Neutrophil extracellular trap (NET) formation is an immune response to the invasion of external microorganisms. Quercetin, a member of the flavonoid family found in fruits and vegetables, has been examined in multiple biological contexts. The objective of this study was to examine the effect of quercetin on porcine NET formation. We measured NET formation by peripheral blood polymorphonuclear cells (PMNs) using propidium iodide (PI) dye. The amount of tumor necrosis factor (TNF)-α in culture supernatants was quantified by ELISA, and TNF-α mRNA expression was measured by RT-PCR. Direct treatment of PMNs with quercetin did not affect NET formation; however, NET formation was inhibited by exposure to culture supernatant from peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) treated with quercetin. By contrast, culture supernatant from PBMCs treated with lipopolysaccharide (LPS) induced high levels of NET formation of PMNs, and this effect was reduced by co-treatment with LPS and quercetin. In addition, treatment of PMNs with recombinant porcine (rp) TNF-α induced high levels of NET formation. PBMCs treated with LPS increased higher levels of TNF-α mRNA and protein, but this effect was weakened when they were co-treated with quercetin. These findings indicated that quercetin inhibits NET formation of PMNs by suppressing production of TNF-α from LPS-stimulated PBMCs. These results suggest that quercetin exerts an anti-inflammatory effect, mediated by down-regulation of TNF-α production from LPS-stimulated PBMCs, which inhibits NET formation in PMNs.

中性粒细胞胞外陷阱 (NET) 的形成是对外部微生物入侵的免疫反应。槲皮素是水果和蔬菜中发现的类黄酮家族的成员，已在多种生物学背景下进行了检查。本研究的目的是检查槲皮素对猪 NET 形成的影响。我们使用碘化丙啶 (PI) 染料测量了外周血多形核细胞 (PMN) 的 NET 形成。通过ELISA定量培养上清液中肿瘤坏死因子（TNF）-α的量，并通过RT-PCR测量TNF-α的mRNA表达。用槲皮素直接处理 PMN 不会影响 NET 的形成；然而，NET 的形成受到槲皮素处理的外周血单个核细胞 (PBMC) 培养上清液的抑制。相比之下，用脂多糖 (LPS) 处理的 PBMCs 的培养上清液诱导高水平的 PMNs 形成，而这种效应通过与 LPS 和槲皮素共同处理而降低。此外，用重组猪 (rp) TNF-α 处理 PMN 可诱导高水平的 NET 形成。用 LPS 处理的 PBMC 增加了更高水平的 TNF-α mRNA 和蛋白质，但当它们与槲皮素共同处理时，这种作用减弱。这些发现表明，槲皮素通过抑制 LPS 刺激的 PBMC 产生 TNF-α 来抑制 PMN 的 NET 形成。这些结果表明，槲皮素发挥抗炎作用，通过下调 LPS 刺激的 PBMC 产生的 TNF-α 介导，从而抑制 PMN 中的 NET 形成。并且通过与 LPS 和槲皮素共同处理来降低这种效果。此外，用重组猪 (rp) TNF-α 处理 PMN 可诱导高水平的 NET 形成。用 LPS 处理的 PBMC 增加了更高水平的 TNF-α mRNA 和蛋白质，但当它们与槲皮素共同处理时，这种作用减弱。这些发现表明，槲皮素通过抑制 LPS 刺激的 PBMC 产生 TNF-α 来抑制 PMN 的 NET 形成。这些结果表明，槲皮素发挥抗炎作用，通过下调 LPS 刺激的 PBMC 产生的 TNF-α 介导，从而抑制 PMN 中的 NET 形成。并且通过与 LPS 和槲皮素共同处理来降低这种效果。此外，用重组猪 (rp) TNF-α 处理 PMN 可诱导高水平的 NET 形成。用 LPS 处理的 PBMC 增加了更高水平的 TNF-α mRNA 和蛋白质，但当它们与槲皮素共同处理时，这种作用减弱。这些发现表明，槲皮素通过抑制 LPS 刺激的 PBMC 产生 TNF-α 来抑制 PMN 的 NET 形成。这些结果表明，槲皮素发挥抗炎作用，通过下调 LPS 刺激的 PBMC 产生的 TNF-α 介导，从而抑制 PMN 中的 NET 形成。但当它们与槲皮素共同治疗时，这种效果会减弱。这些发现表明，槲皮素通过抑制 LPS 刺激的 PBMC 产生 TNF-α 来抑制 PMN 的 NET 形成。这些结果表明，槲皮素发挥抗炎作用，通过下调 LPS 刺激的 PBMC 产生的 TNF-α 介导，从而抑制 PMN 中的 NET 形成。但当它们与槲皮素共同治疗时，这种效果会减弱。这些发现表明，槲皮素通过抑制 LPS 刺激的 PBMC 产生 TNF-α 来抑制 PMN 的 NET 形成。这些结果表明，槲皮素发挥抗炎作用，通过下调 LPS 刺激的 PBMC 产生的 TNF-α 介导，从而抑制 PMN 中的 NET 形成。