Antibody-mediated rejection (AMR) induced by donor-specific anti-HLA antibodies (DSA) remains a major cause of long-term graft loss after kidney transplantation. Currently, the presence of DSA cannot always be determined at a specific allele level, because existing donor HLA typing is low resolution and often incomplete, lacking HLA-DP, and occasionally HLA-C and HLA-DQ information and historical donor DNA samples are not available for HLA retyping. Here we present a novel, non-invasive technique for obtaining donor DNA from selectively expanded donor cells from urine of renal transplant recipients. Urine-derived cells were successfully expanded ex vivo from 31 of 32 enrolled renal transplant recipients, and with DNA obtained from these cells, donor HLA typing was unambiguously determined for HLA-A, -B, -C, -DRB1, -DQA1, -DQB1, -DPA1 and -DPB1 loci by next-generation sequencing. Our results showed 100% concordance of HLA typing data between donor peripheral blood and recipient urine-derived cells. In comparison, HLA typing showed that DNA derived from urine sediments mainly contained recipient-derived DNA. We also present the successful application of our novel technique in a clinical case of AMR in a renal transplant recipient. Urine-derived donor cells can be isolated from kidney transplant recipients and serve as a suitable source of donor material for reliable high-resolution HLA genotyping. Thus, this approach can aid the assessment of DSA specificity to support the diagnosis of AMR as well as the evaluation of treatment efficacy in kidney transplant recipients when complete donor HLA information and donor DNA are unavailable.

中文翻译：

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肾移植受者体外扩增尿细胞的供体 HLA 基因分型

供体特异性抗 HLA 抗体 (DSA) 诱导的抗体介导的排斥 (AMR) 仍然是肾移植后长期移植物丢失的主要原因。目前，不能总是在特定的等位基因水平上确定 DSA 的存在，因为现有的供体 HLA 分型分辨率低且往往不完整，缺乏 HLA-DP，偶尔 HLA-C 和 HLA-DQ 信息和历史供体 DNA 样本不可用于 HLA 重新输入。在这里，我们提出了一种新的非侵入性技术，用于从肾移植受者尿液中选择性扩增的供体细胞中获取供体 DNA。从 32 名登记的肾移植受者中的 31 名成功体外扩增尿液衍生细胞，从这些细胞中获得 DNA，明确确定供体 HLA 分型的 HLA-A、-B、-C、-DRB1、-DQA1、- DQB1, -DPA1 和 -DPB1 基因座通过下一代测序。我们的结果显示供体外周血和受体尿液衍生细胞之间的 HLA 分型数据 100% 一致。相比之下，HLA 分型显示来自尿沉渣的 DNA 主要包含受体来源的 DNA。我们还介绍了我们的新技术在肾移植受者 AMR 临床病例中的成功应用。尿液来源的供体细胞可以从肾移植受者中分离出来，并作为供体材料的合适来源，用于可靠的高分辨率 HLA 基因分型。因此，当无法获得完整的供体 HLA 信息和供体 DNA 时，这种方法可以帮助评估 DSA 特异性以支持 AMR 的诊断以及评估肾移植受者的治疗效果。我们的结果显示供体外周血和受体尿液衍生细胞之间的 HLA 分型数据 100% 一致。相比之下，HLA 分型显示来自尿沉渣的 DNA 主要包含受体来源的 DNA。我们还介绍了我们的新技术在肾移植受者 AMR 临床病例中的成功应用。尿液来源的供体细胞可以从肾移植受者中分离出来，并作为供体材料的合适来源，用于可靠的高分辨率 HLA 基因分型。因此，当无法获得完整的供体 HLA 信息和供体 DNA 时，这种方法可以帮助评估 DSA 特异性以支持 AMR 的诊断以及评估肾移植受者的治疗效果。我们的结果显示供体外周血和受体尿液衍生细胞之间的 HLA 分型数据 100% 一致。相比之下，HLA 分型显示来自尿沉渣的 DNA 主要包含受体来源的 DNA。我们还介绍了我们的新技术在肾移植受者 AMR 临床病例中的成功应用。尿液来源的供体细胞可以从肾移植受者中分离出来，并作为供体材料的合适来源，用于可靠的高分辨率 HLA 基因分型。因此，当无法获得完整的供体 HLA 信息和供体 DNA 时，这种方法可以帮助评估 DSA 特异性以支持 AMR 的诊断以及评估肾移植受者的治疗效果。