Pyr 的大鼠中没有观察到统计学上的显着影响。因此，在大鼠单次口服给药后，Pyr 在 RBC Pig-a 测定和 PIGRET 测定中被推断为阴性。结果与先前报道的具有重复给药方案的 Pig-a 测定一致。除 2000mg/kg 组动物因死亡率或重度毒性外，检查各组动物的 Pig-a 突变频率 (MF)。RBC 和网织红细胞中的 Pig-a MF，作为 CD59 阴性细胞，在给药后每周评估一次，持续 4 周。单次暴露于 ENU 时，红细胞和网织红细胞中的 Pig-a MF 以时间和剂量依赖性方式增加。相比之下，在以 500 和 1000 mg/kg 剂量服用 Pyr 的大鼠中没有观察到统计学上的显着影响。因此，在大鼠单次口服给药后，Pyr 在 RBC Pig-a 测定和 PIGRET 测定中被推断为阴性。结果与先前报道的具有重复给药方案的 Pig-a 测定一致。