Abstract Early diagnosis is a key to improve the prognosis of renal cell carcinoma (RCC); however, reliable RCC biomarkers are lacking in clinical practice. In this study, we used isobaric tags for relative and absolute quantification-based mass spectrometry to identify salivary proteins as biomarkers for the diagnosis of RCC. The objective of this study is to discover biomarkers from saliva by utilizing high-throughput quantitative proteomics approaches. Saliva proteins from 124 RCC patients and healthy individuals were identified and quantified. RCC putative biomarkers were verified by real-time polymerase chain reaction or enzyme-linked immunosorbent assay in a prevalidation sample set. Seventy-one differentially expressed salivary proteins were identified. Serotransferrin, haptoglobin, KRT9, and S100A9, which in previous studies were found to be most closely related to cancers, were selected as putative RCC biomarkers. Haptoglobin and S100A9 were significantly elevated in RCC compared with healthy control samples, although the expression of serotransferrin and KRT9 did not differ between the groups. Furthermore, receiver operating characteristic curves with a cut-off value of 75.49 ng/mL for S100A9 revealed a sensitivity of 87.10% and a specificity of 91.94% for discriminating RCC patients from healthy individuals. Salivary haptoglobin differentiated RCC patients from healthy controls with a sensitivity of 85.48% and specificity of 80.65% (cut-off value 43.02 µg/mL). These results provide experimental evidence to support S100A9 and haptoglobin as potential novel, noninvasive biomarkers for the diagnosis of RCC.

中文翻译：

---

唾液蛋白质组学分析揭示肾细胞癌的可能生物标志物

摘要 早期诊断是改善肾细胞癌（RCC）预后的关键；然而，临床实践中缺乏可靠的 RCC 生物标志物。在这项研究中，我们使用同量异位标记进行基于相对和绝对定量的质谱来鉴定唾液蛋白作为 RCC 诊断的生物标志物。本研究的目的是利用高通量定量蛋白质组学方法从唾液中发现生物标志物。鉴定并量化了来自 124 名 RCC 患者和健康个体的唾液蛋白。RCC 假定的生物标志物通过实时聚合酶链反应或酶联免疫吸附测定在预验证样本集中进行验证。鉴定了 71 种差异表达的唾液蛋白。血清转铁蛋白、触珠蛋白、KRT9 和 S100A9，在之前的研究中发现与癌症最密切相关的 RCC 被选为推定的 RCC 生物标志物。与健康对照样本相比，RCC 中的触珠蛋白和 S100A9 显着升高，尽管各组之间血清转铁蛋白和 KRT9 的表达没有差异。此外，S100A9 截断值为 75.49 ng/mL 的受试者操作特征曲线显示，区分 RCC 患者与健康个体的敏感性为 87.10%，特异性为 91.94%。唾液结合珠蛋白以 85.48% 的敏感性和 80.65% 的特异性（临界值 43.02 µg/mL）将 RCC 患者与健康对照区分开来。这些结果为支持 S100A9 和触珠蛋白作为 RCC 诊断的潜在新型非侵入性生物标志物提供了实验证据。被选为推定的 RCC 生物标志物。与健康对照样本相比，RCC 中的触珠蛋白和 S100A9 显着升高，尽管各组之间血清转铁蛋白和 KRT9 的表达没有差异。此外，S100A9 截断值为 75.49 ng/mL 的受试者操作特征曲线显示，区分 RCC 患者与健康个体的敏感性为 87.10%，特异性为 91.94%。唾液结合珠蛋白以 85.48% 的敏感性和 80.65% 的特异性（临界值 43.02 µg/mL）将 RCC 患者与健康对照区分开来。这些结果为支持 S100A9 和触珠蛋白作为 RCC 诊断的潜在新型非侵入性生物标志物提供了实验证据。被选为推定的 RCC 生物标志物。与健康对照样本相比，RCC 中的触珠蛋白和 S100A9 显着升高，尽管各组之间血清转铁蛋白和 KRT9 的表达没有差异。此外，S100A9 截断值为 75.49 ng/mL 的受试者工作特征曲线显示，区分 RCC 患者与健康个体的敏感性为 87.10%，特异性为 91.94%。唾液结合珠蛋白以 85.48% 的灵敏度和 80.65% 的特异性（临界值 43.02 µg/mL）将 RCC 患者与健康对照区分开来。这些结果为支持 S100A9 和触珠蛋白作为 RCC 诊断的潜在新型非侵入性生物标志物提供了实验证据。与健康对照样本相比，RCC 中的触珠蛋白和 S100A9 显着升高，尽管各组之间血清转铁蛋白和 KRT9 的表达没有差异。此外，S100A9 截断值为 75.49 ng/mL 的受试者操作特征曲线显示，区分 RCC 患者与健康个体的敏感性为 87.10%，特异性为 91.94%。唾液结合珠蛋白以 85.48% 的敏感性和 80.65% 的特异性（临界值 43.02 µg/mL）将 RCC 患者与健康对照区分开来。这些结果为支持 S100A9 和触珠蛋白作为 RCC 诊断的潜在新型非侵入性生物标志物提供了实验证据。与健康对照样本相比，RCC 中的触珠蛋白和 S100A9 显着升高，尽管各组之间血清转铁蛋白和 KRT9 的表达没有差异。此外，S100A9 截断值为 75.49 ng/mL 的受试者操作特征曲线显示，区分 RCC 患者与健康个体的敏感性为 87.10%，特异性为 91.94%。唾液结合珠蛋白以 85.48% 的敏感性和 80.65% 的特异性（临界值 43.02 µg/mL）将 RCC 患者与健康对照区分开来。这些结果为支持 S100A9 和触珠蛋白作为 RCC 诊断的潜在新型非侵入性生物标志物提供了实验证据。S100A9 截断值为 75.49 ng/mL 的受试者工作特征曲线显示，区分 RCC 患者与健康个体的敏感性为 87.10%，特异性为 91.94%。唾液结合珠蛋白以 85.48% 的灵敏度和 80.65% 的特异性（临界值 43.02 µg/mL）将 RCC 患者与健康对照区分开来。这些结果为支持 S100A9 和触珠蛋白作为 RCC 诊断的潜在新型非侵入性生物标志物提供了实验证据。S100A9 截断值为 75.49 ng/mL 的受试者工作特征曲线显示，区分 RCC 患者与健康个体的敏感性为 87.10%，特异性为 91.94%。唾液结合珠蛋白以 85.48% 的敏感性和 80.65% 的特异性（临界值 43.02 µg/mL）将 RCC 患者与健康对照区分开来。这些结果为支持 S100A9 和触珠蛋白作为 RCC 诊断的潜在新型非侵入性生物标志物提供了实验证据。