The epithelial to mesenchymal transition (EMT) has been implicated in the development of adenomyosis, along with dysregulated immune responses. Inflammation potentially induces Notch signaling, which could promote this EMT. The objective of this study was to investigate the involvement of immune cells and Notch1-mediated EMT in the development of adenomyosis. Adenomyosis was induced in 18 CD-1 mice by neonatal oral administration of tamoxifen (TAM group), while 18 neonates received vehicle only (Control group). Their uteri were sampled at 30, 60 or 90 days of age. Immune cell markers (Cd45, Ly6c1, Cd86, Arginine1, Cd19, Cd4, Cd8), Notch1 and its target genes (Hey1, Hey2, Hes1, Hes5) and biomarkers of EMT (E-Cadherin, Vimentin, Tgfb, Snail1, Slug, Snail3) were analyzed by quantitative RT-PCR and immunohistochemistry. Activated-Notch1 protein was measured by western blot. Aberrant expression of immune cell markers was observed in the uteri of mice as they developed adenomyosis. The expression of inflammatory cell markers, notably M1 macrophages and natural killer cells, was increased from Day 30 in the TAM group compared to controls, followed by an increase in the Cd4 marker (T cells) at Day 60. Conversely, expression of the Cd19 marker (B cells) was significantly reduced at all of the stages studied. Notch1 signaling was also highly activated compared to controls at Day 30 and Day 60. Concomitantly, the levels of several markers for EMT were also higher. Therefore, the activation of Notch1 coincides with aberrant expression of immune and EMT markers in the early development of adenomyosis.

中文翻译：

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免疫细胞和 Notch1 信号似乎在小鼠子宫腺肌病的发展中驱动上皮细胞向间充质细胞的转变

上皮间质转化 (EMT) 与子宫腺肌病的发展有关，同时免疫反应失调。炎症可能会诱导 Notch 信号传导，这可能会促进这种 EMT。本研究的目的是调查免疫细胞和 Notch1 介导的 EMT 在子宫腺肌病发展中的作用。通过新生儿口服他莫昔芬（TAM 组）在 18 只 CD-1 小鼠中诱导子宫腺肌症，而 18 只新生儿仅接受载体（对照组）。他们的子宫在 30、60 或 90 天大时取样。免疫细胞标志物（Cd45、Ly6c1、Cd86、Arginine1、Cd19、Cd4、Cd8）、Notch1 及其靶基因（Hey1、Hey2、Hes1、Hes5）和 EMT 生物标志物（E-Cadherin、Vimentin、Tgfb、Snail1、Slug、 Snail3) 通过定量 RT-PCR 和免疫组织化学进行分析。通过蛋白质印迹测量活化的Notch1蛋白。当小鼠发生子宫腺肌病时，在其子宫中观察到免疫细胞标志物的异常表达。与对照组相比，TAM 组的炎症细胞标志物，特别是 M1 巨噬细胞和自然杀伤细胞的表达从第 30 天开始增加，随后在第 60 天 Cd4 标志物（T 细胞）增加。相反，Cd19 的表达标记物（B 细胞）在所研究的所有阶段均显着减少。与第 30 天和第 60 天的对照相比，Notch1 信号也被高度激活。同时，EMT 的几种标志物的水平也更高。因此，Notch1的激活与子宫腺肌病早期发展中免疫和EMT标志物的异常表达相吻合。当小鼠发生子宫腺肌病时，在其子宫中观察到免疫细胞标志物的异常表达。与对照组相比，TAM 组的炎症细胞标志物，特别是 M1 巨噬细胞和自然杀伤细胞的表达从第 30 天开始增加，随后在第 60 天 Cd4 标志物（T 细胞）增加。相反，Cd19 的表达标记物（B 细胞）在所研究的所有阶段均显着减少。与第 30 天和第 60 天的对照相比，Notch1 信号也被高度激活。同时，EMT 的几种标志物的水平也更高。因此，Notch1的激活与子宫腺肌病早期发展中免疫和EMT标志物的异常表达相吻合。当小鼠发生子宫腺肌病时，在其子宫中观察到免疫细胞标志物的异常表达。与对照组相比，TAM 组的炎症细胞标志物，特别是 M1 巨噬细胞和自然杀伤细胞的表达从第 30 天开始增加，随后在第 60 天 Cd4 标志物（T 细胞）增加。相反，Cd19 的表达标记物（B 细胞）在所研究的所有阶段均显着减少。与第 30 天和第 60 天的对照相比，Notch1 信号也被高度激活。同时，EMT 的几种标志物的水平也更高。因此，Notch1的激活与子宫腺肌病早期发展中免疫和EMT标志物的异常表达相吻合。与对照组相比，TAM 组的 M1 巨噬细胞和自然杀伤细胞从第 30 天开始增加，随后在第 60 天 Cd4 标志物（T 细胞）增加。相反，Cd19 标志物（B 细胞）的表达显着在研究的所有阶段都减少了。与第 30 天和第 60 天的对照相比，Notch1 信号也被高度激活。同时，EMT 的几种标志物的水平也更高。因此，Notch1的激活与子宫腺肌病早期发展中免疫和EMT标志物的异常表达相吻合。与对照组相比，TAM 组的 M1 巨噬细胞和自然杀伤细胞从第 30 天开始增加，随后在第 60 天 Cd4 标志物（T 细胞）增加。相反，Cd19 标志物（B 细胞）的表达显着在研究的所有阶段都减少了。与第 30 天和第 60 天的对照相比，Notch1 信号也被高度激活。同时，EMT 的几种标志物的水平也更高。因此，Notch1的激活与子宫腺肌病早期发展中免疫和EMT标志物的异常表达相吻合。与第 30 天和第 60 天的对照相比，Notch1 信号也被高度激活。同时，EMT 的几种标志物的水平也更高。因此，Notch1的激活与子宫腺肌病早期发展中免疫和EMT标志物的异常表达相吻合。与第 30 天和第 60 天的对照相比，Notch1 信号也被高度激活。同时，EMT 的几种标志物的水平也更高。因此，Notch1的激活与子宫腺肌病早期发展中免疫和EMT标志物的异常表达相吻合。