Soluble N-ethylmaleimide-sensitive factor attachment protein receptors (SNAREs) regulate the vesicle transport machinery in phagocytic cells. Within the secretory pathway, Sec22b is an endoplasmic reticulum–Golgi intermediate compartment (ERGIC)-resident SNARE that controls phagosome maturation and function in macrophages and dendritic cells. The secretory pathway controls the release of cytokines and may also impact the secretion of NO, which is synthesized by the Golgi-active inducible NO synthase (iNOS). Whether ERGIC SNARE Sec22b controls NO and cytokine secretion is unknown. Using murine bone marrow-derived dendritic cells, we demonstrated that inducible NO synthase colocalizes with ERGIC/Golgi markers, notably Sec22b and its partner syntaxin 5, in the cytoplasm and at the phagosome. Pharmacological blockade of the secretory pathway hindered NO and cytokine release, and inhibited NF-κB translocation to the nucleus. Importantly, RNA interference–mediated silencing of Sec22b revealed that NO and cytokine production were abrogated at the protein and mRNA levels. This correlated with reduced nuclear translocation of NF-κB. We also found that Sec22b co-occurs with NF-κB in both the cytoplasm and nucleus, pointing to a role for this SNARE in the shuttling of NF-κB. Collectively, our data unveiled a novel function for the ERGIC/Golgi, and its resident SNARE Sec22b, in the production and release of inflammatory mediators.

可溶性氮-乙基马来酰亚胺敏感因子附着蛋白受体 (SNARE) 调节吞噬细胞中的囊泡转运机制。在分泌途径中，Sec22b 是一种内质网 - 高尔基体中间区室 (ERGIC) 驻留的 SNARE，控制巨噬细胞和树突细胞中的吞噬体成熟和功能。分泌途径控制细胞因子的释放，也可能影响 NO 的分泌，NO 由高尔基体活性诱导型 NO 合酶 (iNOS) 合成。ERGIC SNARE Sec22b 是否控制 NO 和细胞因子分泌尚不清楚。使用鼠骨髓衍生的树突细胞，我们证明了诱导型 NO 合酶与细胞质和吞噬体中的 ERGIC/高尔基体标记物共定位，特别是 Sec22b 及其伴侣突触蛋白 5。分泌途径的药理学阻断阻碍了 NO 和细胞因子的释放，并抑制了 NF-κB 向细胞核的易位。重要的是，RNA 干扰介导的 Sec22b 沉默表明 NO 和细胞因子的产生在蛋白质和 mRNA 水平被废除。这与 NF-κB 的核易位减少有关。我们还发现 Sec22b 在细胞质和细胞核中与 NF-κB 共同出现，表明该 SNARE 在 NF-κB 穿梭中的作用。总的来说，我们的数据揭示了 ERGIC/高尔基体及其驻留的 SNARE Sec22b 在炎症介质的产生和释放方面的新功能。这与 NF-κB 的核易位减少有关。我们还发现 Sec22b 在细胞质和细胞核中与 NF-κB 共同出现，表明该 SNARE 在 NF-κB 穿梭中的作用。总的来说，我们的数据揭示了 ERGIC/高尔基体及其常驻 SNARE Sec22b 在炎症介质的产生和释放方面的新功能。这与 NF-κB 的核易位减少有关。我们还发现 Sec22b 在细胞质和细胞核中与 NF-κB 共同出现，表明该 SNARE 在 NF-κB 穿梭中的作用。总的来说，我们的数据揭示了 ERGIC/高尔基体及其驻留的 SNARE Sec22b 在炎症介质的产生和释放方面的新功能。