MiRNAs have gained tremendous attention as studies have shown that miRNAs play important roles in osteoporosis (OP) progression. This study attempted to explore whether miR-23b-3p is involved in the pathogenesis of OP. We detected the miR-23b-3p and Cyclin D1 (CCND1) expressional patterns in the bone of patients with or without OP relying on the GEO database. β-Glycerophosphate disodium salt and L-ascorbic acid were utilized to stimulate differentiation of MC3T3-E1 cells. Cell proliferative, apoptotic abilities, and cell cycle distribution were determined by CCK-8 and flow cytometry experiments. TargetScan and dual-luciferase reporter analysis were employed to predict and verify the targets of miR-23b-3p. Western blot was implemented to detect the expression of CCND1, apoptosis-related proteins, and cell osteogenesis–related proteins. ALP activity of MC3T3-E1 cells was measured using ALP kit. MiR-23b-3p was increased in OP specimens. Gain-/loss-of-function analysis indicated that the miR-23b-3p inhibited proliferation and differentiation and promoted apoptosis of MC3T3-E1 cells. The levels of Bax and cleaved caspase-3 were increased while those of Bcl-2 were decreased. ALP activity was reduced, and the levels of ALP, Runx2, Osterix, and OPN were declined in MC3T3-E1 cells relative to control. Further analyses demonstrated that CCND1 was a putative target gene of miR-23b-3p. Moreover, knockdown of CCND1 could reverse the impacts of miR-23b-3p inhibitor in MC3T3-E1 cells. MiR-23b-3p functioned as an O-positive factor through regulating cell cycle, proliferation, apoptosis, and differentiation via targeting CCND1.

随着研究表明 miRNA 在骨质疏松症 (OP) 的进展中发挥重要作用，miRNA 获得了极大的关注。本研究试图探讨 miR-23b-3p 是否参与 OP 的发病机制。我们依靠GEO数据库检测了患有或不患有OP的患者骨骼中的miR-23b-3p和细胞周期蛋白D1（CCND1）表达模式。β-甘油磷酸二钠盐和L-抗坏血酸用于刺激MC3T3-E1细胞的分化。通过CCK-8和流式细胞术实验确定细胞增殖、凋亡能力和细胞周期分布。TargetScan 和双荧光素酶报告基因分析被用来预测和验证 miR-23b-3p 的目标。实施Western印迹以检测CCND1、细胞凋亡相关蛋白和细胞成骨相关蛋白的表达。使用 ALP 试剂盒测量 MC3T3-E1 细胞的 ALP 活性。MiR-23b-3p 在 OP 标本中增加。获得/丧失功能分析表明，miR-23b-3p 抑制增殖和分化并促进 MC3T3-E1 细胞的凋亡。Bax 和裂解的 caspase-3 水平升高，而 Bcl-2 水平降低。与对照相比，MC3T3-E1 细胞中的 ALP 活性降低，ALP、Runx2、Osterix 和 OPN 的水平下降。进一步的分析表明，CCND1 是 miR-23b-3p 的推定靶基因。此外，CCND1 的敲低可以逆转 miR-23b-3p 抑制剂对 MC3T3-E1 细胞的影响。MiR-23b-3p 通过靶向 CCND1 调节细胞周期、增殖、凋亡和分化，起到 O 阳性因子的作用。MiR-23b-3p 在 OP 标本中增加。获得/丧失功能分析表明，miR-23b-3p 抑制增殖和分化并促进 MC3T3-E1 细胞的凋亡。Bax 和裂解的 caspase-3 水平升高，而 Bcl-2 水平降低。与对照相比，MC3T3-E1 细胞中的 ALP 活性降低，ALP、Runx2、Osterix 和 OPN 的水平下降。进一步的分析表明，CCND1 是 miR-23b-3p 的推定靶基因。此外，CCND1 的敲低可以逆转 miR-23b-3p 抑制剂对 MC3T3-E1 细胞的影响。MiR-23b-3p 通过靶向 CCND1 调节细胞周期、增殖、凋亡和分化，起到 O 阳性因子的作用。MiR-23b-3p 在 OP 标本中增加。获得/丧失功能分析表明，miR-23b-3p 抑制增殖和分化并促进 MC3T3-E1 细胞的凋亡。Bax 和裂解的 caspase-3 水平升高，而 Bcl-2 水平降低。与对照相比，MC3T3-E1 细胞中的 ALP 活性降低，ALP、Runx2、Osterix 和 OPN 的水平下降。进一步的分析表明，CCND1 是 miR-23b-3p 的推定靶基因。此外，CCND1 的敲低可以逆转 miR-23b-3p 抑制剂对 MC3T3-E1 细胞的影响。MiR-23b-3p 通过靶向 CCND1 调节细胞周期、增殖、凋亡和分化，起到 O 阳性因子的作用。获得/丧失功能分析表明，miR-23b-3p 抑制增殖和分化并促进 MC3T3-E1 细胞的凋亡。Bax 和裂解的 caspase-3 水平升高，而 Bcl-2 水平降低。与对照相比，MC3T3-E1 细胞中的 ALP 活性降低，ALP、Runx2、Osterix 和 OPN 的水平下降。进一步的分析表明，CCND1 是 miR-23b-3p 的推定靶基因。此外，CCND1 的敲低可以逆转 miR-23b-3p 抑制剂对 MC3T3-E1 细胞的影响。MiR-23b-3p 通过靶向 CCND1 调节细胞周期、增殖、凋亡和分化，起到 O 阳性因子的作用。获得/丧失功能分析表明，miR-23b-3p 抑制增殖和分化并促进 MC3T3-E1 细胞的凋亡。Bax 和裂解的 caspase-3 水平升高，而 Bcl-2 水平降低。与对照相比，MC3T3-E1 细胞中的 ALP 活性降低，ALP、Runx2、Osterix 和 OPN 的水平下降。进一步的分析表明，CCND1 是 miR-23b-3p 的推定靶基因。此外，CCND1 的敲低可以逆转 miR-23b-3p 抑制剂对 MC3T3-E1 细胞的影响。MiR-23b-3p 通过靶向 CCND1 调节细胞周期、增殖、凋亡和分化，起到 O 阳性因子的作用。与对照相比，MC3T3-E1 细胞中 ALP、Runx2、Osterix 和 OPN 的水平下降。进一步的分析表明，CCND1 是 miR-23b-3p 的推定靶基因。此外，CCND1 的敲低可以逆转 miR-23b-3p 抑制剂对 MC3T3-E1 细胞的影响。MiR-23b-3p 通过靶向 CCND1 调节细胞周期、增殖、凋亡和分化，起到 O 阳性因子的作用。与对照相比，MC3T3-E1 细胞中 ALP、Runx2、Osterix 和 OPN 的水平下降。进一步的分析表明，CCND1 是 miR-23b-3p 的推定靶基因。此外，CCND1 的敲低可以逆转 miR-23b-3p 抑制剂对 MC3T3-E1 细胞的影响。MiR-23b-3p 通过靶向 CCND1 调节细胞周期、增殖、凋亡和分化，起到 O 阳性因子的作用。