A simple, accurate, rapid and sensitive reversed-phase high-performance liquid chromatography (RP-HPLC) method was established for determination of a novel non-vitamin K antagonist oral anticoagulant drug, betrixaban, and its co-administered calcium-channel blocker drug, lercanidipine, in pharmaceutical formulations and biological fluids. The proposed HPLC method was the first chromatographic method applied to estimate this mixture in a short chromatographic run (<6 min), high resolution between betrixaban/lercanidipine (Rs = 7.12) and acceptable values of limit of detection (LOD), limit of quantification (LOQ) and percentage of relative standard deviation (%RSD). The chromatographic separation was performed on a cyano column using a mobile phase composed of acetonitrile:methanol:water (35:35:30, v/v/v) containing 0.2% orthophosphoric acid adjusted to pH 3.2 by triethylamine, programmed with a flow rate of 1 mL/min with UV detection at 240 nm. The proposed method showed linearity over the concentration ranges of (0.20–20.0 μg/mL) and (0.25–25.0 μg/mL) for betrixaban and lercanidipine, respectively. All validation parameters met the acceptance criteria according to ICH guidelines in terms of linearity, LOD, LOQ, accuracy, precision, robustness, specificity and system suitability. The method was applied to assay the studied analytes in their pharmaceutical formulations with high % recovery (98–102%) and low %RSD (<1.5). Furthermore, the proposed method was successfully applied for the determination of betrixaban in spiked human plasma.

中文翻译：

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用于测定药物和生物基质中贝曲西班和乐卡地平的简便 RP-HPLC 方法的优化和验证

建立了一种简便、准确、快速、灵敏的反相高效液相色谱（RP-HPLC）方法测定新型非维生素K拮抗剂口服抗凝药物贝曲西班及其合用钙通道阻滞剂药物，乐卡地平，在药物制剂和生物液体中。所提出的 HPLC 方法是第一个用于在短色谱运行（<6 分钟）中估计该混合物的色谱方法，贝曲西班/乐卡地平之间的高分辨率（Rs = 7.12）和可接受的检测限（LOD）值，限定量 (LOQ) 和相对标准偏差百分比 (%RSD)。色谱分离在氰基柱上进行，流动相由乙腈:甲醇:水 (35:35:30, v/v/v) 组成，含有 0。用三乙胺将 2% 正磷酸调节至 pH 3.2，以 1 mL/min 的流速编程，在 240 nm 处进行紫外检测。所提出的方法在贝曲西班和乐卡地平的浓度范围（0.20-20.0 μg/mL）和（0.25-25.0 μg/mL）上分别显示出线性。根据 ICH 指南，所有验证参数在线性、LOD、LOQ、准确度、精密度、稳健性、特异性和系统适用性方面均符合验收标准。该方法用于测定药物制剂中所研究的分析物，具有高回收率 (98–102%) 和低 %RSD (<1.5)。此外，该方法成功地应用于加标人血浆中贝曲西班的测定。所提出的方法在贝曲西班和乐卡地平的浓度范围（0.20-20.0 μg/mL）和（0.25-25.0 μg/mL）上分别显示出线性。根据 ICH 指南，所有验证参数在线性、LOD、LOQ、准确度、精密度、稳健性、特异性和系统适用性方面均符合接受标准。该方法用于测定药物制剂中所研究的分析物，具有高回收率 (98–102%) 和低 %RSD (<1.5)。此外，该方法成功地应用于加标人血浆中贝曲西班的测定。所提出的方法在贝曲西班和乐卡地平的浓度范围（0.20-20.0 μg/mL）和（0.25-25.0 μg/mL）上分别显示出线性。根据 ICH 指南，所有验证参数在线性、LOD、LOQ、准确度、精密度、稳健性、特异性和系统适用性方面均符合接受标准。该方法用于测定药物制剂中所研究的分析物，具有高回收率 (98–102%) 和低 %RSD (<1.5)。此外，该方法成功地应用于加标人血浆中贝曲西班的测定。LOQ、准确度、精密度、稳健性、特异性和系统适用性。该方法用于测定药物制剂中所研究的分析物，具有高回收率 (98–102%) 和低 %RSD (<1.5)。此外，该方法成功地应用于加标人血浆中贝曲西班的测定。LOQ、准确度、精密度、稳健性、特异性和系统适用性。该方法用于测定药物制剂中所研究的分析物，具有高回收率 (98–102%) 和低 %RSD (<1.5)。此外，该方法成功地应用于加标人血浆中贝曲西班的测定。