The Pig-a assay is a new in vivo genotoxicity test for detecting mutagens in the bodies of animals, using the endogenous Pig-a gene as the target. There are two types of Pig-a assays: the red blood cell (RBC) Pig-a assay, which uses RBCs, and the PIGRET assay, which uses reticulocytes. The Japanese Environmental Mutagen Society-Mammalian Mutagenicity Study Group collaborative study of the Pig-a assay was carried out to investigate the usefulness of the PIGRET assay. The mutagenicity of melamine was evaluated as part of this study. Eight-week-old male Crl:CD (SD) rats were administered a single gavage dose of melamine as a non-genotoxic bladder carcinogen. Blood samples were collected at the first, second and fourth weeks after administration, and the RBC Pig-a assay and PIGRET assays were conducted using these samples. Three dose levels were used in the study: the highest dose was 2000mg/kg, which is generally used as the maximum dose in in vivo genotoxicity testing, and 1000 and 500mg/kg were also used. As a positive control, a group of rats was administered a single dose of N-nitroso-N-ethylurea (ENU) by gavage at 40mg/kg. The Pig-a mutant frequencies (Pig-a MFs) did not increase in any of the melamine groups throughout the experimental period in either the RBC Pig-a assay or the PIGRET assay. Both the RBC Pig-a and PIGRET assays revealed significant increases in the Pig-a MFs in the ENU group, starting at day 7 after a single administration. Therefore, these two assays, when evaluated after a single administration, can be used to determine that melamine is non-mutagenic.

中文翻译：

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通过 RBC Pig-a 试验和 PIGRET 试验评估三聚氰胺的体内致突变性。

Pig-a 试验是一种新的体内基因毒性试验，用于检测动物体内的诱变剂，使用内源性 Pig-a 基因作为靶标。Pig-a 检测有两种类型：使用红细胞的红细胞 (RBC) Pig-a 检测和使用网织红细胞的 PIGRET 检测。日本环境诱变剂协会-哺乳动物致突变性研究组对 Pig-a 检测进行了合作研究，以研究 PIGRET 检测的有用性。作为本研究的一部分，对三聚氰胺的致突变性进行了评估。八周大的雄性 Crl:CD (SD) 大鼠被给予单次灌胃剂量的三聚氰胺作为非遗传毒性膀胱致癌物。在给药后的第一周、第二周和第四周收集血液样品，并使用这些样品进行RBC Pig-a测定和PIGRET测定。研究中使用了三个剂量水平：最高剂量为2000mg/kg，一般作为体内遗传毒性试验的最大剂量，也有1000和500mg/kg。作为阳性对照，一组大鼠通过管饲法以 40mg/kg 给予单剂量的 N-亚硝基-N-乙基脲 (ENU)。在整个实验期间，无论是在 RBC Pig-a 试验还是 PIGRET 试验中，任何三聚氰胺组的 Pig-a 突变频率（Pig-a MF）都没有增加。RBC Pig-a 和 PIGRET 检测均显示 ENU 组中 Pig-a MF 的显着增加，从单次给药后第 7 天开始。因此，在单次给药后评估这两种测定法时，可用于确定三聚氰胺是非致突变性的。在体内遗传毒性试验中一般作为最大剂量使用，也有使用1000和500mg/kg。作为阳性对照，一组大鼠通过管饲法以 40mg/kg 给予单剂量的 N-亚硝基-N-乙基脲 (ENU)。在整个实验期间，无论是在 RBC Pig-a 试验还是 PIGRET 试验中，任何三聚氰胺组的 Pig-a 突变频率（Pig-a MF）都没有增加。RBC Pig-a 和 PIGRET 检测均显示 ENU 组中 Pig-a MF 的显着增加，从单次给药后第 7 天开始。因此，在单次给药后评估这两种测定法时，可用于确定三聚氰胺是非致突变性的。在体内遗传毒性试验中一般作为最大剂量使用，也有使用1000和500mg/kg。作为阳性对照，一组大鼠通过管饲法以 40mg/kg 给予单剂量的 N-亚硝基-N-乙基脲 (ENU)。在整个实验期间，无论是在 RBC Pig-a 试验还是 PIGRET 试验中，任何三聚氰胺组的 Pig-a 突变频率（Pig-a MF）都没有增加。RBC Pig-a 和 PIGRET 检测均显示 ENU 组中 Pig-a MF 的显着增加，从单次给药后第 7 天开始。因此，在单次给药后评估这两种测定法时，可用于确定三聚氰胺是非致突变性的。一组大鼠以 40mg/kg 的剂量通过管饲法给予单剂量的 N-亚硝基-N-乙基脲 (ENU)。在整个实验期间，无论是在 RBC Pig-a 试验还是 PIGRET 试验中，任何三聚氰胺组的 Pig-a 突变频率（Pig-a MF）都没有增加。RBC Pig-a 和 PIGRET 检测均显示 ENU 组中 Pig-a MF 的显着增加，从单次给药后第 7 天开始。因此，在单次给药后评估这两种测定法时，可用于确定三聚氰胺是非致突变性的。一组大鼠以 40mg/kg 的剂量通过管饲法给予单剂量的 N-亚硝基-N-乙基脲 (ENU)。在整个实验期间，无论是在 RBC Pig-a 试验还是 PIGRET 试验中，任何三聚氰胺组的 Pig-a 突变频率（Pig-a MF）都没有增加。RBC Pig-a 和 PIGRET 检测均显示 ENU 组中 Pig-a MF 的显着增加，从单次给药后第 7 天开始。因此，在单次给药后评估这两种测定法时，可用于确定三聚氰胺是非致突变性的。RBC Pig-a 和 PIGRET 检测均显示 ENU 组中 Pig-a MF 的显着增加，从单次给药后第 7 天开始。因此，在单次给药后评估这两种测定法时，可用于确定三聚氰胺是非致突变性的。RBC Pig-a 和 PIGRET 检测均显示 ENU 组中 Pig-a MF 的显着增加，从单次给药后第 7 天开始。因此，在单次给药后评估这两种测定法时，可用于确定三聚氰胺是非致突变性的。