BACKGROUND The alkylating agent temozolomide is part of standard care for patients with glioblastoma. Potential novel therapeutic agents are often first evaluated against temozolomide in glioblastoma cell line models. Despite the importance of this step in compound development, there is no standard concentration or exposure duration of temozolomide in laboratory research, and consistency in the effect of temozolomide on glioblastoma cell lines has not been assessed. This systematic review aimed to summarise the concentration and exposure duration of temozolomide and its effect on cell viability in studies using glioblastoma cell lines. MATERIAL AND METHODS We searched Medline and Embase Jan 1994 - Feb 2021 for studies that used at least one glioblastoma cell line and reported a measure of cell viability associated with temozolomide exposure. Studies were excluded if they used modified cell lines or did not report a cell viability measure associated with temozolomide as monotherapy. One reviewer screened all records and two reviewers assessed potentially eligible studies for inclusion. The main data items included the cell lines used, the concentration and exposure duration to temozolomide, and cell viability measures. We summarised findings using descriptive statistics. RESULTS Of 1,533 potentially eligible studies we included 213 studies reporting 209 different cell lines. The most common cell lines were U87, U251 and T98G, used in 61%, 41%, and 27% of studies, respectively. Twenty-five (12%) studies used patient-derived cell lines. The concentration of temozolomide used ranged from 0 to 8000μM. The temozolomide exposure duration ranged from <24 hours to >96 hours, with 29% studies using 72 hours. The most common cell viability measure was half maximal inhibitory concentration (IC50), which was reported in 183 (86%) studies. The median IC50 in 32 studies using the U87 cell line was 180μM (interquartile range [IQR]: 52–254μM) at 48-hour temozolomide exposure and 202μM (IQR 52–518μM) at 72-hour exposure. The median IC50 in 31 studies using U251 cell line was 84μM (IQR: 34–324μM) at 48-hour exposure and 102μM (IQR: 35–358μM) at 72-hour exposure. CONCLUSION Experimental setup of temozolomide and its effect on cell viability vary widely between studies using similar glioblastoma cell lines. This inconsistency of response to temozolomide questions reproducibility and the translational value of study findings.

中文翻译：

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P13.09 替莫唑胺暴露对胶质母细胞瘤细胞系模型中细胞活力的影响不一致 - 系统评价

背景 烷化剂替莫唑胺是胶质母细胞瘤患者标准治疗的一部分。潜在的新型治疗药物通常首先在胶质母细胞瘤细胞系模型中针对替莫唑胺进行评估。尽管这一步在化合物开发中很重要，但在实验室研究中没有标准的替莫唑胺浓度或暴露时间，并且尚未评估替莫唑胺对胶质母细胞瘤细胞系的影响的一致性。本系统评价旨在总结替莫唑胺的浓度和暴露时间及其对胶质母细胞瘤细胞系研究中细胞活力的影响。材料和方法 我们在 1994 年 1 月至 2021 年 2 月期间搜索了 Medline 和 Embase，以查找使用至少一种胶质母细胞瘤细胞系并报告了与替莫唑胺暴露相关的细胞活力测量的研究。如果研究使用修饰细胞系或未报告与替莫唑胺作为单一疗法相关的细胞活力测量，则排除研究。一名评审员筛选了所有记录，两名评审员评估了可能符合条件的研究以纳入研究。主要数据项包括使用的细胞系、替莫唑胺的浓度和暴露时间以及细胞活力测量。我们使用描述性统计总结了调查结果。结果 在 1,533 项可能符合条件的研究中，我们纳入了 213 项研究，报告了 209 种不同的细胞系。最常见的细胞系是 U87、U251 和 T98G，分别用于 61%、41% 和 27% 的研究。25 项 (12%) 研究使用了患者来源的细胞系。使用的替莫唑胺浓度范围为 0 至 8000μM。替莫唑胺暴露持续时间范围为＜24 小时至＞96 小时，29% 的研究使用 72 小时。最常见的细胞活力测量是最大抑制浓度 (IC50) 的一半，这在 183 项 (86%) 研究中得到了报道。使用 U87 细胞系的 32 项研究的中位 IC50 在 48 小时替莫唑胺暴露时为 180μM（四分位距 [IQR]：52-254μM），在 72 小时暴露时为 202μM（IQR 52-518μM）。在使用 U251 细胞系的 31 项研究中，暴露 48 小时时 IC50 的中位数为 84μM（IQR：34–324μM），暴露 72 小时时 IC50 中值为 102μM（IQR：35–358μM）。结论 替莫唑胺的实验设置及其对细胞活力的影响在使用类似胶质母细胞瘤细胞系的研究之间差异很大。这种对替莫唑胺反应的不一致问题的可重复性和研究结果的转化价值。最常见的细胞活力测量是最大抑制浓度 (IC50) 的一半，这在 183 项 (86%) 研究中得到了报道。使用 U87 细胞系的 32 项研究的中位 IC50 在 48 小时替莫唑胺暴露时为 180μM（四分位距 [IQR]：52-254μM），在 72 小时暴露时为 202μM（IQR 52-518μM）。在使用 U251 细胞系的 31 项研究中，暴露 48 小时时 IC50 的中位数为 84μM（IQR：34–324μM），暴露 72 小时时 IC50 中值为 102μM（IQR：35–358μM）。结论 替莫唑胺的实验设置及其对细胞活力的影响在使用类似胶质母细胞瘤细胞系的研究之间差异很大。这种对替莫唑胺反应的不一致问题的可重复性和研究结果的转化价值。最常见的细胞活力测量是最大抑制浓度 (IC50) 的一半，这在 183 项 (86%) 研究中得到了报道。使用 U87 细胞系的 32 项研究的中位 IC50 在 48 小时替莫唑胺暴露时为 180μM（四分位距 [IQR]：52-254μM），在 72 小时暴露时为 202μM（IQR 52-518μM）。在使用 U251 细胞系的 31 项研究中，暴露 48 小时时 IC50 的中位数为 84μM（IQR：34–324μM），暴露 72 小时时 IC50 中值为 102μM（IQR：35–358μM）。结论 替莫唑胺的实验设置及其对细胞活力的影响在使用类似胶质母细胞瘤细胞系的研究之间差异很大。这种对替莫唑胺反应的不一致问题的可重复性和研究结果的转化价值。使用 U87 细胞系的 32 项研究的中位 IC50 在 48 小时替莫唑胺暴露时为 180μM（四分位距 [IQR]：52-254μM），在 72 小时暴露时为 202μM（IQR 52-518μM）。在使用 U251 细胞系的 31 项研究中，暴露 48 小时时 IC50 的中位数为 84μM（IQR：34–324μM），暴露 72 小时时 IC50 中值为 102μM（IQR：35–358μM）。结论 替莫唑胺的实验设置及其对细胞活力的影响在使用类似胶质母细胞瘤细胞系的研究之间差异很大。这种对替莫唑胺反应的不一致问题的可重复性和研究结果的转化价值。使用 U87 细胞系的 32 项研究的中位 IC50 在 48 小时替莫唑胺暴露时为 180μM（四分位距 [IQR]：52-254μM），在 72 小时暴露时为 202μM（IQR 52-518μM）。在使用 U251 细胞系的 31 项研究中，暴露 48 小时时 IC50 的中位数为 84μM（IQR：34–324μM），暴露 72 小时时 IC50 中值为 102μM（IQR：35–358μM）。结论 替莫唑胺的实验设置及其对细胞活力的影响在使用类似胶质母细胞瘤细胞系的研究之间差异很大。这种对替莫唑胺反应的不一致问题的可重复性和研究结果的转化价值。结论 替莫唑胺的实验设置及其对细胞活力的影响在使用类似胶质母细胞瘤细胞系的研究之间差异很大。这种对替莫唑胺反应的不一致问题的可重复性和研究结果的转化价值。结论 替莫唑胺的实验设置及其对细胞活力的影响在使用类似胶质母细胞瘤细胞系的研究之间差异很大。这种对替莫唑胺反应的不一致问题的可重复性和研究结果的转化价值。