Neurobrucellosis is a serious central nervous system (CNS) inflammatory disorder caused by Brucella, and outer membrane protein-31 (Omp31) plays an important role in Brucella infection. This study aims to determine whether Omp31 can induce autophagy in BV-2 microglia. Another goal of the study is to further examine the effect of autophagy on the nuclear transcription factor κB (NF-κB) p65 signaling pathway. We observed that Omp31 stimulated autophagy by increasing microtubule-associated protein 1 light chain 3B (LC3B-II) levels and inducing autophagosome formation at 6 h and 12 h. Concomitantly, Omp31 induced tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) and interleukin-6 (IL-6) expression in a time-dependent manner but reduced the expression of TNF-α at 6 h. We utilized Omp31 with or without rapamycin or 3-methyladenine (3-MA) to treat BV-2 microglia, and it demonstrated further that Omp31 induced autophagy by promoting LC3B-II, Beclin-1 proteins expression and inhibiting the p62 protein levels. Furthermore, we explored the effects of autophagy on the NF-κB p65 pathway through western blot analysis, RT-qPCR assay, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and immunofluorescence. The data suggest that Omp31 as well as rapamycin, the autophagy inducer, can decrease TNF-α levels through the inhibition of the NF-κB p65 signaling pathway. Taken together, Omp31 can function as a catalyst in both autophagy induction and NF-κB p65 signal inhibition. Furthermore, Omp31-induced autophagy may inhibit the expression of TNF-α by negatively regulating NF-κB p65 signaling pathway.

神经布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的严重中枢神经系统（CNS）炎症性疾病，外膜蛋白31（Omp31）在布鲁氏菌感染中发挥重要作用。本研究旨在确定 Omp31 是否可以诱导 BV-2 小胶质细胞自噬。该研究的另一个目标是进一步研究自噬对核转录因子κB（NF-κB）p65信号通路的影响。我们观察到 Omp31 通过增加微管相关蛋白 1 轻链 3B (LC3B-II) 水平并在 6 小时和 12 小时诱导自噬体形成来刺激自噬。与此同时，Omp31 以时间依赖性方式诱导肿瘤坏死因子-α (TNF-α) 和白介素-6 (IL-6) 表达，但在 6 小时时降低 TNF-α 的表达。我们利用 Omp31 联合或不联合雷帕霉素或 3-甲基腺嘌呤 (3-MA) 来治疗 BV-2 小胶质细胞，进一步证明Omp31通过促进LC3B-II、Beclin-1蛋白表达并抑制p62蛋白水平诱导自噬。此外，我们通过蛋白质印迹分析、RT-qPCR 测定、酶联免疫吸附测定 (ELISA) 和免疫荧光探讨了自噬对 NF-κB p65 通路的影响。数据表明，Omp31 以及自噬诱导剂雷帕霉素可以通过抑制 NF-κB p65 信号通路来降低 TNF-α 水平。总而言之，Omp31 可以作为自噬诱导和 NF-κB p65 信号抑制的催化剂。此外，Omp31诱导的自噬可能通过负向调节NF-κB p65信号通路来抑制TNF-α的表达。Beclin-1 蛋白表达并抑制 p62 蛋白水平。此外，我们通过蛋白质印迹分析、RT-qPCR 测定、酶联免疫吸附测定 (ELISA) 和免疫荧光探讨了自噬对 NF-κB p65 通路的影响。数据表明，Omp31 以及自噬诱导剂雷帕霉素可以通过抑制 NF-κB p65 信号通路来降低 TNF-α 水平。总而言之，Omp31 可以作为自噬诱导和 NF-κB p65 信号抑制的催化剂。此外，Omp31诱导的自噬可能通过负向调节NF-κB p65信号通路来抑制TNF-α的表达。Beclin-1 蛋白表达并抑制 p62 蛋白水平。此外，我们通过蛋白质印迹分析、RT-qPCR 测定、酶联免疫吸附测定 (ELISA) 和免疫荧光探讨了自噬对 NF-κB p65 通路的影响。数据表明，Omp31 以及自噬诱导剂雷帕霉素可以通过抑制 NF-κB p65 信号通路来降低 TNF-α 水平。总而言之，Omp31 可以作为自噬诱导和 NF-κB p65 信号抑制的催化剂。此外，Omp31诱导的自噬可能通过负向调节NF-κB p65信号通路来抑制TNF-α的表达。数据表明，Omp31 以及自噬诱导剂雷帕霉素可以通过抑制 NF-κB p65 信号通路来降低 TNF-α 水平。总而言之，Omp31 可以作为自噬诱导和 NF-κB p65 信号抑制的催化剂。此外，Omp31诱导的自噬可能通过负向调节NF-κB p65信号通路来抑制TNF-α的表达。数据表明，Omp31 以及自噬诱导剂雷帕霉素可以通过抑制 NF-κB p65 信号通路来降低 TNF-α 水平。总而言之，Omp31 可以作为自噬诱导和 NF-κB p65 信号抑制的催化剂。此外，Omp31诱导的自噬可能通过负向调节NF-κB p65信号通路来抑制TNF-α的表达。