Long noncoding RNAs (lncRNAs) are known to be the important regulators in cancer progression. However, the role of lncRNA FAM66C (FAM66C) is yet to be investigated in intrahepatic cholangiocarcinoma (ICC). This study aimed to investigate the effects and related mechanisms of FAM66C in ICC. Human ICC tissues and cell lines were collected. The expression levels of FAM66C, hsa-miR-23b-3p (miR-23b-3p), and KCND2 were detected by qRT-RCR. The transfection experiments were employed to measure the effect of FAM66C on cell viabilities, migration, and invasion in ICC cells by CCK-8, transwell assays. Glycolysis was investigated by glucose consumption, lactate production and ATP levels. The dual-luciferase reporter and RNA pull down assays were conducted as a means of confirming the interactions between FAM66C, miR-23b-3p, and KCND2. Furthermore, the levels of the EMT-associated proteins (KCND2, GLUT1, PKM2, and LDHA) in ICC cells were detected by western blot. FAM66C was increased in ICC tissues and cells, increased cell viability, glycolysis, migration and invasion, and decreased apoptosis were shown in FAM66C overexpressing cells. Mechanistic analyses revealed that FAM66C regulated the downstream target gene KCND2 by sponging miR-23b-3p. FAM66C effect on ICC was further validated in murine xenograft assays. FAM66C knockdown cells gave rise to tumors that were smaller in size, consistent with the role of FAM66C as a promoter of in vivo tumor growth. These data revealed that FAM66C was able to drive ICC tumor progression and glycolytic activity via the miR-23b-3p/KCND2 axis, indicating FAM66C may be a viable target for treating ICC.

中文翻译：

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长链非编码 RNA FAM66C 通过调节 hsa-miR-23b-3p/KCND2 轴促进肝内胆管癌的肿瘤进展和糖酵解

已知长链非编码 RNA (lncRNA) 是癌症进展的重要调节因子。然而，lncRNA FAM66C (FAM66C) 在肝内胆管癌 (ICC) 中的作用仍有待研究。本研究旨在探讨FAM66C在ICC中的作用及相关机制。收集人ICC组织和细胞系。qRT-RCR检测FAM66C、hsa-miR-23b-3p（miR-23b-3p）和KCND2的表达水平。转染实验用于通过 CCK-8、transwell 测定法测量 FAM66C 对 ICC 细胞中细胞活力、迁移和侵袭的影响。通过葡萄糖消耗、乳酸产生和 ATP 水平来研究糖酵解。进行双荧光素酶报告基因和 RNA 下拉分析以确认 FAM66C、miR-23b-3p 和 KCND2 之间的相互作用。此外，通过蛋白质印迹检测ICC细胞中EMT相关蛋白（KCND2、GLUT1、PKM2和LDHA）的水平。FAM66C 在 ICC 组织和细胞中增加，在 FAM66C 过表达细胞中显示细胞活力、糖酵解、迁移和侵袭增加，细胞凋亡减少。机制分析表明，FAM66C 通过海绵化 miR-23b-3p 调节下游靶基因 KCND2。FAM66C 对 ICC 的影响在鼠异种移植试验中得到进一步验证。FAM66C 敲低细胞产生的肿瘤体积更小，这与 FAM66C 作为体内肿瘤生长促进剂的作用一致。这些数据表明，FAM66C 能够通过 miR-23b-3p/KCND2 轴驱动 ICC 肿瘤进展和糖酵解活性，表明 FAM66C 可能是治疗 ICC 的可行靶标。免疫印迹法检测 ICC 细胞中的 LDHA 和 LDHA)。FAM66C 在 ICC 组织和细胞中增加，在 FAM66C 过表达细胞中显示细胞活力、糖酵解、迁移和侵袭增加，细胞凋亡减少。机制分析表明，FAM66C 通过海绵化 miR-23b-3p 调节下游靶基因 KCND2。FAM66C 对 ICC 的影响在鼠异种移植试验中得到进一步验证。FAM66C 敲低细胞产生的肿瘤体积更小，这与 FAM66C 作为体内肿瘤生长促进剂的作用一致。这些数据表明，FAM66C 能够通过 miR-23b-3p/KCND2 轴驱动 ICC 肿瘤进展和糖酵解活性，表明 FAM66C 可能是治疗 ICC 的可行靶标。免疫印迹法检测 ICC 细胞中的 LDHA 和 LDHA)。FAM66C 在 ICC 组织和细胞中增加，在 FAM66C 过表达细胞中显示细胞活力、糖酵解、迁移和侵袭增加，细胞凋亡减少。机制分析表明，FAM66C 通过海绵化 miR-23b-3p 调节下游靶基因 KCND2。FAM66C 对 ICC 的影响在鼠异种移植试验中得到进一步验证。FAM66C 敲低细胞产生的肿瘤体积更小，这与 FAM66C 作为体内肿瘤生长促进剂的作用一致。这些数据表明，FAM66C 能够通过 miR-23b-3p/KCND2 轴驱动 ICC 肿瘤进展和糖酵解活性，表明 FAM66C 可能是治疗 ICC 的可行靶标。在过表达 FAM66C 的细胞中，细胞活力、糖酵解、迁移和侵袭增加，细胞凋亡减少。机制分析表明，FAM66C 通过海绵化 miR-23b-3p 调节下游靶基因 KCND2。FAM66C 对 ICC 的影响在鼠异种移植试验中得到进一步验证。FAM66C 敲低细胞产生的肿瘤体积更小，这与 FAM66C 作为体内肿瘤生长促进剂的作用一致。这些数据表明，FAM66C 能够通过 miR-23b-3p/KCND2 轴驱动 ICC 肿瘤进展和糖酵解活性，表明 FAM66C 可能是治疗 ICC 的可行靶标。在过表达 FAM66C 的细胞中，细胞活力、糖酵解、迁移和侵袭增加，细胞凋亡减少。机制分析表明，FAM66C 通过海绵化 miR-23b-3p 调节下游靶基因 KCND2。FAM66C 对 ICC 的影响在鼠异种移植试验中得到进一步验证。FAM66C 敲低细胞产生的肿瘤体积更小，这与 FAM66C 作为体内肿瘤生长促进剂的作用一致。这些数据表明，FAM66C 能够通过 miR-23b-3p/KCND2 轴驱动 ICC 肿瘤进展和糖酵解活性，表明 FAM66C 可能是治疗 ICC 的可行靶标。FAM66C 对 ICC 的影响在鼠异种移植试验中得到进一步验证。FAM66C 敲低细胞产生的肿瘤体积更小，这与 FAM66C 作为体内肿瘤生长促进剂的作用一致。这些数据表明，FAM66C 能够通过 miR-23b-3p/KCND2 轴驱动 ICC 肿瘤进展和糖酵解活性，表明 FAM66C 可能是治疗 ICC 的可行靶标。FAM66C 对 ICC 的影响在鼠异种移植试验中得到进一步验证。FAM66C 敲低细胞产生的肿瘤体积更小，这与 FAM66C 作为体内肿瘤生长促进剂的作用一致。这些数据表明，FAM66C 能够通过 miR-23b-3p/KCND2 轴驱动 ICC 肿瘤进展和糖酵解活性，表明 FAM66C 可能是治疗 ICC 的可行靶标。