Background Diflunisal (DIF) has analgesic and anti-inflammatory activity. It is a pharmacopeial drug found in the British Pharmacopoeia (BP), and its major pharmacopeial impurity is biphenyl-4-ol (BPL). Objective DIF has not previously been determined together with BPL. The presence of BPL could significantly affect the dose of DIF in its dosage forms; hence it is crucial to determine DIF and BPL in each other’s presence. Methods TLC is the first proposed method, where DIF and BPL were separated on silica gel TLC F254 plates. The eluent was toluene–acetone–acetic acid solution (3.5:6.5:1, v/v). Reversed-phase (RP) HPLC is the second suggested method, where a mixture of DIF and BPL was separated on a C18 (5 µm ps, 250 mm and 4.6 id) column using phosphate buffer pH 4 (0.05 M)–acetonitrile (40:60, v/v). Detection was carried out at 254 nm in both methods. Results For the TLC method, concentration ranges of 0.5–3 and 0.3–1.7 µg/band were used, with mean percentage recoveries of 100.22% (SD 0.893) and 100.52% (SD 0.952) for DIF and BPL, respectively. The RP-HPLC method was carried out over a concentration range of 5–30 and 2–9 μg/mL, with mean percentage recoveries of 100.10% (SD 1.259) and 98.88% (SD 0.822) for DIF and BPL, respectively. Conclusion The TLC and RP-HPLC methods were successfully applied for the determination of DIF and BPL, quantitatively, whether in bulk powder or in pharmaceutical formulations. Highlights Two chromatographic methods were developed and validated according to International Council on Harmonization guidelines for the assay of DIF and its pharmacopeial impurity.

中文翻译：

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两种色谱法分离测定二氟尼柳及其杂质：薄层色谱-光密度法和高效液相色谱法

背景二氟尼柳（DIF）具有镇痛和抗炎活性。它是在英国药典（BP）中发现的药典药物，其主要药典杂质是联苯-4-醇（BPL）。目标 DIF 以前没有与 BPL 一起确定。BPL 的存在会显着影响其剂型中 DIF 的剂量；因此，在彼此存在的情况下确定 DIF 和 BPL 至关重要。方法 TLC 是第一个提出的方法，其中 DIF 和 BPL 在硅胶 TLC F254 板上分离。洗脱液为甲苯-丙酮-乙酸溶液 (3.5:6.5:1, v/v)。反相 (RP) HPLC 是第二种建议的方法，其中 DIF 和 BPL 的混合物在 C18（5 µm ps，250 mm 和 4.6 id）柱上使用磷酸盐缓冲液 pH 4 (0.05 M)-乙腈 (40 :60, v/v)。两种方法均在 254 nm 处进行检测。结果 对于 TLC 方法，使用的浓度范围为 0.5–3 和 0.3–1.7 µg/条带，DIF 和 BPL 的平均回收率分别为 100.22% (SD 0.893) 和 100.52% (SD 0.952)。RP-HPLC 方法在 5–30 和 2–9 μg/mL 的浓度范围内进行，DIF 和 BPL 的平均回收率分别为 100.10% (SD 1.259) 和 98.88% (SD 0.822)。结论 TLC 和 RP-HPLC 方法成功地应用于定量测定散装粉末或药物制剂中的 DIF 和 BPL。要点 根据国际协调委员会指南开发和验证了两种色谱方法，用于测定 DIF 及其药典杂质。使用 0.5–3 和 0.3–1.7 µg/波段的浓度范围，DIF 和 BPL 的平均回收率分别为 100.22% (SD 0.893) 和 100.52% (SD 0.952)。RP-HPLC 方法在 5–30 和 2–9 μg/mL 的浓度范围内进行，DIF 和 BPL 的平均回收率分别为 100.10% (SD 1.259) 和 98.88% (SD 0.822)。结论 TLC 和 RP-HPLC 方法成功地应用于定量测定散装粉末或药物制剂中的 DIF 和 BPL。要点 根据国际协调委员会指南开发和验证了两种色谱方法，用于测定 DIF 及其药典杂质。使用 0.5–3 和 0.3–1.7 µg/波段的浓度范围，DIF 和 BPL 的平均回收率分别为 100.22% (SD 0.893) 和 100.52% (SD 0.952)。RP-HPLC 方法在 5–30 和 2–9 μg/mL 的浓度范围内进行，DIF 和 BPL 的平均回收率分别为 100.10% (SD 1.259) 和 98.88% (SD 0.822)。结论 TLC 和 RP-HPLC 方法成功地应用于定量测定散装粉末或药物制剂中的 DIF 和 BPL。要点 根据国际协调委员会指南开发和验证了两种色谱方法，用于测定 DIF 及其药典杂质。分别。RP-HPLC 方法在 5–30 和 2–9 μg/mL 的浓度范围内进行，DIF 和 BPL 的平均回收率分别为 100.10% (SD 1.259) 和 98.88% (SD 0.822)。结论 TLC 和 RP-HPLC 方法成功地应用于定量测定散装粉末或药物制剂中的 DIF 和 BPL。要点 根据国际协调委员会指南开发和验证了两种色谱方法，用于测定 DIF 及其药典杂质。分别。RP-HPLC 方法在 5–30 和 2–9 μg/mL 的浓度范围内进行，DIF 和 BPL 的平均回收率分别为 100.10% (SD 1.259) 和 98.88% (SD 0.822)。结论 TLC 和 RP-HPLC 方法成功地应用于定量测定散装粉末或药物制剂中的 DIF 和 BPL。要点 根据国际协调委员会指南开发和验证了两种色谱方法，用于测定 DIF 及其药典杂质。结论 TLC 和 RP-HPLC 方法成功地应用于定量测定散装粉末或药物制剂中的 DIF 和 BPL。要点 根据国际协调委员会指南开发和验证了两种色谱方法，用于测定 DIF 及其药典杂质。结论 TLC 和 RP-HPLC 方法成功地应用于定量测定散装粉末或药物制剂中的 DIF 和 BPL。要点 根据国际协调委员会指南开发和验证了两种色谱方法，用于测定 DIF 及其药典杂质。