Transactivation response element RNA-binding protein (TRBP or TARBP2) originally identified as a pro-viral cellular protein in human immunodeficiency virus (HIV) replication is also a regulator of microRNA biogenesis and cellular stress response. TRBP inhibits the catalytic activity of interferon-induced double-stranded RNA (dsRNA)-activated protein kinase (PKR) during viral infections and cell stress thereby regulating stress-induced signaling pathways. During cellular stress, PKR is catalytically activated transiently by its protein activator PACT and TRBP inhibits PKR to bring about a timely cellular recovery. We have previously established that TRBP phosphorylated after oxidative stress binds to and inhibits PKR more efficiently promoting cell survival. In this study, we investigated if phosphorylation of TRBP enhances its interaction with PACT to bring about additional PKR inhibition. Our data establishes that phosphorylation of TRBP has no effect on PACT-TRBP interaction and TRBP's inhibitory actions on PKR are mediated exclusively by its enhanced interaction with PKR. Cells lacking TRBP are more sensitive to apoptosis in response to oxidative stress and show persistent PKR activation. These results establish that PKR inhibition by stress-induced TRBP phosphorylation occurs by its direct binding to PKR and is important for preventing apoptosis due to sustained PKR activation.

反式激活反应元件 RNA 结合蛋白（TRBP 或 TARBP2）最初被确定为人类免疫缺陷病毒 (HIV) 复制中的前病毒细胞蛋白，也是 microRNA 生物发生和细胞应激反应的调节剂。TRBP 在病毒感染和细胞应激期间抑制干扰素诱导的双链 RNA (dsRNA) 活化蛋白激酶 (PKR) 的催化活性，从而调节应激诱导的信号通路。在细胞应激期间，PKR 被其蛋白质激活剂 PACT 瞬时催化激活，TRBP 抑制 PKR 以实现及时的细胞恢复。我们之前已经确定，氧化应激后磷酸化的 TRBP 可以更有效地结合并抑制 PKR，从而促进细胞存活。在这项研究中，我们研究了 TRBP 的磷酸化是否会增强其与 PACT 的相互作用以带来额外的 PKR 抑制。我们的数据表明，TRBP 的磷酸化对 PACT-TRBP 相互作用没有影响，并且 TRBP 对 PKR 的抑制作用仅由其与 PKR 增强的相互作用介导。缺乏 TRBP 的细胞对响应氧化应激的细胞凋亡更敏感，并显示出持续的 PKR 激活。这些结果表明，应激诱导的 TRBP 磷酸化对 PKR 的抑制是通过其与 PKR 的直接结合而发生的，并且对于防止由于持续的 PKR 激活而导致的细胞凋亡很重要。s 对 PKR 的抑制作用仅由其与 PKR 增强的相互作用介导。缺乏 TRBP 的细胞对响应氧化应激的细胞凋亡更敏感，并显示出持续的 PKR 激活。这些结果表明，应激诱导的 TRBP 磷酸化对 PKR 的抑制是通过其与 PKR 的直接结合而发生的，并且对于防止由于持续的 PKR 激活而导致的细胞凋亡很重要。s 对 PKR 的抑制作用仅由其与 PKR 增强的相互作用介导。缺乏 TRBP 的细胞对响应氧化应激的细胞凋亡更敏感，并显示出持续的 PKR 激活。这些结果表明，应激诱导的 TRBP 磷酸化对 PKR 的抑制是通过其与 PKR 的直接结合而发生的，并且对于防止由于持续的 PKR 激活而导致的细胞凋亡很重要。