Skeletal muscle is composed of fiber types that differ in mitochondrial content, antioxidant capacity, and susceptibility to apoptosis. Ceramides have been linked to oxidative stress-mediated apoptotic intracellular signalling and the enzyme neutral sphingomyelinase (nSMase) is, in part, responsible for generating these ceramides through the hydrolysis of sphingomyelin. Despite the role of ceramides in mediating apoptosis, there is a gap in the literature regarding nSMase in skeletal muscle mitochondria. This study aimed to characterize total nSMase activity and individual isoform expression in isolated subsarcolemmal (SS) mitochondria from soleus, diaphragm, plantaris, and extensor digitorum longus (EDL). Total nSMase activity did not differ between muscle types. nSMase2 content was detectable in all muscles and higher in EDL, soleus, and plantaris compared to diaphragm whereas nSMase3 was undetectable in all muscles. Finally, total nSMase activity positively correlated to nSMase2 protein content in soleus but not the other muscles. These findings suggest that nSMase associated with SS mitochondria may play a role in intracellular signalling processes involving ceramides in skeletal muscle and nSMase2 may be the key isoform, specifically in slow twitch muscle like soleus. Further studies are needed to fully elucidate the specific contribution of nSMase, along with the role of the various isoforms and mitochondrial subpopulation in generating mitochondrial ceramides in skeletal muscle, and its potential effects on mediating apoptosis.

骨骼肌由线粒体含量、抗氧化能力和细胞凋亡敏感性不同的纤维类型组成。神经酰胺与氧化应激介导的细胞内凋亡信号传导有关，中性鞘磷脂酶 (nSMase) 部分负责通过鞘磷脂的水解产生这些神经酰胺。尽管神经酰胺在介导细胞凋亡中发挥作用，但关于骨骼肌线粒体中的 nSMase 的文献中存在空白。本研究旨在表征来自比目鱼肌、膈肌、跖肌和趾长伸肌 (EDL) 的分离的肌膜下 (SS) 线粒体中的总 nSMase 活性和个体同种型表达。肌肉类型之间的总 nSMase 活性没有差异。nSMase2 含量在所有肌肉中都可检测到，在 EDL、比目鱼肌、跖肌与横膈膜相比，而 nSMase3 在所有肌肉中均检测不到。最后，总 nSMase 活性与比目鱼肌中的 nSMase2 蛋白含量呈正相关，但与其他肌肉无关。这些发现表明，与 SS 线粒体相关的 nSMase 可能在涉及骨骼肌中神经酰胺的细胞内信号传导过程中发挥作用，并且 nSMase2 可能是关键的亚型，特别是在比目鱼肌等慢肌中。需要进一步的研究来充分阐明 nSMase 的具体贡献，以及各种同种型和线粒体亚群在骨骼肌中产生线粒体神经酰胺中的作用，以及它对介导细胞凋亡的潜在影响。总 nSMase 活性与比目鱼肌中的 nSMase2 蛋白含量呈正相关，但与其他肌肉无关。这些发现表明，与 SS 线粒体相关的 nSMase 可能在涉及骨骼肌中神经酰胺的细胞内信号传导过程中发挥作用，并且 nSMase2 可能是关键的亚型，特别是在比目鱼肌等慢肌中。需要进一步的研究来充分阐明 nSMase 的具体贡献，以及各种同种型和线粒体亚群在骨骼肌中产生线粒体神经酰胺中的作用，以及它对介导细胞凋亡的潜在影响。总 nSMase 活性与比目鱼肌中的 nSMase2 蛋白含量呈正相关，但与其他肌肉无关。这些发现表明，与 SS 线粒体相关的 nSMase 可能在涉及骨骼肌中神经酰胺的细胞内信号传导过程中发挥作用，并且 nSMase2 可能是关键的亚型，特别是在比目鱼肌等慢肌中。需要进一步的研究来充分阐明 nSMase 的具体贡献，以及各种同种型和线粒体亚群在骨骼肌中产生线粒体神经酰胺中的作用，以及它对介导细胞凋亡的潜在影响。特别是比目鱼肌等慢肌。需要进一步的研究来充分阐明 nSMase 的具体贡献，以及各种同种型和线粒体亚群在骨骼肌中产生线粒体神经酰胺中的作用，以及它对介导细胞凋亡的潜在影响。特别是比目鱼肌等慢肌。需要进一步的研究来充分阐明 nSMase 的具体贡献，以及各种同种型和线粒体亚群在骨骼肌中产生线粒体神经酰胺中的作用，以及它对介导细胞凋亡的潜在影响。