Latent membrane protein 1 (LMP1) is known as an oncoprotein in nasopharyngeal carcinoma (NPC) cells, which is considered to have a strong association with growth, invasion and metastasis of NPC cells through lipid rafts. Methyl-[Formula: see text]-cyclodextrin (M[Formula: see text]CD) can disrupt lipid rafts through cholesterol depletion. In this study, we revealed that M[Formula: see text]CD induced apoptosis in two kinds of NPC cells including CNE1 cells, a LMP1-negative nasopharyngeal squamous carcinoma cell line, and CNE1-LMP1 cells, a LMP1-positive nasopharyngeal squamous carcinoma cell line. Furthermore, the impact of M[Formula: see text]CD on LMP1 was investigated by fluorescence resonance energy transfer (FRET) method in NPC cells. Synchronized tempo-spatial and spectral detection of LMP1/LMP1 interaction were performed using fluorescence microscope and spectrograph. FRET efficiency indicated that LMP1/LMP1 interaction gradually enhanced after M[Formula: see text]CD treatment. MTT assays showed that M[Formula: see text]CD caused strong cytotoxicity in CNE1 cells, but caused relatively weaker cytotoxicity in CNE1-LMP1 cells, which indicated that LMP1 may regulate sensitivity of NPC cells to M[Formula: see text]CD. Then, detection of cleaved caspase-3 in two kinds of NPC cells indicated that LMP1 may inhibit activation of caspase-3. These results strongly suggested that M[Formula: see text]CD can induce apoptosis of NPC cells, but enhancing of LMP1/LMP1 interaction may likely resist apoptosis through inhibiting cleavage of caspase-3.

中文翻译：

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FRET法实时检测MβCD诱导的鼻咽癌细胞凋亡中的LMP1/LMP1相互作用

潜膜蛋白 1 (LMP1) 是鼻咽癌 (NPC) 细胞中的一种癌蛋白，被认为与 NPC 细胞通过脂筏的生长、侵袭和转移密切相关。甲基-[分子式：见正文]-环糊精（M[分子式：见正文]CD）可以通过消耗胆固醇来破坏脂筏。在这项研究中，我们发现 M[公式：见正文]CD 可诱导两种 NPC 细胞凋亡，包括 CNE1 细胞（一种 LMP1 阴性鼻咽鳞状细胞癌细胞系）和 CNE1-LMP1 细胞（一种 LMP1 阳性鼻咽鳞状细胞癌）细胞系。此外，通过NPC细胞中的荧光共振能量转移（FRET）方法研究了M[公式：见正文]CD对LMP1的影响。使用荧光显微镜和光谱仪进行 LMP1/LMP1 相互作用的同步时空和光谱检测。FRET效率表明LMP1/LMP1相互作用在M[公式：见正文]CD处理后逐渐增强。MTT检测结果显示M[分子式：见文]CD对CNE1细胞有较强的细胞毒作用，但对CNE1-LMP1细胞的毒作用相对较弱，说明LMP1可能调节NPC细胞对M[分子式：见文]CD的敏感性。然后，在两种NPC细胞中检测到裂解的caspase-3表明LMP1可能抑制caspase-3的活化。这些结果强烈表明M[公式：见正文]CD可以诱导NPC细胞凋亡，但增强LMP1/LMP1相互作用可能通过抑制caspase-3的切割来抵抗细胞凋亡。FRET效率表明LMP1/LMP1相互作用在M[公式：见正文]CD处理后逐渐增强。MTT检测结果显示M[分子式：见文]CD对CNE1细胞有较强的细胞毒作用，但对CNE1-LMP1细胞的毒作用相对较弱，说明LMP1可能调节NPC细胞对M[分子式：见文]CD的敏感性。然后，在两种NPC细胞中检测到裂解的caspase-3表明LMP1可能抑制caspase-3的活化。这些结果强烈表明M[公式：见正文]CD可以诱导NPC细胞凋亡，但增强LMP1/LMP1相互作用可能通过抑制caspase-3的切割来抵抗细胞凋亡。FRET效率表明LMP1/LMP1相互作用在M[公式：见正文]CD处理后逐渐增强。MTT检测结果显示M[分子式：见文]CD对CNE1细胞有较强的细胞毒作用，但对CNE1-LMP1细胞的毒作用相对较弱，说明LMP1可能调节NPC细胞对M[分子式：见文]CD的敏感性。然后，在两种NPC细胞中检测到裂解的caspase-3表明LMP1可能抑制caspase-3的活化。这些结果强烈表明M[公式：见正文]CD可以诱导NPC细胞凋亡，但增强LMP1/LMP1相互作用可能通过抑制caspase-3的切割来抵抗细胞凋亡。见文]CD对CNE1细胞有较强的细胞毒作用，但对CNE1-LMP1细胞的毒作用相对较弱，说明LMP1可能调节NPC细胞对M的敏感性[公式：见文]CD。然后，在两种NPC细胞中检测到裂解的caspase-3表明LMP1可能抑制caspase-3的活化。这些结果强烈表明M[公式：见正文]CD可以诱导NPC细胞凋亡，但增强LMP1/LMP1相互作用可能通过抑制caspase-3的切割来抵抗细胞凋亡。见文]CD对CNE1细胞有较强的细胞毒作用，但对CNE1-LMP1细胞的毒作用相对较弱，说明LMP1可能调节NPC细胞对M的敏感性[公式：见文]CD。然后，在两种NPC细胞中检测到裂解的caspase-3表明LMP1可能抑制caspase-3的活化。这些结果强烈表明M[公式：见正文]CD可以诱导NPC细胞凋亡，但增强LMP1/LMP1相互作用可能通过抑制caspase-3的切割来抵抗细胞凋亡。