Failure of current therapies to cure chronic hepatitis B has led to renewed interest in therapies that stimulate the host immune system. APOBEC3 (A3) family enzymes have been shown to induce mutations in hepatitis B virus (HBV) covalently closed circular DNA (cccDNA) leading to inhibition of HBV transcription and replication. Pattern recognition receptor (PRR) agonists have been reported to suppress HBV, but it is unclear whether these agonists induce A3 gene expression in hepatocytes. We, therefore, evaluated whether PRR signaling activates the expression of A3 genes and other innate immunity genes and restricts HBV infection. HepG2-sodium taurocholate cotransporting polypeptide (NTCP) cells were infected with HBV and treated with various PRR agonists. The level of HBV infection was subsequently assessed by measurement of HBV biomarkers, including HBV DNA, cccDNA, HBs, and HBe antigens in infected hepatocytes. Among all tested PRR ligands, only Poly(I:C)-HMW/LyoVec and Poly(I:C)-HMW significantly inhibited hepatitis B surface antigen (HBsAg), hepatitis B e antigen (HBeAg), HBV DNA, and cccDNA, whereas R848 and lipopolysaccharide (LPS) only showed significant inhibition on HBsAg and HBeAg, but not virus DNA. CpG and Pam3CSK4, on the other hand, had no significant inhibitory effect on any of the HBV infection parameters. Moreover, Poly(I:C)-HMW/LyoVec and Poly(I:C)-HMW were the only ligands that significantly increased IL-8 secretion. Interestingly, HBV infection reduced IL-8 secretion induced by Poly(I:C)-HMW and to a lesser extent Poly(I:C)-HMW/LyoVec. Poly(I:C)-HMW/LyoVec had a significant effect on increasing the expression level of A3F, A3G, A3H, TLR3, RIG-1, and MDA5 genes. Our data suggest that PRR agonists may control HBV infection through different mechanisms. The RIG-1 and MDA5 agonist, Poly(I:C)-HMW/LyoVec, seems to downregulate HBV infection through induction of A3 genes.

中文翻译：

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模式识别受体配体对诱导先天免疫和控制乙型肝炎病毒感染的影响

目前治疗慢性乙型肝炎的疗法失败导致人们对刺激宿主免疫系统的疗法重新产生兴趣。APOBEC3 (A3) 家族酶已被证明可诱导乙型肝炎病毒 (HBV) 共价闭合环状 DNA (cccDNA) 突变，从而抑制 HBV 转录和复制。据报道，模式识别受体 (PRR) 激动剂可抑制 HBV，但尚不清楚这些激动剂是否会在肝细胞中诱导 A3 基因表达。因此，我们评估了 PRR 信号是否激活 A3 基因和其他先天免疫基因的表达并限制 HBV 感染。HepG2-牛磺胆酸钠协同转运多肽（NTCP）细胞被HBV感染并用各种PRR激动剂处理。随后通过测量 HBV 生物标志物来评估 HBV 感染水平，包括感染肝细胞中的 HBV DNA、cccDNA、HBs 和 HBe 抗原。在所有测试的 PRR 配体中，只有 Poly(I:C)-HMW/LyoVec 和 Poly(I:C)-HMW 显着抑制乙型肝炎表面抗原 (HBsAg)、乙型肝炎 e 抗原 (HBeAg)、HBV DNA 和 cccDNA，而 R848 和脂多糖 (LPS) 仅对 HBsAg 和 HBeAg 显示出显着抑制作用，但对病毒 DNA 没有显着抑制作用。另一方面，CpG 和 Pam3CSK4 对任何 HBV 感染参数均无显着抑制作用。此外，Poly(I:C)-HMW/LyoVec 和 Poly(I:C)-HMW 是唯一显着增加 IL-8 分泌的配体。有趣的是，HBV 感染减少了由 Poly(I:C)-HMW 诱导的 IL-8 分泌，并且在较小程度上减少了 Poly(I:C)-HMW/LyoVec。Poly(I:C)-HMW/LyoVec 对提高 和 HBe 抗原在受感染的肝细胞中。在所有测试的 PRR 配体中，只有 Poly(I:C)-HMW/LyoVec 和 Poly(I:C)-HMW 显着抑制乙型肝炎表面抗原 (HBsAg)、乙型肝炎 e 抗原 (HBeAg)、HBV DNA 和 cccDNA，而 R848 和脂多糖 (LPS) 仅对 HBsAg 和 HBeAg 显示出显着抑制作用，但对病毒 DNA 没有显着抑制作用。另一方面，CpG 和 Pam3CSK4 对任何 HBV 感染参数均无显着抑制作用。此外，Poly(I:C)-HMW/LyoVec 和 Poly(I:C)-HMW 是唯一显着增加 IL-8 分泌的配体。有趣的是，HBV 感染减少了由 Poly(I:C)-HMW 诱导的 IL-8 分泌，并且在较小程度上减少了 Poly(I:C)-HMW/LyoVec。Poly(I:C)-HMW/LyoVec 对提高 和 HBe 抗原在受感染的肝细胞中。在所有测试的 PRR 配体中，只有 Poly(I:C)-HMW/LyoVec 和 Poly(I:C)-HMW 显着抑制乙型肝炎表面抗原 (HBsAg)、乙型肝炎 e 抗原 (HBeAg)、HBV DNA 和 cccDNA，而 R848 和脂多糖 (LPS) 仅对 HBsAg 和 HBeAg 显示出显着抑制作用，但对病毒 DNA 没有显着抑制作用。另一方面，CpG 和 Pam3CSK4 对任何 HBV 感染参数均无显着抑制作用。此外，Poly(I:C)-HMW/LyoVec 和 Poly(I:C)-HMW 是唯一显着增加 IL-8 分泌的配体。有趣的是，HBV 感染减少了由 Poly(I:C)-HMW 诱导的 IL-8 分泌，并且在较小程度上减少了 Poly(I:C)-HMW/LyoVec。Poly(I:C)-HMW/LyoVec 对提高 C)-HMW/LyoVec 和 Poly(I:C)-HMW 显着抑制乙型肝炎表面抗原 (HBsAg)、乙型肝炎 e 抗原 (HBeAg)、HBV DNA 和 cccDNA，而 R848 和脂多糖 (LPS) 仅显示显着抑制HBsAg 和 HBeAg，但不是病毒 DNA。另一方面，CpG 和 Pam3CSK4 对任何 HBV 感染参数均无显着抑制作用。此外，Poly(I:C)-HMW/LyoVec 和 Poly(I:C)-HMW 是唯一显着增加 IL-8 分泌的配体。有趣的是，HBV 感染减少了由 Poly(I:C)-HMW 诱导的 IL-8 分泌，并且在较小程度上减少了 Poly(I:C)-HMW/LyoVec。Poly(I:C)-HMW/LyoVec 对提高 C)-HMW/LyoVec 和 Poly(I:C)-HMW 显着抑制乙型肝炎表面抗原 (HBsAg)、乙型肝炎 e 抗原 (HBeAg)、HBV DNA 和 cccDNA，而 R848 和脂多糖 (LPS) 仅显示显着抑制HBsAg 和 HBeAg，但不是病毒 DNA。另一方面，CpG 和 Pam3CSK4 对任何 HBV 感染参数均无显着抑制作用。此外，Poly(I:C)-HMW/LyoVec 和 Poly(I:C)-HMW 是唯一显着增加 IL-8 分泌的配体。有趣的是，HBV 感染减少了由 Poly(I:C)-HMW 诱导的 IL-8 分泌，并且在较小程度上减少了 Poly(I:C)-HMW/LyoVec。Poly(I:C)-HMW/LyoVec 对提高 而 R848 和脂多糖 (LPS) 仅对 HBsAg 和 HBeAg 显示出显着抑制作用，但对病毒 DNA 没有显着抑制作用。另一方面，CpG 和 Pam3CSK4 对任何 HBV 感染参数均无显着抑制作用。此外，Poly(I:C)-HMW/LyoVec 和 Poly(I:C)-HMW 是唯一显着增加 IL-8 分泌的配体。有趣的是，HBV 感染减少了由 Poly(I:C)-HMW 诱导的 IL-8 分泌，并且在较小程度上减少了 Poly(I:C)-HMW/LyoVec。Poly(I:C)-HMW/LyoVec 对提高 而 R848 和脂多糖 (LPS) 仅对 HBsAg 和 HBeAg 显示出显着抑制作用，但对病毒 DNA 没有显着抑制作用。另一方面，CpG 和 Pam3CSK4 对任何 HBV 感染参数均无显着抑制作用。此外，Poly(I:C)-HMW/LyoVec 和 Poly(I:C)-HMW 是唯一显着增加 IL-8 分泌的配体。有趣的是，HBV 感染减少了由 Poly(I:C)-HMW 诱导的 IL-8 分泌，并且在较小程度上减少了 Poly(I:C)-HMW/LyoVec。Poly(I:C)-HMW/LyoVec 对提高 C)-HMW是唯一显着增加IL-8分泌的配体。有趣的是，HBV 感染减少了由 Poly(I:C)-HMW 诱导的 IL-8 分泌，并且在较小程度上减少了 Poly(I:C)-HMW/LyoVec。Poly(I:C)-HMW/LyoVec 对提高 C)-HMW是唯一显着增加IL-8分泌的配体。有趣的是，HBV 感染减少了由 Poly(I:C)-HMW 诱导的 IL-8 分泌，并且在较小程度上减少了 Poly(I:C)-HMW/LyoVec。Poly(I:C)-HMW/LyoVec 对提高A3F、A3G、A3H、TLR3、RIG-1和MDA5基因。我们的数据表明，PRR 激动剂可能通过不同的机制控制 HBV 感染。RIG-1和MDA5激动剂 Poly ( I:C)-HMW/LyoVec 似乎通过诱导 A3 基因来下调 HBV 感染。