The tumor immune microenvironment (TME) represents a key determinant for responses to cancer treatment. However, the immune phenotype of highly proliferative gastroenteropancreatic neuroendocrine neoplasms (GEP-NEN) is still largely elusive. In this retrospective study, we characterized the TME of high-grade (G3, Ki-67 > 20%) GEP-NEN. We analyzed formalin-fixed paraffin-embedded samples from 37 patients with GEP-NEN G3 by immunohistochemistry and multiplex immunofluorescence to address the abundance and spatial interaction of relevant immune subsets. We focused on the expression of immune checkpoint molecules PD-1 and PD-L1, the cytotoxic T-cell marker CD8, and the tumor-associated macrophage marker CD206. Findings were correlated with overall survival (OS) from the date of a cancer diagnosis. Patients with PD-L1-positive tumors (CPS ≥ 1) and intense PD-1+CD8+ immune cell infiltration showed the most favorable median OS. Multiplex immunofluorescence staining of ten representative tissue samples illustrated intratumoral heterogeneity of PD-L1 expression. Dense PD-1+CD8+ immune cell infiltrates were observed in PD-L1-positive tumor regions but not in PD-L1-negative regions. Proximity analysis revealed a spatial interaction between PD-1+CD8+ cells and PD-L1-positive cells. Our data suggest a pre-existing antitumor immune response in the TME in a subgroup of GEP-NEN G3. This supports a targeted clinical exploration of immunotherapeutic approaches.

中文翻译：

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抗肿瘤免疫反应与 GEP-NEN G3 的良好存活率相关。

肿瘤免疫微环境 (TME) 是对癌症治疗反应的关键决定因素。然而，高度增殖性胃肠胰腺神经内分泌肿瘤 (GEP-NEN) 的免疫表型在很大程度上仍然难以捉摸。在这项回顾性研究中，我们描述了高级别（G3，Ki-67 > 20%）GEP-NEN 的 TME。我们通过免疫组织化学和多重免疫荧光分析了来自 37 名 GEP-NEN G3 患者的福尔马林固定石蜡包埋样本，以解决相关免疫亚群的丰度和空间相互作用。我们专注于免疫检查点分子 PD-1 和 PD-L1、细胞毒性 T 细胞标志物 CD8 和肿瘤相关巨噬细胞标志物 CD206 的表达。从癌症诊断之日起，研究结果与总生存期 (OS) 相关。PD-L1 阳性肿瘤（CPS ≥ 1）和强烈 PD-1+CD8+ 免疫细胞浸润的患者显示出最有利的中位 OS。十个代表性组织样本的多重免疫荧光染色说明了 PD-L1 表达的肿瘤内异质性。在 PD-L1 阳性肿瘤区域观察到密集的 PD-1+CD8+ 免疫细胞浸润，但在 PD-L1 阴性区域未观察到。邻近分析揭示了 PD-1+CD8+ 细胞和 PD-L1 阳性细胞之间的空间相互作用。我们的数据表明，在 GEP-NEN G3 的一个亚组中，TME 中预先存在抗肿瘤免疫反应。这支持了免疫治疗方法的有针对性的临床探索。十个代表性组织样本的多重免疫荧光染色说明了 PD-L1 表达的肿瘤内异质性。在 PD-L1 阳性肿瘤区域观察到密集的 PD-1+CD8+ 免疫细胞浸润，但在 PD-L1 阴性区域未观察到。邻近分析揭示了 PD-1+CD8+ 细胞和 PD-L1 阳性细胞之间的空间相互作用。我们的数据表明，在 GEP-NEN G3 的一个亚组中，TME 中预先存在抗肿瘤免疫反应。这支持了免疫治疗方法的有针对性的临床探索。十个代表性组织样本的多重免疫荧光染色说明了 PD-L1 表达的肿瘤内异质性。在 PD-L1 阳性肿瘤区域观察到密集的 PD-1+CD8+ 免疫细胞浸润，但在 PD-L1 阴性区域未观察到。邻近分析揭示了 PD-1+CD8+ 细胞和 PD-L1 阳性细胞之间的空间相互作用。我们的数据表明，在 GEP-NEN G3 的一个亚组中，TME 中预先存在抗肿瘤免疫反应。这支持了免疫治疗方法的有针对性的临床探索。我们的数据表明，在 GEP-NEN G3 的一个亚组中，TME 中预先存在抗肿瘤免疫反应。这支持了免疫治疗方法的有针对性的临床探索。我们的数据表明，在 GEP-NEN G3 的一个亚组中，TME 中预先存在抗肿瘤免疫反应。这支持了免疫治疗方法的有针对性的临床探索。