Angioedema is characterized by swelling of the skin or mucous membranes. Overproduction of the vasodilator bradykinin (BK) is an important contributor to the disease pathology, which causes rapid increase in vascular permeability. BK formation on endothelial cells results from high molecular weight kininogen (HK) interacting with gC1qR, the receptor for the globular heads of C1q, the first component of the classical pathway of complement. Endothelial cells are sensitive to blood-flow-induced shear stress and it has been shown that shear stress can modulate gC1qR expression. This study aimed to determine the following: (1) how BK or angioedema patients’ (HAE) plasma affected endothelial cell permeability and gC1qR expression under shear stress, and (2) if monoclonal antibody (mAb) 74.5.2, which recognizes the HK binding site on gC1qR, had an inhibitory effect in HK binding to endothelial cells. Human dermal microvascular endothelial cells (HDMECs) grown on Transwell inserts were exposed to shear stress in the presence of HAE patients’ plasma. Endothelial cell permeability was measured using FITC-conjugated bovine serum albumin. gC1qR expression and HK binding to endothelial cell surface was measured using solid-phase ELISA. Cell morphology was quantified using immunofluorescence microscopy. The results demonstrated that BK at 1 µg/mL, but not HAE patients’ plasma and/or shear stress, caused significant increases in HDMEC permeability. The mAb 74.5.2 could effectively inhibit HK binding to recombinant gC1qR, and reduce HAE patients’ plasma-induced HDMEC permeability change. These results suggested that monoclonal antibody to gC1qR, i.e., 74.5.2, could be potentially used as an effective therapeutic reagent to prevent angioedema.

血管性水肿的特征是皮肤或粘膜肿胀。血管扩张剂缓激肽 (BK) 的过量产生是疾病病理的重要原因，导致血管通透性迅速增加。内皮细胞上 BK 的形成是由高分子量激肽原 (HK) 与 gC1qR 相互作用的结果，gC1qR 是 C1q 球状头部的受体，是补体经典途径的第一个成分。内皮细胞对血流诱导的剪切应力很敏感，并且已经表明剪切应力可以调节 gC1qR 的表达。本研究旨在确定以下内容：(1) BK 或血管性水肿患者 (HAE) 血浆在剪切应力下如何影响内皮细胞通透性和 gC1qR 表达，以及 (2) 单克隆抗体 (mAb) 74.5.2 是否识别 HK gC1qR 上的结合位点，对HK与内皮细胞的结合有抑制作用。在存在 HAE 患者血浆的情况下，在 Transwell 插入物上生长的人类真皮微血管内皮细胞 (HDMEC) 暴露于剪切应力。使用 FITC 缀合的牛血清白蛋白测量内皮细胞通透性。使用固相ELISA测量gC1qR表达和HK与内皮细胞表面的结合。使用免疫荧光显微镜对细胞形态进行量化。结果表明，1 µg/mL 的 BK，而不是 HAE 患者的血浆和/或剪切应力，导致 HDMEC 渗透性显着增加。mAb 74.5.2能有效抑制HK与重组gC1qR的结合，降低HAE患者血浆诱导的HDMEC通透性变化。这些结果表明，针对 gC1qR 的单克隆抗体，在存在 HAE 患者血浆的情况下，在 Transwell 插入物上生长的人类真皮微血管内皮细胞 (HDMEC) 暴露于剪切应力。使用 FITC 缀合的牛血清白蛋白测量内皮细胞通透性。使用固相ELISA测量gC1qR表达和HK与内皮细胞表面的结合。使用免疫荧光显微镜对细胞形态进行量化。结果表明，1 µg/mL 的 BK，而不是 HAE 患者的血浆和/或剪切应力，导致 HDMEC 渗透性显着增加。mAb 74.5.2能有效抑制HK与重组gC1qR的结合，降低HAE患者血浆诱导的HDMEC通透性变化。这些结果表明，针对 gC1qR 的单克隆抗体，在存在 HAE 患者血浆的情况下，在 Transwell 插入物上生长的人类真皮微血管内皮细胞 (HDMEC) 暴露于剪切应力。使用 FITC 缀合的牛血清白蛋白测量内皮细胞通透性。使用固相ELISA测量gC1qR表达和HK与内皮细胞表面的结合。使用免疫荧光显微镜对细胞形态进行量化。结果表明，1 µg/mL 的 BK，而不是 HAE 患者的血浆和/或剪切应力，导致 HDMEC 渗透性显着增加。mAb 74.5.2能有效抑制HK与重组gC1qR的结合，降低HAE患者血浆诱导的HDMEC通透性变化。这些结果表明，针对 gC1qR 的单克隆抗体，使用 FITC 缀合的牛血清白蛋白测量内皮细胞通透性。使用固相ELISA测量gC1qR表达和HK与内皮细胞表面的结合。使用免疫荧光显微镜对细胞形态进行量化。结果表明，1 µg/mL 的 BK，而不是 HAE 患者的血浆和/或剪切应力，导致 HDMEC 渗透性显着增加。mAb 74.5.2能有效抑制HK与重组gC1qR的结合，降低HAE患者血浆诱导的HDMEC通透性变化。这些结果表明，针对 gC1qR 的单克隆抗体，使用 FITC 缀合的牛血清白蛋白测量内皮细胞通透性。使用固相ELISA测量gC1qR表达和HK与内皮细胞表面的结合。使用免疫荧光显微镜对细胞形态进行量化。结果表明，1 µg/mL 的 BK，而不是 HAE 患者的血浆和/或剪切应力，导致 HDMEC 渗透性显着增加。mAb 74.5.2能有效抑制HK与重组gC1qR的结合，降低HAE患者血浆诱导的HDMEC通透性变化。这些结果表明，针对 gC1qR 的单克隆抗体，但 HAE 患者的血浆和/或剪切应力不会导致 HDMEC 渗透性显着增加。mAb 74.5.2能有效抑制HK与重组gC1qR的结合，降低HAE患者血浆诱导的HDMEC通透性变化。这些结果表明，针对 gC1qR 的单克隆抗体，但 HAE 患者的血浆和/或剪切应力不会导致 HDMEC 渗透性显着增加。mAb 74.5.2能有效抑制HK与重组gC1qR的结合，降低HAE患者血浆诱导的HDMEC通透性变化。这些结果表明，针对 gC1qR 的单克隆抗体，即., 74.5.2, 可能被用作预防血管性水肿的有效治疗剂。