Diabetic foot ulcer (DFU) is a kind of common and disabling complications of Diabetes Mellitus (DM). Emerging studies have demonstrated that tendon fibroblasts play a crucial role in remodeling phase of wound healing. However, little is known about the mechanism underlying high glucose (HG)-induced decrease of tendon fibroblasts viability. In the present study the rat models of DFU were established, and collagen deposition, autophagy activation and cell apoptosis in tendon tissues were assessed using hematoxylin-eosin (HE) staining, immunohistochemistry (IHC), and TdT-Mediated dUTP Nick-End Labeling (TUNEL) assay, respectively. Tendon fibroblasts were isolated from Achilles tendon of the both limbs, and the effect of HG on autophagy activation in tendon fibroblasts was assessed using western blot analysis, Cell Counting Kit-8 (CCK-8) assay, and flow cytometry. We found that cell apoptosis was increased significantly and autophagy activation was decreased in foot tendons tissues of DFU rats compared with normal tissues. The role of HG in regulating tendon fibroblasts viability was then investigated in vitro, and data showed that HG repressed cell viability and increased cell apoptosis. Furthermore, HG treatment reduced LC3-II expression and increased p62 expression, indicating that HG repressed the activation of tendon fibroblasts. The autophagy activator rapamycin reversed the effect. More important, rapamycin alleviated the suppressive role of HG in tendon fibroblasts viability. Taken together, our data demonstrate that HG represses tendon fibroblasts proliferation by inhibiting autophagy activation in tendon injury.

中文翻译：

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高葡萄糖通过抑制肌腱损伤中的自噬激活来抑制肌腱成纤维细胞的增殖。

糖尿病足溃疡（DFU）是糖尿病（DM）常见的致残并发症。新兴研究表明，肌腱成纤维细胞在伤口愈合的重塑阶段起着至关重要的作用。然而，关于高葡萄糖 (HG) 诱导肌腱成纤维细胞活力降低的潜在机制知之甚少。在本研究中，建立了 DFU 大鼠模型，并使用苏木精-伊红 (HE) 染色、免疫组织化学 (IHC) 和 TdT 介导的 dUTP 缺口末端标记评估了肌腱组织中的胶原沉积、自噬激活和细胞凋亡 ( TUNEL) 测定，分别。从双肢的跟腱中分离出肌腱成纤维细胞，并使用蛋白质印迹分析、Cell Counting Kit-8 (CCK-8) 测定评估 HG 对肌腱成纤维细胞自噬激活的影响，和流式细胞术。我们发现与正常组织相比，DFU大鼠足部肌腱组织细胞凋亡显着增加，自噬激活减少。然后在体外研究了 HG 在调节肌腱成纤维细胞活力中的作用，数据显示 HG 抑制细胞活力并增加细胞凋亡。此外，HG 处理降低了 LC3-II 表达并增加了 p62 表达，表明 HG 抑制了肌腱成纤维细胞的活化。自噬激活剂雷帕霉素逆转了这种作用。更重要的是，雷帕霉素减轻了 HG 对肌腱成纤维细胞活力的抑制作用。总之，我们的数据表明 HG 通过抑制肌腱损伤中的自噬激活来抑制肌腱成纤维细胞增殖。我们发现与正常组织相比，DFU大鼠足部肌腱组织细胞凋亡显着增加，自噬激活减少。然后在体外研究了 HG 在调节肌腱成纤维细胞活力中的作用，数据显示 HG 抑制细胞活力并增加细胞凋亡。此外，HG 处理降低了 LC3-II 表达并增加了 p62 表达，表明 HG 抑制了肌腱成纤维细胞的活化。自噬激活剂雷帕霉素逆转了这种作用。更重要的是，雷帕霉素减轻了 HG 对肌腱成纤维细胞活力的抑制作用。总之，我们的数据表明 HG 通过抑制肌腱损伤中的自噬激活来抑制肌腱成纤维细胞增殖。我们发现与正常组织相比，DFU大鼠足部肌腱组织细胞凋亡显着增加，自噬激活减少。然后在体外研究了 HG 在调节肌腱成纤维细胞活力中的作用，数据显示 HG 抑制细胞活力并增加细胞凋亡。此外，HG 处理降低了 LC3-II 表达并增加了 p62 表达，表明 HG 抑制了肌腱成纤维细胞的活化。自噬激活剂雷帕霉素逆转了这种作用。更重要的是，雷帕霉素减轻了 HG 对肌腱成纤维细胞活力的抑制作用。总之，我们的数据表明 HG 通过抑制肌腱损伤中的自噬激活来抑制肌腱成纤维细胞增殖。