In the past decade, mRNA markers have been well demonstrated as promising molecular markers in forensic body fluid identification (BFI), and successfully used in wide applications. Several studies have assessed the performance of semen-specific mRNA markers in distinguishing semen from other common body fluids at the crime scene. Infertility has been reported as a global health problem that is affecting approximately 15% of couples worldwide. Therefore, it is important for forensic researchers to consider the impact of infertility on semen identification. This study aimed to explore the effect of semen from infertile men (hereinafter “infertile semen”) on BFI and to identify semen-specific mRNAs that can efficiently and accurately distinguish normal and infertile semen samples from other body fluids. Results showed that the selected five mRNAs (KLK3, TGM4, SEMG1, PRM1, and PRM2) performed a significantly high semen specificity in normal semen. Moreover, KLK3 was slightly influenced by infertile semen samples with over 98% positive results in all semen samples. The accuracy to predict normal semen reached up to 96.6% using the discrimination function Y1 with KLK3 and PRM1. However, when the infertile semen samples were included in discrimination function (function Y2 with KLK3), the accuracy rate of semen identification (including the normal and infertile semen) was down to 89.5%. Besides, the sensitivity of multiplex assay could reach down to 50pg. Our results suggest that it is important to consider the presence of infertile semen when using mRNAs to identify semen samples, which would have a far-reaching impact in forensic identification.

中文翻译：

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不孕精液对基于mRNA的体液鉴定的影响

在过去的十年中，mRNA 标记已被证明是在法医体液鉴定 (BFI) 中很有前景的分子标记，并成功应用于广泛的应用。几项研究评估了精液特异性 mRNA 标记在区分精液与犯罪现场其他常见体液方面的表现。据报道，不孕症是一个全球性的健康问题，影响着全世界约 15% 的夫妇。因此，法医研究人员必须考虑不孕症对精液鉴定的影响。本研究旨在探讨来自不育男性的精液（以下简称“不育精液”）对 BFI 的影响，并鉴定能够有效、准确地区分正常和不育精液样本与其他体液的精液特异性 mRNA。结果表明，选择的五种 mRNA（KLK3、TGM4、SEMG1、PRM1 和 PRM2）在正常精液中表现出显着高的精液特异性。此外，KLK3 受到不育精液样本的轻微影响，在所有精液样本中阳性结果超过 98%。使用KLK3和PRM1的判别函数Y1预测正常精液的准确率高达96.6%。然而，当将不育精液样本纳入鉴别功能（函数Y2和KLK3）时，精液识别（包括正常精液和不育精液）的准确率下降到89.5%。此外，多重检测的灵敏度可低至50pg。我们的研究结果表明，在使用 mRNA 鉴定精液样本时，重要的是要考虑不育精液的存在，这将对法医鉴定产生深远的影响。TGM4、SEMG1、PRM1 和 PRM2) 在正常精液中表现出显着高的精液特异性。此外，KLK3 受到不育精液样本的轻微影响，在所有精液样本中阳性结果超过 98%。使用KLK3和PRM1的判别函数Y1预测正常精液的准确率高达96.6%。然而，当将不育精液样本纳入鉴别功能（函数Y2和KLK3）时，精液识别（包括正常精液和不育精液）的准确率下降到89.5%。此外，多重检测的灵敏度可低至50pg。我们的研究结果表明，在使用 mRNA 鉴定精液样本时，重要的是要考虑不育精液的存在，这将对法医鉴定产生深远的影响。TGM4、SEMG1、PRM1 和 PRM2) 在正常精液中表现出显着高的精液特异性。此外，KLK3 受到不育精液样本的轻微影响，在所有精液样本中阳性结果超过 98%。使用KLK3和PRM1的判别函数Y1预测正常精液的准确率高达96.6%。然而，当将不育精液样本纳入鉴别功能（函数Y2和KLK3）时，精液识别（包括正常精液和不育精液）的准确率下降到89.5%。此外，多重检测的灵敏度可低至50pg。我们的研究结果表明，在使用 mRNA 鉴定精液样本时，重要的是要考虑不育精液的存在，这将对法医鉴定产生深远的影响。和 PRM2) 在正常精液中表现出显着高的精液特异性。此外，KLK3 受到不育精液样本的轻微影响，在所有精液样本中阳性结果超过 98%。使用KLK3和PRM1的判别函数Y1预测正常精液的准确率高达96.6%。然而，当将不育精液样本纳入鉴别功能（函数Y2和KLK3）时，精液识别（包括正常精液和不育精液）的准确率下降到89.5%。此外，多重检测的灵敏度可低至50pg。我们的研究结果表明，在使用 mRNA 鉴定精液样本时，重要的是要考虑不育精液的存在，这将对法医鉴定产生深远的影响。和 PRM2) 在正常精液中表现出显着高的精液特异性。此外，KLK3 受到不育精液样本的轻微影响，在所有精液样本中阳性结果超过 98%。使用KLK3和PRM1的判别函数Y1预测正常精液的准确率高达96.6%。然而，当将不育精液样本纳入鉴别功能（函数Y2和KLK3）时，精液识别（包括正常精液和不育精液）的准确率下降到89.5%。此外，多重检测的灵敏度可低至50pg。我们的研究结果表明，在使用 mRNA 鉴定精液样本时，重要的是要考虑不育精液的存在，这将对法医鉴定产生深远的影响。KLK3 受到不育精液样本的轻微影响，在所有精液样本中阳性结果超过 98%。使用KLK3和PRM1的判别函数Y1预测正常精液的准确率高达96.6%。然而，当将不育精液样本纳入鉴别功能（函数Y2和KLK3）时，精液识别（包括正常精液和不育精液）的准确率下降到89.5%。此外，多重检测的灵敏度可低至50pg。我们的研究结果表明，在使用 mRNA 鉴定精液样本时，重要的是要考虑不育精液的存在，这将对法医鉴定产生深远的影响。KLK3 受到不育精液样本的轻微影响，在所有精液样本中阳性结果超过 98%。使用KLK3和PRM1的判别函数Y1预测正常精液的准确率高达96.6%。然而，当将不育精液样本纳入鉴别功能（函数Y2和KLK3）时，精液识别（包括正常精液和不育精液）的准确率下降到89.5%。此外，多重检测的灵敏度可低至50pg。我们的研究结果表明，在使用 mRNA 鉴定精液样本时，重要的是要考虑不育精液的存在，这将对法医鉴定产生深远的影响。6% 使用带有 KLK3 和 PRM1 的判别函数 Y1。然而，当将不育精液样本纳入鉴别功能（函数Y2和KLK3）时，精液识别（包括正常精液和不育精液）的准确率下降到89.5%。此外，多重检测的灵敏度可低至50pg。我们的研究结果表明，在使用 mRNA 鉴定精液样本时，重要的是要考虑不育精液的存在，这将对法医鉴定产生深远的影响。6% 使用带有 KLK3 和 PRM1 的判别函数 Y1。然而，当将不育精液样本纳入鉴别功能（函数Y2和KLK3）时，精液识别（包括正常精液和不育精液）的准确率下降到89.5%。此外，多重检测的灵敏度可低至50pg。我们的研究结果表明，在使用 mRNA 鉴定精液样本时，重要的是要考虑不育精液的存在，这将对法医鉴定产生深远的影响。