Background Determination of a multi-component mixture by HPLC requires many preliminary runs for method development which is both time-consuming and expensive due to the usage of large solvent volumes. Objective In the present study, the main objective was to reduce the preliminary runs that are required for optimizing the method conditions and also shorten the run time of analysis to be suitable for quality control laboratories where there are a large number of samples to be analyzed. Methods That was achieved using a two-factor, three-level response surface experiment which is a multivariate design that predicts the significant factors for optimizing the studied responses. Results The response surface design suggests that both acetonitrile ratio and flow rate are significant factors for full resolution of the studied mixture: atenolol, amiloride, and hydrochlorothiazide. The studied mixture was fully separated and determined in less than 5 min with perfect resolution. Conclusion Experimental design is a very beneficial tool for optimization of the method conditions in HPLC, especially if the studied mixture ingredients have overlapping peaks. For atenolol, amiloride, and hydrochlorothiazide, acetonitrile and flow rate were found to be the significant factors that affected the resolution of the studied mixture. Highlights Response surface design is a powerful tool that could be used for predicting the significant factors for separation in HPLC. Optimization of the method conditions was done using a limited number of preliminary runs. The studied ternary mixture was fully separated in less than 5 min with the aid of experimental design.

中文翻译：

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通过响应面法对抗高血压组合进行 HPLC 分离和定量的数学模型

背景 通过 HPLC 测定多组分混合物需要许多初步运行以进行方法开发，由于使用大量溶剂，这既费时又昂贵。目的在本研究中，主要目的是减少优化方法条件所需的初步运行，同时缩短分析运行时间，以适用于需要分析大量样品的质量控制实验室。方法 这是使用二因素、三水平响应面实验实现的，该实验是一种多元设计，可预测优化研究响应的重要因素。结果 响应面设计表明，乙腈比例和流速都是研究混合物全分辨率的重要因素：阿替洛尔、阿米洛利、和氢氯噻嗪。所研究的混合物在不到 5 分钟的时间内以完美的分辨率完全分离和测定。结论 实验设计是优化 HPLC 方法条件的非常有益的工具，特别是在所研究的混合物成分具有重叠峰的情况下。对于阿替洛尔、阿米洛利和氢氯噻嗪，乙腈和流速被发现是影响所研究混合物分离度的重要因素。亮点 响应面设计是一种强大的工具，可用于预测 HPLC 中分离的重要因素。使用有限数量的初步运行对方法条件进行了优化。借助实验设计，研究的三元混合物在不到 5 分钟的时间内完全分离。所研究的混合物在不到 5 分钟的时间内以完美的分辨率完全分离和测定。结论 实验设计是优化 HPLC 方法条件的非常有益的工具，特别是在所研究的混合物成分具有重叠峰的情况下。对于阿替洛尔、阿米洛利和氢氯噻嗪，乙腈和流速被发现是影响所研究混合物分离度的重要因素。亮点 响应面设计是一种强大的工具，可用于预测 HPLC 中分离的重要因素。使用有限数量的初步运行对方法条件进行了优化。借助实验设计，研究的三元混合物在不到 5 分钟的时间内完全分离。所研究的混合物在不到 5 分钟的时间内以完美的分辨率完全分离和测定。结论 实验设计是优化 HPLC 方法条件的非常有益的工具，特别是在所研究的混合物成分具有重叠峰的情况下。对于阿替洛尔、阿米洛利和氢氯噻嗪，乙腈和流速被发现是影响所研究混合物分离度的重要因素。亮点 响应面设计是一种强大的工具，可用于预测 HPLC 中分离的重要因素。使用有限数量的初步运行对方法条件进行了优化。借助实验设计，研究的三元混合物在不到 5 分钟的时间内完全分离。结论 实验设计是优化 HPLC 方法条件的非常有益的工具，特别是在所研究的混合物成分具有重叠峰的情况下。对于阿替洛尔、阿米洛利和氢氯噻嗪，乙腈和流速被发现是影响所研究混合物分离度的重要因素。亮点 响应面设计是一种强大的工具，可用于预测 HPLC 中分离的重要因素。使用有限数量的初步运行对方法条件进行了优化。借助实验设计，研究的三元混合物在不到 5 分钟的时间内完全分离。结论 实验设计是优化 HPLC 方法条件的非常有益的工具，特别是在所研究的混合物成分具有重叠峰的情况下。对于阿替洛尔、阿米洛利和氢氯噻嗪，乙腈和流速被发现是影响所研究混合物分离度的重要因素。亮点 响应面设计是一种强大的工具，可用于预测 HPLC 中分离的重要因素。使用有限数量的初步运行对方法条件进行了优化。借助实验设计，研究的三元混合物在不到 5 分钟的时间内完全分离。发现阿米洛利和氢氯噻嗪、乙腈和流速是影响所研究混合物分离度的重要因素。亮点 响应面设计是一种强大的工具，可用于预测 HPLC 中分离的重要因素。使用有限数量的初步运行对方法条件进行了优化。借助实验设计，研究的三元混合物在不到 5 分钟的时间内完全分离。发现阿米洛利和氢氯噻嗪、乙腈和流速是影响所研究混合物分离度的重要因素。亮点 响应面设计是一种强大的工具，可用于预测 HPLC 中分离的重要因素。使用有限数量的初步运行对方法条件进行了优化。借助实验设计，研究的三元混合物在不到 5 分钟的时间内完全分离。使用有限数量的初步运行对方法条件进行了优化。借助实验设计，研究的三元混合物在不到 5 分钟的时间内完全分离。使用有限数量的初步运行对方法条件进行了优化。借助实验设计，研究的三元混合物在不到 5 分钟的时间内完全分离。