A simple, rapid, and accurate stability-indicating reverse phase HPLC–DAD method was developed and validated for the simultaneous determination of empagliflozin, dapagliflozin, and canagliflozin (Gliflozins). Optimum chromatographic separations among gliflozins in the presence of matrices and degradation products have been achieved within 7 min by using Hypercil™ C18 column (25 × 4.6 mm, 5 μm) with acetonitrile and 0.1% formic acid buffer, pH 3.7 (60:40 v/v) as the mobile phase at a flow rate of 1 mL min−1. The proposed method was performed at 230 nm for empagliflozin and dapagliflozin while detection of canagliflozin was carried out at 290 nm. Analytical performance of the method was thoroughly validated in accordance with the ICH guidelines with respect to system suitability, linearity, accuracy, precision, specificity, robustness, detection and quantification limits. Regression analysis showed good correlations with regard to R2 ≥ 0.997 over the concentration range of 4–160 µg mL−1 for gliflozins. The LOD was found to be 0.07 µg mL−1, 0.12 µg mL−1 and 0.29 µg mL−1 for empagliflozin, dapagliflozin and canagliflozin, respectively. Method development was established keeping in view the structure of drugs, their pKa values, ionizability of drugs, pH values of buffer system and buffer capacity. Peak purities of gliflozins in stress tests are less than 1.5, which further confirms no co-elution of degradation products. The proposed method is suitable for routine quality control analysis of gliflozins and to carry out stability studies.

中文翻译：

---

用于同时测定药物制剂中弱电离恩格列净、达格列净和卡格列净的稳定性指示、pH 和 pKa 相关 HPLC-DAD 方法

开发并验证了一种简单、快速和准确的稳定性指示反相 HPLC-DAD 方法，用于同时测定恩格列净、达格列净和卡格列净（格列净）。使用 Hypercil™ C18 色谱柱（25 × 4.6 mm，5 μm）和乙腈和 0.1% 甲酸缓冲液，pH 3.7（60:40 v /v) 作为流动相，流速为 1 mL min-1。提出的方法在 230 nm 下对 empagliflozin 和 dapagliflozin 进行，而卡格列净的检测在 290 nm 下进行。该方法的分析性能根据 ICH 指南在系统适用性、线性、准确度、精密度、特异性、稳健性、检测限和定量限。回归分析表明，格列净在 4–160 µg mL-1 的浓度范围内，R2 ≥ 0.997 具有良好的相关性。发现恩格列净、达格列净和卡格列净的 LOD 分别为 0.07 µg mL-1、0.12 µg mL-1 和 0.29 µg mL-1。方法开发的建立考虑了药物的结构、它们的 pKa 值、药物的电离性、缓冲系统的 pH 值和缓冲容量。应力测试中格列净的峰值纯度小于 1.5，进一步证实没有降解产物的共洗脱。该方法适用于格列净的常规质量控制分析和稳定性研究。997 在 4–160 µg mL-1 的浓度范围内用于格列净。发现恩格列净、达格列净和卡格列净的 LOD 分别为 0.07 µg mL-1、0.12 µg mL-1 和 0.29 µg mL-1。方法开发的建立考虑了药物的结构、它们的 pKa 值、药物的电离性、缓冲系统的 pH 值和缓冲容量。应力测试中格列净的峰值纯度小于 1.5，进一步证实没有降解产物的共洗脱。该方法适用于格列净的常规质量控制分析和稳定性研究。997 在 4–160 µg mL-1 的浓度范围内用于格列净。发现恩格列净、达格列净和卡格列净的 LOD 分别为 0.07 µg mL-1、0.12 µg mL-1 和 0.29 µg mL-1。方法开发的建立考虑了药物的结构、它们的 pKa 值、药物的电离性、缓冲系统的 pH 值和缓冲容量。应力测试中格列净的峰值纯度小于 1.5，进一步证实没有降解产物的共洗脱。该方法适用于格列净的常规质量控制分析和稳定性研究。药物的电离性、缓冲系统的 pH 值和缓冲容量。应力测试中格列净的峰值纯度小于 1.5，进一步证实没有降解产物的共洗脱。该方法适用于格列净的常规质量控制分析和稳定性研究。药物的电离性、缓冲系统的 pH 值和缓冲容量。应力测试中格列净的峰值纯度小于 1.5，进一步证实没有降解产物的共洗脱。该方法适用于格列净的常规质量控制分析和稳定性研究。