The rat red blood cell (RBC) Pig-a assay has been recommended by an expert working group of the International Workshop on Genotoxicity Testing as a potential new method to evaluate in vivo gene mutations in regulatory genotoxicity risk assessments. In a collaborative study in Japan, an improved Pig-a assay using reticulocytes (PIGRET assay) with magnetic enrichment of CD71-positive cells was evaluated, and it was revealed that this assay could detect the mutagenicity of chemicals earlier than the RBC Pig-a assay could. To verify further the suitability of the PIGRET assay for an in vivo short-term genotoxicity screening test, a joint research study was conducted by the Japanese Environmental Mutagen Society, and 24 compounds were evaluated. One of the compounds evaluated in this study was urethane, a multi-organ rodent carcinogen. Urethane (250, 500, and 1000mg/kg body weight) was orally administered once to 8-week-old male Crl:CD (SD) rats. Blood samples were collected at 1, 2, and 4 weeks after the administration and processed for the RBC Pig-a and PIGRET assays. In the PIGRET assay, the Pig-a mutant frequency (MF) significantly increased at both 2 and 4 weeks after the treatment of 1000mg/kg of urethane. However, in the RBC Pig-a assay, a significant increase in the Pig-a MF was observed only at 1 week after the treatment with 500mg/kg, but the MF value was within our historical control range; therefore, it was judged to be negative. These results suggest that the PIGRET assay might be useful for evaluating the in vivo mutagenicity more clearly than the RBC Pig-a assay after a single treatment of test compounds.

中文翻译：

---

在单次氨基甲酸乙酯处理后检测大鼠外周血中的 Pig-a 基因突变体：RBC Pig-a 和 PIGRET 检测的比较。

大鼠红细胞 (RBC) Pig-a 检测已被国际遗传毒性测试研讨会的专家工作组推荐为一种潜在的新方法，用于在监管遗传毒性风险评估中评估体内基因突变。在日本的一项合作研究中，对使用网织红细胞的改进型 Pig-a 检测（PIGRET 检测）与 CD71 阳性细胞的磁性富集进行了评估，结果表明该检测可以比 RBC Pig-a 更早地检测化学物质的致突变性化验可以。为了进一步验证 PIGRET 检测在体内短期遗传毒性筛选试验中的适用性，日本环境诱变剂协会进行了一项联合研究，并对 24 种化合物进行了评估。本研究中评估的化合物之一是氨基甲酸乙酯，这是一种多器官啮齿动物致癌物。氨基甲酸乙酯 (250, 8 周龄雄性 Crl:CD (SD) 大鼠一次口服给药 500 和 1000mg/kg 体重。在给药后 1、2 和 4 周收集血样并处理用于 RBC Pig-a 和 PIGRET 测定。在 PIGRET 试验中，Pig-a 突变频率 (MF) 在 1000mg/kg 氨基甲酸乙酯处理后的第 2 周和第 4 周均显着增加。然而，在RBC Pig-a试验中，仅在用500mg/kg处理后1周观察到Pig-a MF显着增加，但MF值在我们的历史对照范围内；因此，它被判断为是否定的。这些结果表明，PIGRET 试验可能比 RBC Pig-a 试验更清楚地用于评估单次处理测试化合物后的体内致突变性。和 1000mg/kg 体重）口服给药一次给 8 周大的雄性 Crl:CD (SD) 大鼠。在给药后 1、2 和 4 周收集血样并处理用于 RBC Pig-a 和 PIGRET 测定。在 PIGRET 试验中，Pig-a 突变频率 (MF) 在 1000mg/kg 氨基甲酸乙酯处理后的第 2 周和第 4 周均显着增加。然而，在RBC Pig-a试验中，仅在用500mg/kg处理后1周观察到Pig-a MF显着增加，但MF值在我们的历史对照范围内；因此，它被判断为是否定的。这些结果表明，PIGRET 试验可能比 RBC Pig-a 试验更清楚地用于评估单次处理测试化合物后的体内致突变性。和 1000mg/kg 体重）口服给药一次给 8 周大的雄性 Crl:CD (SD) 大鼠。在给药后 1、2 和 4 周收集血样并处理用于 RBC Pig-a 和 PIGRET 测定。在 PIGRET 试验中，Pig-a 突变频率 (MF) 在 1000mg/kg 氨基甲酸乙酯处理后 2 周和 4 周均显着增加。然而，在RBC Pig-a试验中，仅在用500mg/kg处理后1周观察到Pig-a MF显着增加，但MF值在我们的历史对照范围内；因此，它被判断为是否定的。这些结果表明，PIGRET 试验可能比 RBC Pig-a 试验更清楚地用于评估单次处理测试化合物后的体内致突变性。给药后 4 周，并进行 RBC Pig-a 和 PIGRET 检测。在 PIGRET 试验中，Pig-a 突变频率 (MF) 在 1000mg/kg 氨基甲酸乙酯处理后的第 2 周和第 4 周均显着增加。然而，在RBC Pig-a试验中，仅在用500mg/kg处理后1周观察到Pig-a MF显着增加，但MF值在我们的历史对照范围内；因此，它被判断为是否定的。这些结果表明，PIGRET 试验可能比 RBC Pig-a 试验更清楚地用于评估单次处理测试化合物后的体内致突变性。给药后 4 周，并进行 RBC Pig-a 和 PIGRET 检测。在 PIGRET 试验中，Pig-a 突变频率 (MF) 在 1000mg/kg 氨基甲酸乙酯处理后的第 2 周和第 4 周均显着增加。然而，在RBC Pig-a试验中，仅在用500mg/kg处理后1周观察到Pig-a MF显着增加，但MF值在我们的历史对照范围内；因此，它被判断为是否定的。这些结果表明，PIGRET 试验可能比 RBC Pig-a 试验更清楚地用于评估单次处理测试化合物后的体内致突变性。然而，在RBC Pig-a试验中，仅在用500mg/kg处理后1周观察到Pig-a MF显着增加，但MF值在我们的历史对照范围内；因此，它被判断为是否定的。这些结果表明，PIGRET 试验可能比 RBC Pig-a 试验更清楚地评估体内致突变性，在单次处理测试化合物后。然而，在RBC Pig-a试验中，仅在用500mg/kg处理后1周观察到Pig-a MF显着增加，但MF值在我们的历史对照范围内；因此，它被判断为是否定的。这些结果表明，PIGRET 试验可能比 RBC Pig-a 试验更清楚地用于评估单次处理测试化合物后的体内致突变性。