Previous studies have shown that benzoylaconine (BAC), a representative monoester alkaloid, has a potential anti-inflammatory effect. This study investigated the underlying molecular mechanisms using the mode of LPS-activated RAW264.7 macrophage cells. Our findings showed that BAC significantly suppressed the release of pro-inflammatory cytokines and mediators, including IL-6, TNF-α, IL-1β, ROS, NO, and PGE2. BAC treatment also effectively downregulated the elevated protein levels of iNOS and COX-2 induced by LPS in a dose-dependent manner. In this study, we found that BAC inhibited LPS-induced NF-κB activation by reducing the phosphorylation and degradation of IκBα by western blotting and blocking the nuclear translocation of p65 using an immunofluorescence assay. The elevated protein levels of JNK, p38, and ERK phosphorylation after LPS stimulation were restored effectively by BAC treatment. The protein expression of Toll-like receptor 4 (TLR4) and LPS-induced phosphorylation of TAK1, which is a crucial upstream regulatory factor of TLR-induced MAPK and NF-κB signaling, were inhibited by BAC in activated RAW264.7 macrophages. Moreover, BAC decreased the levels of TAK1 phosphorylation and pro-inflammatory cytokines and mediators associated with MAPK and NF-κB activation, similar to TLR4 inhibitor TAK-242. These findings demonstrated that BAC exhibited an anti-inflammatory effect by the inhibition of TLR-induced MAPK and NF-κB pathways, indicating that it could potentially be used for treating inflammatory diseases.

中文翻译：

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Benzoylaconine 通过抑制 RAW264.7 细胞中 Toll 样受体介导的 NF-κB 和 MAPK 信号传导来调节 LPS 诱导的反应。

以往的研究表明，苯甲酰茄碱（BAC）是一种具有代表性的单酯生物碱，具有潜在的抗炎作用。本研究使用 LPS 激活的 RAW264.7 巨噬细胞模式研究了潜在的分子机制。我们的研究结果表明，BAC 显着抑制促炎细胞因子和介质的释放，包括 IL-6、TNF-α、IL-1β、ROS、NO 和 PGE2。BAC 治疗还以剂量依赖性方式有效下调 LPS 诱导的 iNOS 和 COX-2 升高的蛋白质水平。在这项研究中，我们发现 BAC 通过蛋白质印迹减少 IκBα 的磷酸化和降解并使用免疫荧光测定阻断 p65 的核转位来抑制 LPS 诱导的 NF-κB 活化。JNK、p38 蛋白水平升高，BAC处理有效地恢复了LPS刺激后的ERK磷酸化。BAC 在活化的 RAW264.7 巨噬细胞中抑制 Toll 样受体 4 (TLR4) 的蛋白质表达和 LPS 诱导的 TAK1 磷酸化，TAK1 是 TLR 诱导的 MAPK 和 NF-κB 信号传导的关键上游调节因子。此外，与 TLR4 抑制剂 TAK-242 相似，BAC 降低了与 MAPK 和 NF-κB 激活相关的 TAK1 磷酸化和促炎细胞因子和介质的水平。这些发现表明，BAC 通过抑制 TLR 诱导的 MAPK 和 NF-κB 通路表现出抗炎作用，表明它可能用于治疗炎症性疾病。BAC 在活化的 RAW264.7 巨噬细胞中抑制 Toll 样受体 4 (TLR4) 的蛋白质表达和 LPS 诱导的 TAK1 磷酸化，TAK1 是 TLR 诱导的 MAPK 和 NF-κB 信号传导的关键上游调节因子。此外，与 TLR4 抑制剂 TAK-242 相似，BAC 降低了与 MAPK 和 NF-κB 激活相关的 TAK1 磷酸化和促炎细胞因子和介质的水平。这些发现表明，BAC 通过抑制 TLR 诱导的 MAPK 和 NF-κB 通路表现出抗炎作用，表明它可能用于治疗炎症性疾病。BAC 在活化的 RAW264.7 巨噬细胞中抑制 Toll 样受体 4 (TLR4) 的蛋白质表达和 LPS 诱导的 TAK1 磷酸化，TAK1 是 TLR 诱导的 MAPK 和 NF-κB 信号传导的关键上游调节因子。此外，与 TLR4 抑制剂 TAK-242 相似，BAC 降低了与 MAPK 和 NF-κB 激活相关的 TAK1 磷酸化和促炎细胞因子和介质的水平。这些发现表明，BAC 通过抑制 TLR 诱导的 MAPK 和 NF-κB 通路表现出抗炎作用，表明它可能用于治疗炎症性疾病。BAC 降低了与 MAPK 和 NF-κB 激活相关的 TAK1 磷酸化和促炎细胞因子和介质的水平，类似于 TLR4 抑制剂 TAK-242。这些发现表明，BAC 通过抑制 TLR 诱导的 MAPK 和 NF-κB 通路表现出抗炎作用，表明它可能用于治疗炎症性疾病。BAC 降低了与 MAPK 和 NF-κB 激活相关的 TAK1 磷酸化和促炎细胞因子和介质的水平，类似于 TLR4 抑制剂 TAK-242。这些发现表明，BAC 通过抑制 TLR 诱导的 MAPK 和 NF-κB 通路表现出抗炎作用，表明它可能用于治疗炎症性疾病。