Inhaled antibiotics such as colistin and ciprofloxacin are increasingly used to treat bacterial lung infections in cystic fibrosis patients. In this study, we established and validated a new HPLC-MS/MS method that could simultaneously detect drug concentrations of ciprofloxacin, colistin and ivacaftor in rat plasma, human epithelial cell lysate, cell culture medium, and drug transport media. An aliquot of 200 μL drug-containing rat plasma or cell culture medium was treated with 600 μL of extraction solution (acetonitrile containing 0.1% formic acid and 0.2% trifluoroacetic acid (TFA)). The addition of 0.2% TFA helped to break the drug-protein bonds. Moreover, the addition of 0.1% formic acid to the transport medium and cell lysate samples could significantly improve the response and reproducibility. After vortexing and centrifuging, the sample components were analyzed by HPLC-MS/MS. The multiple reaction monitoring mode was used to detect the following transitions: 585.5–101.1 (colistin A), 578.5–101.1 (colistin B), 393.2–337.2 (ivacaftor), 332.2–314.2 (ciprofloxacin), 602.3–101.1 (polymyxin B1 as internal standard (IS)) and 595.4–101.1 (polymyxin B2 as IS). The running time of a single sample was only 6 min, making this a time-efficient method. Linear correlations were found for colistin A at 0.029–5.82 μg/mL, colistin B at 0.016–3.14 μg/mL, ivacaftor at 0.05–10.0 μg/mL, and ciprofloxacin at 0.043–8.58 μg/mL. Accuracy, precision, and stability of the method were within the acceptable range. This method would be highly useful for research on cytotoxicity, animal pharmacokinetics, and in vitro drug delivery.

吸入性抗生素如粘菌素和环丙沙星越来越多地用于治疗囊性纤维化患者的细菌性肺部感染。在本研究中，我们建立并验证了一种新的 HPLC-MS/MS 方法，该方法可以同时检测大鼠血浆、人上皮细胞裂解物、细胞培养基和药物转运培养基中环丙沙星、粘菌素和依伐卡托的药物浓度。用 600 μL 提取溶液（含有 0.1% 甲酸和 0.2% 三氟乙酸 (TFA) 的乙腈）处理 200 μL 含药物大鼠血浆或细胞培养基的等分试样。添加 0.2% TFA 有助于打破药物-蛋白质键。此外，在转运培养基和细胞裂解液样品中添加 0.1% 甲酸可以显着提高响应和重现性。涡旋和离心后，通过 HPLC-MS/MS 分析样品组分。多反应监测模式用于检测以下转变：585.5-101.1（粘菌素 A）、578.5-101.1（粘菌素 B）、393.2-337.2（ivacaftor）、332.2-314.2（环丙沙星）、602.3-101.1（多粘菌素 B1 作为内标（IS））和 595.4–101.1（多粘菌素 B2 作为 IS）。单个样品的运行时间仅为 6 分钟，是一种省时的方法。发现 0.029-5.82 μg/mL 的粘菌素 A、0.016-3.14 μg/mL 的粘菌素 B、0.05-10.0 μg/mL 的依伐卡托和 0.043-8.58 μg/mL 的环丙沙星具有线性相关性。该方法的准确度、精密度和稳定性均在可接受的范围内。这种方法对于细胞毒性、动物药代动力学和体外药物传递的研究非常有用。多反应监测模式用于检测以下转变：585.5-101.1（粘菌素 A）、578.5-101.1（粘菌素 B）、393.2-337.2（ivacaftor）、332.2-314.2（环丙沙星）、602.3-101.1（多粘菌素 B1 作为内标（IS））和 595.4–101.1（多粘菌素 B2 作为 IS）。单个样品的运行时间仅为 6 分钟，是一种省时的方法。发现 0.029-5.82 μg/mL 的粘菌素 A、0.016-3.14 μg/mL 的粘菌素 B、0.05-10.0 μg/mL 的依伐卡托和 0.043-8.58 μg/mL 的环丙沙星具有线性相关性。该方法的准确度、精密度和稳定性均在可接受的范围内。这种方法对于细胞毒性、动物药代动力学和体外药物传递的研究非常有用。多反应监测模式用于检测以下转变：585.5-101.1（粘菌素 A）、578.5-101.1（粘菌素 B）、393.2-337.2（ivacaftor）、332.2-314.2（环丙沙星）、602.3-101.1（多粘菌素 B1 作为内标（IS））和 595.4–101.1（多粘菌素 B2 作为 IS）。单个样品的运行时间仅为 6 分钟，是一种省时的方法。发现 0.029-5.82 μg/mL 的粘菌素 A、0.016-3.14 μg/mL 的粘菌素 B、0.05-10.0 μg/mL 的依伐卡托和 0.043-8.58 μg/mL 的环丙沙星具有线性相关性。该方法的准确度、精密度和稳定性均在可接受的范围内。这种方法对于细胞毒性、动物药代动力学和体外药物传递的研究非常有用。2（依伐卡托）、332.2-314.2（环丙沙星）、602.3-101.1（多粘菌素 B1 作为内标（IS））和 595.4-101.1（多粘菌素 B2 作为 IS）。单个样品的运行时间仅为 6 分钟，是一种省时的方法。发现 0.029-5.82 μg/mL 的粘菌素 A、0.016-3.14 μg/mL 的粘菌素 B、0.05-10.0 μg/mL 的依伐卡托和 0.043-8.58 μg/mL 的环丙沙星具有线性相关性。该方法的准确度、精密度和稳定性均在可接受的范围内。这种方法对于细胞毒性、动物药代动力学和体外药物传递的研究非常有用。2（依伐卡托）、332.2-314.2（环丙沙星）、602.3-101.1（多粘菌素 B1 作为内标（IS））和 595.4-101.1（多粘菌素 B2 作为 IS）。单个样品的运行时间仅为 6 分钟，是一种省时的方法。发现 0.029-5.82 μg/mL 的粘菌素 A、0.016-3.14 μg/mL 的粘菌素 B、0.05-10.0 μg/mL 的依伐卡托和 0.043-8.58 μg/mL 的环丙沙星具有线性相关性。该方法的准确度、精密度和稳定性均在可接受的范围内。这种方法对于细胞毒性、动物药代动力学和体外药物传递的研究非常有用。029–5.82 μg/mL，粘菌素 B 为 0.016–3.14 μg/mL，ivacaftor 为 0.05–10.0 μg/mL，环丙沙星为 0.043–8.58 μg/mL。该方法的准确度、精密度和稳定性均在可接受的范围内。这种方法对于细胞毒性、动物药代动力学和体外药物传递的研究非常有用。029–5.82 μg/mL，粘菌素 B 为 0.016–3.14 μg/mL，ivacaftor 为 0.05–10.0 μg/mL，环丙沙星为 0.043–8.58 μg/mL。该方法的准确度、精密度和稳定性均在可接受的范围内。这种方法对于细胞毒性、动物药代动力学和体外药物传递的研究非常有用。