Murine norovirus (MNV) is widely used as a model for studying norovirus biology. While MNV isolates vary in their pathogenesis, infection of immunocompetent mice mostly results in persistent infection. The ability of a virus to establish a persistent infection is dependent on its ability to subvert or avoid the host immune response. Previously, we described the identification and characterization of virulence factor 1 (VF1) in MNV, and demonstrated its role as an innate immune antagonist. Here, we explore the role of VF1 during persistent MNV infection in an immunocompetent host. Using reverse genetics, we generated MNV-3 viruses carrying a single or a triple termination codon inserted in the VF1 ORF. VF1-deleted MNV-3 replicated to comparable levels to the wildtype virus in tissue culture. Comparative studies between MNV-3 and an acute MNV-1 strain show that MNV-3 VF1 exerts the same functions as MNV-1 VF1, but with reduced potency. C57BL/6 mice infected with VF1-deleted MNV-3 showed significantly reduced replication kinetics during the acute phase of the infection, but viral loads rapidly reached the levels seen in mice infected with wildtype virus after phenotypic restoration of VF1 expression. Infection with an MNV-3 mutant that had three termination codons inserted into VF1, in which reversion was suppressed, resulted in consistently lower replication throughout a 3 month persistent infection in mice, suggesting a role for VF1 in viral fitness in vivo. Our results indicate that VF1 expressed by a persistent strain of MNV also functions to antagonize the innate response to infection. We found that VF1 is not essential for viral persistence, but instead contributes to viral fitness in mice. These data fit with the hypothesis that noroviruses utilize multiple mechanisms to avoid and/or control the host response to infection and that VF1 is just one component of this.

中文翻译：

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鼠诺如病毒毒力因子 1 (VF1) 蛋白有助于持续感染期间的病毒适应性

鼠诺如病毒 (MNV) 被广泛用作研究诺如病毒生物学的模型。虽然 MNV 分离株的发病机制各不相同，但免疫活性小鼠的感染主要导致持续感染。病毒建立持续感染的能力取决于其破坏或避免宿主免疫反应的能力。以前，我们描述了 MNV 中毒力因子 1 (VF1) 的鉴定和表征，并证明了其作为先天免疫拮抗剂的作用。在这里，我们探索了 VF1 在免疫活性宿主中持续 MNV 感染过程中的作用。使用反向遗传学，我们生成了 MNV-3 病毒，该病毒携带一个或三个终止密码子插入 VF1 ORF。VF1 缺失的 MNV-3 在组织培养中复制到与野生型病毒相当的水平。MNV-3 和急性 MNV-1 菌株之间的比较研究表明，MNV-3 VF1 发挥与 MNV-1 VF1 相同的功能，但效力降低。感染了 VF1 缺失的 MNV-3 的 C57BL/6 小鼠在感染的急性期表现出显着降低的复制动力学，但在 VF1 表达表型恢复后，病毒载量迅速达到了感染野生型病毒的小鼠中所见的水平。感染具有三个终止密码子插入 VF1 的 MNV-3 突变体，其中逆转被抑制，导致小鼠在 3 个月持续感染中持续降低复制，表明 VF1 在病毒适应性中的作用 感染了 VF1 缺失的 MNV-3 的 C57BL/6 小鼠在感染的急性期表现出显着降低的复制动力学，但在 VF1 表达表型恢复后，病毒载量迅速达到了感染野生型病毒的小鼠的水平。感染具有三个终止密码子插入 VF1 的 MNV-3 突变体，其中逆转被抑制，导致小鼠在 3 个月持续感染中持续降低复制，表明 VF1 在病毒适应性中的作用 感染了 VF1 缺失的 MNV-3 的 C57BL/6 小鼠在感染的急性期表现出显着降低的复制动力学，但在 VF1 表达表型恢复后，病毒载量迅速达到了感染野生型病毒的小鼠中所见的水平。感染具有三个终止密码子插入 VF1 的 MNV-3 突变体，其中逆转被抑制，导致小鼠在 3 个月持续感染中持续降低复制，表明 VF1 在病毒适应性中的作用体内。我们的结果表明，由持续性 MNV 菌株表达的 VF1 也具有拮抗对感染的先天反应的功能。我们发现 VF1 对于病毒持久性不是必需的，而是有助于小鼠的病毒适应性。这些数据符合诺如病毒利用多种机制来避免和/或控制宿主对感染的反应的假设，而 VF1 只是其中的一个组成部分。