Key Points Deletion of Gly236 in human IgG1, naturally lacking in IgG2, silences FcγR. Deletion of Gly236 has no effect on complement-mediated effector functions. Data suggest how IgG2 may have lost FcγRI binding during evolution. Abs of the IgG isotype mediate effector functions like Ab-dependent cellular cytotoxicity and Ab-dependent cellular phagocytosis by Fc interactions with FcγRs and complement-dependent cytotoxicity upon IgG-Fc binding to C1q. In this study, we describe the crucial role of the highly conserved dual glycines at position 236–237 in the lower hinge region of human IgG, including the lack of one glycine as found in IgG2. We found several permutations in this region that either silence or largely abrogate FcγR binding and downstream FcγR effector functions, as demonstrated by surface plasmon resonance, Ab-dependent cellular phagocytosis, and Ab-dependent cellular cytotoxicity assays. Although the binding regions of FcγRs and C1q on the IgG-Fc largely overlap, IgG1 with a deletion of G236 only silences FcγR-mediated effector functions without affecting C1q-binding or activation. Several mutations resulted in only residual FcγRI binding with differing affinities that are either complement competent or silenced. Interestingly, we also found that IgG2, naturally only binding FcγRIIa, gains binding to FcγRI and FcγRIIIa after insertion of G236, highlighting the crucial importance of G236 in IgG for FcγR interaction. These mutants may become invaluable tools for FcγR-related research as well as for therapeutic purposes in which only complement-mediated functions are required without the involvement of FcγR.

中文翻译：

---

人 IgG1 下铰链区的甘氨酸 236 区分 FcγR 与补体效应子功能

关键点 人 IgG1 中 Gly236 的缺失，天然缺乏 IgG2，使 FcγR 沉默。Gly236 的删除对补体介导的效应子功能没有影响。数据表明 IgG2 如何在进化过程中失去 FcγRI 结合。IgG 同种型的 Ab 通过 Fc 与 FcγR 的相互作用以及 IgG-Fc 与 C1q 结合后的补体依赖性细胞毒性来介导效应子功能，例如 Ab 依赖性细胞毒性和 Ab 依赖性细胞吞噬作用。在这项研究中，我们描述了人类 IgG 下部铰链区 236-237 位高度保守的双甘氨酸的关键作用，包括缺乏 IgG2 中发现的一种甘氨酸。我们在该区域发现了几个排列，它们要么沉默，要么在很大程度上取消了 FcγR 结合和下游 FcγR 效应子功能，如表面等离子共振所证明的那样，Ab 依赖性细胞吞噬作用和 Ab 依赖性细胞毒性测定。尽管 IgG-Fc 上 FcγRs 和 C1q 的结合区域大部分重叠，但缺失 G236 的 IgG1 仅沉默 FcγR 介导的效应子功能，而不会影响 C1q 结合或激活。几个突变导致仅残留的 FcγRI 结合具有不同的亲和力，这些亲和力要么是补体有效的，要么是沉默的。有趣的是，我们还发现 IgG2，天然只结合 FcγRIIa，在插入 G236 后获得与 FcγRI 和 FcγRIIIa 的结合，突出了 G236 在 IgG 中对 FcγR 相互作用的关键重要性。这些突变体可能成为 FcγR 相关研究以及治疗目的的宝贵工具，其中仅需要补体介导的功能而无需 FcγR 的参与。和 Ab 依赖性细胞毒性测定。尽管 IgG-Fc 上 FcγRs 和 C1q 的结合区域大部分重叠，但缺失 G236 的 IgG1 仅沉默 FcγR 介导的效应子功能，而不会影响 C1q 结合或激活。几个突变导致仅残留的 FcγRI 结合具有不同的亲和力，这些亲和力要么是补体有效的，要么是沉默的。有趣的是，我们还发现 IgG2，天然只结合 FcγRIIa，在插入 G236 后获得与 FcγRI 和 FcγRIIIa 的结合，突出了 G236 在 IgG 中对 FcγR 相互作用的关键重要性。这些突变体可能成为 FcγR 相关研究以及治疗目的的宝贵工具，其中仅需要补体介导的功能而无需 FcγR 的参与。和 Ab 依赖性细胞毒性测定。尽管 IgG-Fc 上 FcγRs 和 C1q 的结合区域大部分重叠，但缺失 G236 的 IgG1 仅沉默 FcγR 介导的效应子功能，而不会影响 C1q 结合或激活。几个突变导致仅残留的 FcγRI 结合具有不同的亲和力，这些亲和力要么是补体有效的，要么是沉默的。有趣的是，我们还发现 IgG2，天然只结合 FcγRIIa，在插入 G236 后获得与 FcγRI 和 FcγRIIIa 的结合，突出了 G236 在 IgG 中对 FcγR 相互作用的关键重要性。这些突变体可能成为 FcγR 相关研究以及治疗目的的宝贵工具，其中仅需要补体介导的功能而无需 FcγR 的参与。尽管 IgG-Fc 上 FcγRs 和 C1q 的结合区域大部分重叠，但缺失 G236 的 IgG1 仅沉默 FcγR 介导的效应子功能，而不会影响 C1q 结合或激活。几个突变导致仅残留的 FcγRI 结合具有不同的亲和力，这些亲和力要么是补体有效的，要么是沉默的。有趣的是，我们还发现 IgG2，天然只结合 FcγRIIa，在插入 G236 后获得与 FcγRI 和 FcγRIIIa 的结合，突出了 G236 在 IgG 中对 FcγR 相互作用的关键重要性。这些突变体可能成为 FcγR 相关研究以及治疗目的的宝贵工具，其中仅需要补体介导的功能而无需 FcγR 的参与。尽管 IgG-Fc 上 FcγRs 和 C1q 的结合区域大部分重叠，但缺失 G236 的 IgG1 仅沉默 FcγR 介导的效应子功能，而不会影响 C1q 结合或激活。几个突变导致仅残留的 FcγRI 结合具有不同的亲和力，这些亲和力要么是补体有效的，要么是沉默的。有趣的是，我们还发现 IgG2，天然只结合 FcγRIIa，在插入 G236 后获得与 FcγRI 和 FcγRIIIa 的结合，突出了 G236 在 IgG 中对 FcγR 相互作用的关键重要性。这些突变体可能成为 FcγR 相关研究以及治疗目的的宝贵工具，其中仅需要补体介导的功能而无需 FcγR 的参与。几个突变导致仅残留的 FcγRI 结合具有不同的亲和力，这些亲和力要么是补体有效的，要么是沉默的。有趣的是，我们还发现 IgG2，天然只结合 FcγRIIa，在插入 G236 后获得与 FcγRI 和 FcγRIIIa 的结合，突出了 G236 在 IgG 中对 FcγR 相互作用的关键重要性。这些突变体可能成为 FcγR 相关研究以及治疗目的的宝贵工具，其中仅需要补体介导的功能而无需 FcγR 的参与。几个突变导致仅残留的 FcγRI 结合具有不同的亲和力，这些亲和力要么是补体有效的，要么是沉默的。有趣的是，我们还发现 IgG2，天然只结合 FcγRIIa，在插入 G236 后获得与 FcγRI 和 FcγRIIIa 的结合，突出了 G236 在 IgG 中对 FcγR 相互作用的关键重要性。这些突变体可能成为 FcγR 相关研究以及治疗目的的宝贵工具，其中仅需要补体介导的功能而无需 FcγR 的参与。强调了 G236 在 IgG 中对于 FcγR 相互作用的关键重要性。这些突变体可能成为 FcγR 相关研究以及治疗目的的宝贵工具，其中仅需要补体介导的功能而无需 FcγR 的参与。强调了 G236 在 IgG 中对于 FcγR 相互作用的关键重要性。这些突变体可能成为 FcγR 相关研究以及治疗目的的宝贵工具，其中仅需要补体介导的功能而无需 FcγR 的参与。