Circular RNA protein kinase, DNA-activated, catalytic subunit (circ_PRKDC) has been found to impede wound healing in diabetic foot ulcers via regulating keratinocyte proliferation and migration. However, the mechanisms underlying circ_PRKDC in skin wound healing remain unclear. The expression of circ_PRKDC, microRNA (miR)-31 and fibrillin 1 (FBN1) was detected using quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction and Western blot assays. The migration ability and the changes of matrix metallopeptidase 9 (MMP-9) and MMP2 levels were determined using wound healing, transwell and Western blot assays. The interaction between miR-31 and circ_PRKDC or FBN1 was verified by dual-luciferase reporter assay. The expression of circ_PRKDC was gradually down-regulated in wound edge at 1 and 7 days after injury relative to the unwounded skin. In human epidermal keratinocytes (HEKa), knockdown of circ_PRKDC promoted cell migration partly through up-regulating MMP-2 and MMP9, while circ_PRKDC overexpression showed opposite effects. In a mechanical study, we confirmed that miR-31 was a target of circ_PRKDC, and inhibition of miR-31 reversed the promotive effect of circ_PRKDC knockdown on HEKa migration. Besides that, miR-31 was verified to target FBN1, and ectopic overexpression of miR-31 accelerated HEKa migration via FBN1. Importantly, we also demonstrated that FBN1 overexpression attenuated the effects of circ_PRKDC knockdown on HEKa migration. In all, circ_PRKDC knockdown promoted HEKa migration during wound healing through miR-31/FBN1 axis, suggesting the therapeutic potential for circ_PRKDC on skin wound healing.

已发现环状 RNA 蛋白激酶、DNA 激活的催化亚基 (circ_PRKDC) 通过调节角质形成细胞增殖和迁移来阻碍糖尿病足溃疡的伤口愈合。然而，circ_PRKDC 在皮肤伤口愈合中的潜在机制仍不清楚。使用定量逆转录聚合酶链反应和蛋白质印迹分析检测 circ_PRKDC、microRNA (miR)-31 和原纤维蛋白 1 (FBN1) 的表达。迁移能力和基质金属肽酶 9 (MMP-9) 和 MMP2 水平的变化通过伤口愈合、transwell 和蛋白质印迹测定来确定。miR-31与circ_PRKDC或FBN1之间的相互作用通过双荧光素酶报告基因检测得到验证。相对于未受伤的皮肤，受伤后1天和7天，circ_PRKDC在伤口边缘的表达逐渐下调。在人表皮角质形成细胞 (HEKa) 中，circ_PRKDC 的敲低部分通过上调 MMP-2 和 MMP9 来促进细胞迁移，而 circ_PRKDC 过表达则表现出相反的效果。在一项机械研究中，我们证实 miR-31 是 circ_PRKDC 的靶标，抑制 miR-31 可逆转 circ_PRKDC 敲低对 HEKa 迁移的促进作用。除此之外，miR-31 被证实可以靶向 FBN1，并且 miR-31 的异位过表达加速了 HEKa 通过 FBN1 的迁移。重要的是，我们还证明 FBN1 过表达减弱了 circ_PRKDC 敲低对 HEKa 迁移的影响。总之，circ_PRKDC 敲低通过 miR-31/FBN1 轴促进伤口愈合过程中的 HEKa 迁移，表明 circ_PRKDC 对皮肤伤口愈合的治疗潜力。circ_PRKDC 的敲低部分通过上调 MMP-2 和 MMP9 促进细胞迁移，而 circ_PRKDC 过表达显示相反的效果。在一项机械研究中，我们证实 miR-31 是 circ_PRKDC 的靶标，抑制 miR-31 可逆转 circ_PRKDC 敲低对 HEKa 迁移的促进作用。除此之外，miR-31 被证实可以靶向 FBN1，并且 miR-31 的异位过表达加速了 HEKa 通过 FBN1 的迁移。重要的是，我们还证明 FBN1 过表达减弱了 circ_PRKDC 敲低对 HEKa 迁移的影响。总之，circ_PRKDC 敲低通过 miR-31/FBN1 轴促进伤口愈合过程中的 HEKa 迁移，表明 circ_PRKDC 对皮肤伤口愈合的治疗潜力。circ_PRKDC 的敲低部分通过上调 MMP-2 和 MMP9 促进细胞迁移，而 circ_PRKDC 过表达显示相反的效果。在一项机械研究中，我们证实 miR-31 是 circ_PRKDC 的靶标，抑制 miR-31 可逆转 circ_PRKDC 敲低对 HEKa 迁移的促进作用。除此之外，miR-31 被证实可以靶向 FBN1，并且 miR-31 的异位过表达加速了 HEKa 通过 FBN1 的迁移。重要的是，我们还证明 FBN1 过表达减弱了 circ_PRKDC 敲低对 HEKa 迁移的影响。总之，circ_PRKDC 敲低通过 miR-31/FBN1 轴促进伤口愈合过程中的 HEKa 迁移，表明 circ_PRKDC 对皮肤伤口愈合的治疗潜力。在一项机械研究中，我们证实 miR-31 是 circ_PRKDC 的靶标，抑制 miR-31 可逆转 circ_PRKDC 敲低对 HEKa 迁移的促进作用。除此之外，miR-31 被证实可以靶向 FBN1，并且 miR-31 的异位过表达加速了 HEKa 通过 FBN1 的迁移。重要的是，我们还证明 FBN1 过表达减弱了 circ_PRKDC 敲低对 HEKa 迁移的影响。总之，circ_PRKDC 敲低通过 miR-31/FBN1 轴促进伤口愈合过程中的 HEKa 迁移，表明 circ_PRKDC 对皮肤伤口愈合的治疗潜力。在一项机械研究中，我们证实 miR-31 是 circ_PRKDC 的靶标，抑制 miR-31 可逆转 circ_PRKDC 敲低对 HEKa 迁移的促进作用。除此之外，miR-31 被证实可以靶向 FBN1，并且 miR-31 的异位过表达加速了 HEKa 通过 FBN1 的迁移。重要的是，我们还证明 FBN1 过表达减弱了 circ_PRKDC 敲低对 HEKa 迁移的影响。总之，circ_PRKDC 敲低通过 miR-31/FBN1 轴促进伤口愈合过程中的 HEKa 迁移，表明 circ_PRKDC 对皮肤伤口愈合的治疗潜力。和异位过表达 miR-31 通过 FBN1 加速 HEKa 迁移。重要的是，我们还证明 FBN1 过表达减弱了 circ_PRKDC 敲低对 HEKa 迁移的影响。总之，circ_PRKDC 敲低通过 miR-31/FBN1 轴促进伤口愈合过程中的 HEKa 迁移，表明 circ_PRKDC 对皮肤伤口愈合的治疗潜力。和异位过表达 miR-31 通过 FBN1 加速 HEKa 迁移。重要的是，我们还证明 FBN1 过表达减弱了 circ_PRKDC 敲低对 HEKa 迁移的影响。总之，circ_PRKDC 敲低通过 miR-31/FBN1 轴促进伤口愈合过程中的 HEKa 迁移，表明 circ_PRKDC 对皮肤伤口愈合的治疗潜力。