The Colorado potato beetle (Leptinotarsa decemlineata (Say)) is an insect that can adapt to various challenges, including temperature fluctuations or select insecticide treatments. This pest is also an ongoing threat to the potato industry. Small noncoding RNAs such as miRNAs, which can control posttranscriptionally the expression of various genes, and piRNAs, which can notably impact mRNA turnover, are modulated in insects under different conditions. Unfortunately, information regarding the expression status of key players involved in their synthesis and function is for the most part lacking. The current study thus aims at assessing the levels of such targets in L. decemlineata exposed to hot and cold temperatures as well as treated to the insecticides chlorantraniliprole, clothianidin, imidacloprid, and spinosad. Transcript expression levels of Ago1, Ago2, Ago3, Dcr2a, Dcr2b, Expo-5, Siwi-1, and Siwi-2, components of pathways associated with small noncoding RNA production or function, were measured by qRT-PCR and revealed modulation of select transcripts in response to temperature challenges and to select insecticides. RNAi-mediated reduction of Ago2 transcript levels in L. decemlineata injected with Ago2-targeting dsRNA and exposed to cold and warm temperatures was also conducted. Changes in survival rates were observed for the latter condition in dsRNA- versus saline-injected insects. These results showcase the differential expression of select targets involved in small noncoding RNA homeostasis and provide leads for the subsequent assessment of their involvement during stress response in L. decemlineata using RNAi-based approaches.

中文翻译：

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暴露于温度和杀虫剂可调节科罗拉多马铃薯甲虫 Leptinotarsa decemlineata（鞘翅目：Chrysomelidae）中小非编码 RNA 相关转录本的表达。

科罗拉多马铃薯甲虫 (Leptinotarsa decemlineata (Say)) 是一种能够适应各种挑战的昆虫，包括温度波动或选择杀虫剂处理。这种害虫也是对马铃薯产业的持续威胁。小的非编码 RNA，例如 miRNA，可以在转录后控制各种基因的表达，而 piRNA，可以显着影响 mRNA 转换，在不同条件下在昆虫中受到调节。不幸的是，大部分缺乏关于参与其合成和功能的关键参与者的表达状态的信息。因此，目前的研究旨在评估 L. decemlineata 中这些目标的水平，这些目标在暴露于冷热温度下以及使用杀虫剂氯虫苯甲酰胺、噻虫胺、吡虫啉和多杀菌素处理。通过 qRT-PCR 测量 Ago1、Ago2、Ago3、Dcr2a、Dcr2b、Expo-5、Siwi-1 和 Siwi-2（与小非编码 RNA 产生或功能相关的途径的组成部分）的转录表达水平，并揭示了选择的调节转录以应对温度挑战并选择杀虫剂。还进行了 RNAi 介导的 L. decemlineata 中 Ago2 转录水平的降低，该 L. decemlineata 注射了 Ago2 靶向 dsRNA 并暴露于寒冷和温暖的温度。在 dsRNA 与注射盐水的昆虫中观察到后一种情况下存活率的变化。这些结果展示了参与小非编码 RNA 稳态的选定目标的差异表达，并为随后使用基于 RNAi 的方法评估它们在 L. decemlineata 应激反应期间的参与提供了线索。Dcr2a、Dcr2b、Expo-5、Siwi-1 和 Siwi-2 是与小非编码 RNA 产生或功能相关的途径的组成部分，通过 qRT-PCR 测量并揭示了选择转录物响应温度挑战和选择杀虫剂的调节. 还进行了 RNAi 介导的 L. decemlineata 中 Ago2 转录水平的降低，该 L. decemlineata 注射了 Ago2 靶向 dsRNA 并暴露于寒冷和温暖的温度。在 dsRNA 与注射盐水的昆虫中观察到后一种情况下存活率的变化。这些结果展示了参与小非编码 RNA 稳态的选定目标的差异表达，并为随后使用基于 RNAi 的方法评估它们在 L. decemlineata 应激反应期间的参与提供了线索。Dcr2a、Dcr2b、Expo-5、Siwi-1 和 Siwi-2 是与小非编码 RNA 产生或功能相关的途径的组成部分，通过 qRT-PCR 测量并揭示了选择转录物响应温度挑战和选择杀虫剂的调节. 还进行了 RNAi 介导的 L. decemlineata 中 Ago2 转录水平的降低，该 L. decemlineata 注射了 Ago2 靶向 dsRNA 并暴露于寒冷和温暖的温度。在 dsRNA 与注射盐水的昆虫中观察到后一种情况下存活率的变化。这些结果展示了参与小非编码 RNA 稳态的选定目标的差异表达，并为随后使用基于 RNAi 的方法评估它们在 L. decemlineata 应激反应期间的参与提供了线索。通过 qRT-PCR 测量与小非编码 RNA 产生或功能相关的途径的成分，并揭示了对温度挑战和选择杀虫剂的选择转录物的调节。还进行了 RNAi 介导的 L. decemlineata 中 Ago2 转录水平的降低，该 L. decemlineata 注射了 Ago2 靶向 dsRNA 并暴露于寒冷和温暖的温度。在 dsRNA 与注射盐水的昆虫中观察到后一种情况下存活率的变化。这些结果展示了参与小非编码 RNA 稳态的选定目标的差异表达，并为随后使用基于 RNAi 的方法评估它们在 L. decemlineata 应激反应期间的参与提供了线索。通过 qRT-PCR 测量与小非编码 RNA 产生或功能相关的途径的成分，并揭示了对温度挑战和选择杀虫剂的选择转录物的调节。还进行了 RNAi 介导的 L. decemlineata 中 Ago2 转录水平的降低，该 L. decemlineata 注射了 Ago2 靶向 dsRNA 并暴露于寒冷和温暖的温度。在 dsRNA 与注射盐水的昆虫中观察到后一种情况下存活率的变化。这些结果展示了参与小非编码 RNA 稳态的选定目标的差异表达，并为随后使用基于 RNAi 的方法评估它们在 L. decemlineata 应激反应期间的参与提供了线索。通过 qRT-PCR 测量并揭示了选择转录物响应温度挑战和选择杀虫剂的调节。还进行了 RNAi 介导的 L. decemlineata 中 Ago2 转录水平的降低，该 L. decemlineata 注射了 Ago2 靶向 dsRNA 并暴露于寒冷和温暖的温度。在 dsRNA 与注射盐水的昆虫中观察到后一种情况下存活率的变化。这些结果展示了参与小非编码 RNA 稳态的选定目标的差异表达，并为随后使用基于 RNAi 的方法评估它们在 L. decemlineata 应激反应期间的参与提供了线索。通过 qRT-PCR 测量并揭示了选择转录物响应温度挑战和选择杀虫剂的调节。还进行了 RNAi 介导的 L. decemlineata 中 Ago2 转录水平的降低，该 L. decemlineata 注射了 Ago2 靶向 dsRNA 并暴露于寒冷和温暖的温度。在 dsRNA 与注射盐水的昆虫中观察到后一种情况下存活率的变化。这些结果展示了参与小非编码 RNA 稳态的选定目标的差异表达，并为随后使用基于 RNAi 的方法评估它们在 L. decemlineata 应激反应期间的参与提供了线索。还进行了注射 Ago2 靶向 dsRNA 并暴露于寒冷和温暖温度的 decemlineata。在 dsRNA 与注射盐水的昆虫中观察到后一种情况下存活率的变化。这些结果展示了参与小非编码 RNA 稳态的选定目标的差异表达，并为随后使用基于 RNAi 的方法评估它们在 L. decemlineata 应激反应期间的参与提供了线索。还进行了注射 Ago2 靶向 dsRNA 并暴露于寒冷和温暖温度的 decemlineata。在 dsRNA 与注射盐水的昆虫中观察到后一种情况下存活率的变化。这些结果展示了参与小非编码 RNA 稳态的选定目标的差异表达，并为随后使用基于 RNAi 的方法评估它们在 L. decemlineata 应激反应期间的参与提供了线索。