摘要背景多发性骨髓瘤 (MM) 是高度依赖其微环境的恶性肿瘤。在这项研究中，我们调查了骨髓基质细胞 (BMSC) 和恶性浆细胞之间是否发生线粒体转移。然后，我们使用我们的观察结果作为平台来研究控制促肿瘤线粒体转移的机制，以期确定可药用靶标。方法在知情同意并经英国卫生研究局批准后，从患者的骨髓中获取原代MM细胞。动物实验是在英国内政部和东英吉利大学动物福利和伦理审查委员会的批准下进行的。原代 BMSC 也从患者骨髓中获得，使用粘附并使用流式细胞仪进行表征。使用两种方法评估线粒体转移；a 基于 MitoTracker Green 的 BMSC 染色（体外）， MM 质膜的 rLV.EF1.AcGFP-Mem9 标记，以及 BMSC 的 MitoTracker CMXRos 染色（体外）和体内 MM NSG 异种移植模型。在 ATRA 处理后，使用 RT-qPCR 和流式细胞术测试 MM 细胞上的 CD38 表达。当 CD38 使用 ATRA 过度表达或使用慢病毒靶向 shRNA 抑制时，评估线粒体转移水平。结果 我们报告线粒体从 BMSC 转移到 MM 细胞。首先，我们在 MitoTracker Green 标记的 BMSC 上培养 MM 细胞，发现 MM 细胞中 MitoTracker Green 荧光增加。然后我们用 rLV.EF1 转导 MM。AcGFP-Mem9 慢病毒和用 MitoTracker CMXRos 染色 BMSC 并使用宽视野显微镜显示 MM 细胞和 BMSC 之间形成的 MM 衍生的隧道纳米管 (TNT)，红色线粒体位于 GFP 标记的 TNT 内。接下来，我们将 MM 细胞系 MM1S 和 U266 移植到 NSG 小鼠中，分离后我们检测到纯化的 MM 群体中存在小鼠线粒体 DNA。总之，这些数据表明线粒体从 BMSC 转移到 MM 细胞。我们接下来使用海马细胞外通量测定分析了在 BMSC 上生长的 MM 细胞中的 OXPHOS 水平。我们发现MM细胞与BMSC一起培养后OXPHOS水平升高，从NSG小鼠中分离出来的MM细胞系也是如此，表明MM的微环境可以改变恶性细胞的代谢。为了检查线粒体转移过程是否受 CD38 控制，我们使用慢病毒靶向 shRNA 敲低了 MM 细胞中的 CD38。我们发现 CD38KD MM 细胞中线粒体转移水平降低，因此恶性细胞中的 OXPHOS 减少。最后，由于 ATRA 先前已被证明可以增加 AML 中的 CD38 表达，我们接下来量化了有和没有 ATRA 治疗的恶性浆细胞上的 CD38 mRNA 和表面糖蛋白水平。我们发现 ATRA 在 mRNA 和蛋白质水平上增加了 CD38 的表达，这导致从 BMSC 到 MM 细胞的线粒体转移增加。结论 在此我们表明，CD38 介导的 MM 微环境中的线粒体转移是多发性骨髓瘤恶性表型的一部分。这一发现加深了我们对支持 CD38 定向治疗 MM 疗效的机制的理解。披露 没有需要声明的相关利益冲突。



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