当前位置: X-MOL 学术Metab. Brain Dis. › 论文详情
Our official English website, www.x-mol.net, welcomes your feedback! (Note: you will need to create a separate account there.)
Silencing of H19 alleviates oxygen–glucose deprivation/reoxygenation-triggered injury through the regulation of the miR-1306-5p/BCL2L13 axis
Metabolic Brain Disease ( IF 3.2 ) Pub Date : 2021-08-26 , DOI: 10.1007/s11011-021-00822-4
Yuxing Huang 1 , Lisha Deng 1 , Lin Zeng 1 , Shanlin Bao 2 , Kun Ye 1 , Chengxun Li 1 , Xiaolin Hou 1 , Yuan Yao 1 , Dingjun Li 1 , Zhen Xiong 1
Affiliation  

Cerebral ischemia/reperfusion (I/R) injury remains a leading cause of death and disability. Long noncoding RNAs (lncRNAs) exert key functions in cerebral I/R injury. Here, we sought to elucidate the mechanism underlying the regulation of H19 in cerebral I/R cell injury. An in vitro model of cerebral I/R injury was created using oxygen–glucose deprivation/reoxygenation (OGD/R). The levels of H19, miR-1306-5p and B cell lymphoma-2 (Bcl-2)-like 13 (BCL2L13) were assessed by quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR) or western blot. Cell viability and apoptosis were determined by the Cell Counting-8 Kit (CCK-8) assay and flow cytometry, respectively. The levels of lactate dehydrogenase (LDH) and cytokines were evaluated by enzyme-linked immunosorbent assays (ELISA). Direct relationships among H19, miR-1306-5p and BCL2L13 were verified by dual-luciferase reporter, RNA immunoprecipitation (RIP) and RNA pulldown assays. Our data showed that H19 and BCL2L13 were highly expressed in the cerebral I/R injury rats and OGD/R-triggered SK-N-SH and IMR-32 cells. The knockdown of H19 or BLC2L13 alleviated OGD/R-triggered injury in SK-N-SH and IMR-32 cells. Moreover, H19 silencing protected against OGD/R-triggered cell injury by down-regulating BCL2L13. H19 acted as a sponge of miR-1306-5p and BCL2L13 was a direct target of miR-1306-5p. H19 mediated BCL2L13 expression by sequestering miR-1306-5p. Furthermore, miR-1306-5p was a molecular mediator of H19 function. These results suggested that H19 silencing alleviated OGD/R-triggered I/R injury at least partially depending on the regulation of the miR-1306-5p/BCL2L13 axis.



中文翻译:

H19 的沉默通过调节 miR-1306-5p/BCL2L13 轴减轻氧-葡萄糖剥夺/复氧触发的损伤

脑缺血/再灌注 (I/R) 损伤仍然是导致死亡和残疾的主要原因。长链非编码 RNA (lncRNA) 在脑 I/R 损伤中发挥关键作用。在这里,我们试图阐明 H19 在脑 I/R 细胞损伤中的调控机制。使用氧-葡萄糖剥夺/复氧 (OGD/R) 创建了脑 I/R 损伤的体外模型。通过定量实时聚合酶链反应 (qRT-PCR) 或蛋白质印迹评估 H19、miR-1306-5p 和 B 细胞淋巴瘤 2 (Bcl-2) 样 13 (BCL2L13) 的水平。细胞活力和细胞凋亡分别通过 Cell Counting-8 Kit (CCK-8) 测定法和流式细胞术测定。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)评估乳酸脱氢酶(LDH)和细胞因子的水平。H19 之间的直接关系,miR-1306-5p 和 BCL2L13 通过双荧光素酶报告基因、RNA 免疫沉淀 (RIP) 和 RNA pulldown 分析进行了验证。我们的数据显示,H19 和 BCL2L13 在脑 I/R 损伤大鼠和 OGD/R 触发的 SK-N-SH 和 IMR-32 细胞中高表达。H19 或 BLC2L13 的敲低减轻了 SK-N-SH 和 IMR-32 细胞中 OGD/R 触发的损伤。此外,H19 沉默通过下调 BCL2L13 来防止 OGD/R 触发的细胞损伤。H19 充当 miR-1306-5p 的海绵,BCL2L13 是 miR-1306-5p 的直接靶标。H19 通过隔离 miR-1306-5p 介导 BCL2L13 表达。此外,miR-1306-5p 是 H19 功能的分子介质。这些结果表明,H19 沉默减轻了 OGD/R 触发的 I/R 损伤至少部分取决于 miR-1306-5p/BCL2L13 轴的调节。RNA 免疫沉淀 (RIP) 和 RNA pulldown 分析。我们的数据显示,H19 和 BCL2L13 在脑 I/R 损伤大鼠和 OGD/R 触发的 SK-N-SH 和 IMR-32 细胞中高表达。H19 或 BLC2L13 的敲低减轻了 SK-N-SH 和 IMR-32 细胞中 OGD/R 触发的损伤。此外,H19 沉默通过下调 BCL2L13 来防止 OGD/R 触发的细胞损伤。H19 充当 miR-1306-5p 的海绵,BCL2L13 是 miR-1306-5p 的直接靶标。H19 通过隔离 miR-1306-5p 介导 BCL2L13 表达。此外,miR-1306-5p 是 H19 功能的分子介质。这些结果表明,H19 沉默减轻了 OGD/R 触发的 I/R 损伤至少部分取决于 miR-1306-5p/BCL2L13 轴的调节。RNA 免疫沉淀 (RIP) 和 RNA pulldown 分析。我们的数据显示,H19 和 BCL2L13 在脑 I/R 损伤大鼠和 OGD/R 触发的 SK-N-SH 和 IMR-32 细胞中高表达。H19 或 BLC2L13 的敲低减轻了 SK-N-SH 和 IMR-32 细胞中 OGD/R 触发的损伤。此外,H19 沉默通过下调 BCL2L13 来防止 OGD/R 触发的细胞损伤。H19 充当 miR-1306-5p 的海绵,BCL2L13 是 miR-1306-5p 的直接靶标。H19 通过隔离 miR-1306-5p 介导 BCL2L13 表达。此外,miR-1306-5p 是 H19 功能的分子介质。这些结果表明,H19 沉默减轻了 OGD/R 触发的 I/R 损伤至少部分取决于 miR-1306-5p/BCL2L13 轴的调节。我们的数据显示,H19 和 BCL2L13 在脑 I/R 损伤大鼠和 OGD/R 触发的 SK-N-SH 和 IMR-32 细胞中高表达。H19 或 BLC2L13 的敲低减轻了 SK-N-SH 和 IMR-32 细胞中 OGD/R 触发的损伤。此外,H19 沉默通过下调 BCL2L13 来防止 OGD/R 触发的细胞损伤。H19 充当 miR-1306-5p 的海绵,BCL2L13 是 miR-1306-5p 的直接靶标。H19 通过隔离 miR-1306-5p 介导 BCL2L13 表达。此外,miR-1306-5p 是 H19 功能的分子介质。这些结果表明,H19 沉默减轻了 OGD/R 触发的 I/R 损伤至少部分取决于 miR-1306-5p/BCL2L13 轴的调节。我们的数据显示,H19 和 BCL2L13 在脑 I/R 损伤大鼠和 OGD/R 触发的 SK-N-SH 和 IMR-32 细胞中高表达。H19 或 BLC2L13 的敲低减轻了 SK-N-SH 和 IMR-32 细胞中 OGD/R 触发的损伤。此外,H19 沉默通过下调 BCL2L13 来防止 OGD/R 触发的细胞损伤。H19 充当 miR-1306-5p 的海绵,BCL2L13 是 miR-1306-5p 的直接靶标。H19 通过隔离 miR-1306-5p 介导 BCL2L13 表达。此外,miR-1306-5p 是 H19 功能的分子介质。这些结果表明,H19 沉默减轻了 OGD/R 触发的 I/R 损伤至少部分取决于 miR-1306-5p/BCL2L13 轴的调节。H19 或 BLC2L13 的敲低减轻了 SK-N-SH 和 IMR-32 细胞中 OGD/R 触发的损伤。此外,H19 沉默通过下调 BCL2L13 来防止 OGD/R 触发的细胞损伤。H19 充当 miR-1306-5p 的海绵,BCL2L13 是 miR-1306-5p 的直接靶标。H19 通过隔离 miR-1306-5p 介导 BCL2L13 表达。此外,miR-1306-5p 是 H19 功能的分子介质。这些结果表明,H19 沉默减轻了 OGD/R 触发的 I/R 损伤至少部分取决于 miR-1306-5p/BCL2L13 轴的调节。H19 或 BLC2L13 的敲低减轻了 SK-N-SH 和 IMR-32 细胞中 OGD/R 触发的损伤。此外,H19 沉默通过下调 BCL2L13 来防止 OGD/R 触发的细胞损伤。H19 充当 miR-1306-5p 的海绵,BCL2L13 是 miR-1306-5p 的直接靶标。H19 通过隔离 miR-1306-5p 介导 BCL2L13 表达。此外,miR-1306-5p 是 H19 功能的分子介质。这些结果表明,H19 沉默减轻了 OGD/R 触发的 I/R 损伤至少部分取决于 miR-1306-5p/BCL2L13 轴的调节。miR-1306-5p 是 H19 功能的分子介质。这些结果表明,H19 沉默减轻了 OGD/R 触发的 I/R 损伤至少部分取决于 miR-1306-5p/BCL2L13 轴的调节。miR-1306-5p 是 H19 功能的分子介质。这些结果表明,H19 沉默减轻了 OGD/R 触发的 I/R 损伤至少部分取决于 miR-1306-5p/BCL2L13 轴的调节。

更新日期:2021-08-26
down
wechat
bug