Transforming growth factor‑β2 (TGF‑β2) has been implicated in the pathogenesis of proliferative vitreoretinopathy (PVR) and proliferative diabetic retinopathy (PDR), due to its ability to stimulate the overproduction of pro‑angiogenic factors, such as vascular endothelial growth factor (VEGF), and remodeling of the extracellular matrix (ECM). Although intravitreal triamcinolone acetonide (TA) is clinically useful in the treatment of PVR and PDR, its molecular mechanism has yet to be fully elucidated. The present study investigated whether TA treatment altered TGF‑β2‑driven biological effects on the behavior of cultured human retinal pigment epithelial (RPE) cells, in order to determine which signaling pathway may be essential for the pharmacological action of TA. The R‑50 human RPE cell line was treated with TA in the presence of TGF‑β2, followed by analyses of cell viability and contraction using cell viability and collagen gel contraction assays. VEGF mRNA expression and protein production were measured using reverse transcription‑quantitative PCR and ELISA, respectively. The phosphorylation status of signaling mediators and the protein expression of type I collagen (COL1A1), α‑smooth muscle actin (α‑SMA), and ECM‑remodeling enzymes, including MMP‑2 and MMP‑9, were analyzed using western blotting. The gelatinolytic activity of MMPs was detected using gelatin zymography. TA treatment exhibited no prominent cytotoxicity but markedly antagonized TGF‑β2‑induced cytostatic effects on RPE cell viability and TGF‑β2‑enhanced contractility in collagen gels. In the context of TGF‑β2‑related signaling, TA significantly attenuated TGF‑β2‑elicited Smad2, extracellular‑regulated kinase (ERK)1/2 and p38 mitogen‑activated protein kinase (MAPK) phosphorylation. Moreover, TA markedly mitigated TGF‑β2‑induced VEGF upregulation through ablation of p38 signaling activity. TA also partially attenuated TGF‑β2‑elicted expression of COL1A1, α‑SMA, MMP‑2, and MMP‑9, but only suppressed TGF‑β2‑induced MMP‑9 gelatinolytic activity. Mechanistically, the MEK/ERK signaling pathway may have a critical role in the TGF‑β2‑induced upregulation of COL1A1, α‑SMA and MMP‑9. In conclusion, TA may be considered a useful therapeutic agent for treating TGF‑β2‑associated intraocular angiogenesis and tissue remodeling, the underlying mechanism of which may involve the ERK and p38 MAPK signaling pathways.

中文翻译：

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Triamcinolone acetonide 在培养的人视网膜色素上皮细胞中调节 TGF-β2 诱导的血管生成和组织重塑作用。

转化生长因子-β2 (TGF-β2) 与增殖性玻璃体视网膜病变 (PVR) 和增殖性糖尿病视网膜病变 (PDR) 的发病机制有关，因为它能够刺激血管内皮生长因子等促血管生成因子的过度产生(VEGF) 和细胞外基质 (ECM) 的重塑。虽然玻璃体内注射曲安奈德 (TA) 在临床上可用于治疗 PVR 和 PDR，但其分子机制尚未完全阐明。本研究调查了 TA 治疗是否改变了 TGF-β2 驱动的对培养的人视网膜色素上皮 (RPE) 细胞行为的生物学效应，以确定哪种信号通路可能对 TA 的药理作用至关重要。在存在 TGF-β2 的情况下，用 TA 处理 R-50 人 RPE 细胞系，然后使用细胞活力和胶原凝胶收缩测定分析细胞活力和收缩。分别使用逆转录定量 PCR 和 ELISA 测量 VEGF mRNA 表达和蛋白质产生。使用蛋白质印迹分析信号介质的磷酸化状态和 I 型胶原蛋白 (COL1A1)、α-平滑肌肌动蛋白 (α-SMA) 和 ECM 重塑酶（包括 MMP-2 和 MMP-9）的蛋白质表达。使用明胶酶谱法检测 MMP 的明胶分解活性。TA 治疗没有表现出显着的细胞毒性，但显着拮抗 TGF-β2 诱导的对 RPE 细胞活力的细胞抑制作用和 TGF-β2 增强的胶原凝胶收缩性。在 TGF-β2 相关信号的背景下，TA 显着减弱了 TGF-β2 引发的 Smad2，细胞外调节激酶 (ERK)1/2 和 p38 丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK) 磷酸化。此外，TA 通过消除 p38 信号活性显着减轻 TGF-β2 诱导的 VEGF 上调。TA 还部分减弱了 TGF-β2 诱导的 COL1A1、α-SMA、MMP-2 和 MMP-9 的表达，但仅抑制了 TGF-β2 诱导的 MMP-9 凝胶溶解活性。从机制上讲，MEK/ERK 信号通路可能在 TGF-β2 诱导的 COL1A1、α-SMA 和 MMP-9 上调中发挥关键作用。总之，TA 可能被认为是治疗 TGF-β2 相关眼内血管生成和组织重塑的有用治疗剂，其潜在机制可能涉及 ERK 和 p38 MAPK 信号通路。TA 通过消除 p38 信号活性显着减轻 TGF-β2 诱导的 VEGF 上调。TA 还部分减弱了 TGF-β2 诱导的 COL1A1、α-SMA、MMP-2 和 MMP-9 的表达，但仅抑制了 TGF-β2 诱导的 MMP-9 凝胶溶解活性。从机制上讲，MEK/ERK 信号通路可能在 TGF-β2 诱导的 COL1A1、α-SMA 和 MMP-9 上调中发挥关键作用。总之，TA 可能被认为是治疗 TGF-β2 相关眼内血管生成和组织重塑的有用治疗剂，其潜在机制可能涉及 ERK 和 p38 MAPK 信号通路。TA 通过消除 p38 信号活性显着减轻 TGF-β2 诱导的 VEGF 上调。TA 还部分减弱了 TGF-β2 诱导的 COL1A1、α-SMA、MMP-2 和 MMP-9 的表达，但仅抑制了 TGF-β2 诱导的 MMP-9 凝胶溶解活性。从机制上讲，MEK/ERK 信号通路可能在 TGF-β2 诱导的 COL1A1、α-SMA 和 MMP-9 上调中发挥关键作用。总之，TA 可能被认为是治疗 TGF-β2 相关眼内血管生成和组织重塑的有用治疗剂，其潜在机制可能涉及 ERK 和 p38 MAPK 信号通路。MEK/ERK 信号通路可能在 TGF-β2 诱导的 COL1A1、α-SMA 和 MMP-9 上调中发挥关键作用。总之，TA 可能被认为是治疗 TGF-β2 相关眼内血管生成和组织重塑的有用治疗剂，其潜在机制可能涉及 ERK 和 p38 MAPK 信号通路。MEK/ERK 信号通路可能在 TGF-β2 诱导的 COL1A1、α-SMA 和 MMP-9 上调中发挥关键作用。总之，TA 可能被认为是治疗 TGF-β2 相关眼内血管生成和组织重塑的有用治疗剂，其潜在机制可能涉及 ERK 和 p38 MAPK 信号通路。