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Silencing of Nek2 suppresses the proliferation, migration and invasion and induces apoptosis of breast cancer cells by regulating ERK/MAPK signaling
Journal of Molecular Histology ( IF 2.9 ) Pub Date : 2021-05-19 , DOI: 10.1007/s10735-021-09979-9
Zeyu Xing 1 , Menglu Zhang 1 , Xin Wang 1 , Jiaqi Liu 1 , Gang Liu 1 , Kexin Feng 1 , Xiang Wang 1
Affiliation  

Breast cancer is a frequent cancer among women. The current study investigated the biological functions of Nek2 in breast cancer and its possible mechanism. The mRNA expression of Nek2 in breast epithelial cells and eight breast cancer cell lines was detected by qRT-PCR. Silencing Nek2 was transfected into MDA-MB-231 and MCF7 cells to examine its roles in the viability, migration, invasion, cell colony, apoptosis and cell cycle of the breast cancer cells by performing CCK-8, wound scratch, Transwell, clone formation and flow cytometry assays, respectively. The expressions of related genes were detected using qRT-PCR and Western blot. MAPK pathway agonist IGF (insulin-like growth factor-1) was added into MDA-MB-231 and MCF7 cells and then cell viability was examined. Nek2 expression was frequently up-regulated in breast cancer cell lines, and silencing Nek2 significantly inhibited the viability, cell migration, invasion and clone formation, promoted cell apoptosis of MDA-MB-231 and MCF7 cells, and arrested cell cycle in G0/G1 phase. Furthermore, knocking down Nek2 decreased the mRNA and protein expressions of Bcl-2, CyclinB1 and CyclinD1, and increased Bax and p27 expressions. Moreover, knocking down Nek2 inhibited the phosphorylation of ERK and p38, and almost completely reversed the expression of p-ERK increased by IGF, but Nek2 knockdown had no obvious effect on p-p38. The inhibitory effect of Nek2 silencing on the cell viability was mainly realized by the inhibition of ERK/MAPK signaling. Nek2 plays an important role in the regulation of the progression of breast cancer in vitro probably through regulating the ERK/MAPK signaling.



中文翻译:

沉默 Nek2 通过调节 ERK/MAPK 信号通路抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭并诱导其凋亡

乳腺癌是女性常见的癌症。目前的研究调查了Nek2在乳腺癌中的生物学功能及其可能的机制。通过qRT-PCR检测Nek2在乳腺上皮细胞和8个乳腺癌细胞系中的mRNA表达。将沉默的 Nek2 转染到 MDA-MB-231 和 MCF7 细胞中,通过 CCK-8、伤口划痕、Transwell、克隆形成来检查其在乳腺癌细胞的活力、迁移、侵袭、细胞集落、凋亡和细胞周期中的作用和流式细胞仪检测,分别。采用qRT-PCR和Western blot检测相关基因的表达。将MAPK通路激动剂IGF(胰岛素样生长因子-1)添加到MDA-MB-231和MCF7细胞中,然后检查细胞活力。Nek2 表达在乳腺癌细胞系中经常上调,沉默Nek2显着抑制MDA-MB-231和MCF7细胞的活力、细胞迁移、侵袭和克隆形成,促进细胞凋亡,使细胞周期停滞在G0/G1期。此外,敲除 Nek2 会降低 Bcl-2、CyclinB1 和 CyclinD1 的 mRNA 和蛋白表达,并增加 Bax 和 p27 的表达。此外,敲除 Nek2 抑制了 ERK 和 p38 的磷酸化,几乎完全逆转了 IGF 增加的 p-ERK 表达,但敲除 Nek2 对 p-p38 没有明显影响。Nek2沉默对细胞活力的抑制作用主要是通过抑制ERK/MAPK信号来实现的。Nek2可能通过调节ERK/MAPK信号通路在体外调控乳腺癌进展中发挥重要作用。细胞迁移、侵袭和克隆形成,促进了MDA-MB-231和MCF7细胞的凋亡,使细胞周期停滞在G0/G1期。此外,敲除 Nek2 会降低 Bcl-2、CyclinB1 和 CyclinD1 的 mRNA 和蛋白表达,并增加 Bax 和 p27 的表达。此外,敲除 Nek2 抑制了 ERK 和 p38 的磷酸化,几乎完全逆转了 IGF 增加的 p-ERK 表达,但敲除 Nek2 对 p-p38 没有明显影响。Nek2沉默对细胞活力的抑制作用主要是通过抑制ERK/MAPK信号来实现的。Nek2可能通过调节ERK/MAPK信号通路在体外调控乳腺癌进展中发挥重要作用。细胞迁移、侵袭和克隆形成,促进了MDA-MB-231和MCF7细胞的凋亡,使细胞周期停滞在G0/G1期。此外,敲除 Nek2 会降低 Bcl-2、CyclinB1 和 CyclinD1 的 mRNA 和蛋白表达,并增加 Bax 和 p27 的表达。此外,敲除 Nek2 抑制了 ERK 和 p38 的磷酸化,几乎完全逆转了 IGF 增加的 p-ERK 表达,但敲除 Nek2 对 p-p38 没有明显影响。Nek2沉默对细胞活力的抑制作用主要是通过抑制ERK/MAPK信号来实现的。Nek2可能通过调节ERK/MAPK信号通路在体外调控乳腺癌进展中发挥重要作用。并在 G0/G1 期停滞细胞周期。此外,敲除 Nek2 会降低 Bcl-2、CyclinB1 和 CyclinD1 的 mRNA 和蛋白表达,并增加 Bax 和 p27 的表达。此外,敲除 Nek2 抑制了 ERK 和 p38 的磷酸化,几乎完全逆转了 IGF 增加的 p-ERK 表达,但敲除 Nek2 对 p-p38 没有明显影响。Nek2沉默对细胞活力的抑制作用主要是通过抑制ERK/MAPK信号来实现的。Nek2可能通过调节ERK/MAPK信号通路在体外调控乳腺癌进展中发挥重要作用。并在 G0/G1 期停滞细胞周期。此外,敲除 Nek2 会降低 Bcl-2、CyclinB1 和 CyclinD1 的 mRNA 和蛋白表达,并增加 Bax 和 p27 的表达。此外,敲除 Nek2 抑制了 ERK 和 p38 的磷酸化,几乎完全逆转了 IGF 增加的 p-ERK 表达,但敲除 Nek2 对 p-p38 没有明显影响。Nek2沉默对细胞活力的抑制作用主要是通过抑制ERK/MAPK信号来实现的。Nek2可能通过调节ERK/MAPK信号通路在体外调控乳腺癌进展中发挥重要作用。敲除 Nek2 抑制了 ERK 和 p38 的磷酸化,几乎完全逆转了 IGF 增加的 p-ERK 表达,但敲除 Nek2 对 p-p38 没有明显影响。Nek2沉默对细胞活力的抑制作用主要是通过抑制ERK/MAPK信号来实现的。Nek2可能通过调节ERK/MAPK信号通路在体外调控乳腺癌进展中发挥重要作用。敲除 Nek2 抑制了 ERK 和 p38 的磷酸化,几乎完全逆转了 IGF 增加的 p-ERK 表达,但敲除 Nek2 对 p-p38 没有明显影响。Nek2沉默对细胞活力的抑制作用主要是通过抑制ERK/MAPK信号来实现的。Nek2可能通过调节ERK/MAPK信号通路在体外调控乳腺癌进展中发挥重要作用。

更新日期:2021-05-19
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