Flaxseed meal, a byproduct of flaxseed oil extraction, was treated as low-value agrowaste for a long time despite its high protein content. Flaxseed meal has recently garnered increasing interest as a source of proteins and other bioactive compounds with positive impacts on human health. The aim of this study was to investigate the in vitro biological potential of flaxseed protein hydrolysates (FPH). Three FPHs were prepared using three hydrolytic enzymes: Alcalase, Neutrase and Protamex. The molecular weight profile of peptides contained in the hydrolysates was determined by size exclusion chromatography (SEC). The oxygen radical absorbance capacity (ORAC) assay was used to determine the peptide antioxidant capacity, while proliferative effects were studied in two cell lines: HeLa and HaCaT. The latter was also used to determine the protective effect of the FPH during induced oxidative stress. Alcalase showed the highest proteolytic activity, while the produced flaxseed protein hydrolysate (FPH-A) exhibited the strongest antioxidant potential. FPH-A had cytotoxic effects at 10 mg/mL in HeLa cells, but it stimulated HaCaT cell growth. Moreover, a mild protective effect of FPH-A was detected in HaCaT cells after induction of oxidative stress. Flaxseed protein hydrolysates obtained by Neutrase (FPH-N) and Protamex (FPH-P) have less pronounced or no potential at all, with respect to their antioxidative or antiproliferative activity. Therefore, to increase value-added utilization of flaxseed meal we suggest further research on hydrolysate obtained by Alcalase.

中文翻译：

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通过不同蛋白酶获得的亚麻籽蛋白水解物的生物学潜力

亚麻籽粕是亚麻籽油提取的副产品，尽管蛋白质含量高，但长期以来一直被视为低价值的农产品。亚麻籽粉作为蛋白质和其他对人类健康有积极影响的生物活性化合物的来源，最近引起了越来越多的关注。本研究的目的是研究亚麻籽蛋白水解物 (FPH) 的体外生物学潜力。使用三种水解酶制备三种 FPH：Alcalase、Neutrase 和 Protamex。水解产物中所含肽的分子量分布由尺寸排阻色谱 (SEC) 确定。氧自由基吸收能力 (ORAC) 测定用于确定肽的抗氧化能力，同时在两种细胞系中研究增殖效应：HeLa 和 HaCaT。后者还用于确定 FPH 在诱导氧化应激期间的保护作用。Alcalase 显示出最高的蛋白水解活性，而产生的亚麻籽蛋白水解物 (FPH-A) 显示出最强的抗氧化潜力。FPH-A 在 10 mg/mL 时对 HeLa 细胞具有细胞毒性作用，但它刺激了 HaCaT 细胞的生长。此外，在诱导氧化应激后，在 HaCaT 细胞中检测到 FPH-A 的温和保护作用。通过 Neutrase (FPH-N) 和 Protamex (FPH-P) 获得的亚麻籽蛋白水解物在抗氧化或抗增殖活性方面不太明显或根本没有潜力。因此，为了提高亚麻籽粕的附加值利用率，我们建议对Alcalase 水解产物进行进一步研究。Alcalase 表现出最高的蛋白水解活性，而产生的亚麻籽蛋白水解物 (FPH-A) 表现出最强的抗氧化潜力。FPH-A 在 10 mg/mL 时对 HeLa 细胞具有细胞毒性作用，但它刺激了 HaCaT 细胞的生长。此外，在诱导氧化应激后，在 HaCaT 细胞中检测到 FPH-A 的温和保护作用。通过 Neutrase (FPH-N) 和 Protamex (FPH-P) 获得的亚麻籽蛋白水解物在抗氧化或抗增殖活性方面不太明显或根本没有潜力。因此，为了提高亚麻籽粕的附加值利用率，我们建议对Alcalase 水解产物进行进一步研究。Alcalase 显示出最高的蛋白水解活性，而产生的亚麻籽蛋白水解物 (FPH-A) 显示出最强的抗氧化潜力。FPH-A 在 10 mg/mL 时对 HeLa 细胞具有细胞毒性作用，但它刺激了 HaCaT 细胞的生长。此外，在诱导氧化应激后，在 HaCaT 细胞中检测到 FPH-A 的温和保护作用。通过 Neutrase (FPH-N) 和 Protamex (FPH-P) 获得的亚麻籽蛋白水解物在抗氧化或抗增殖活性方面不太明显或根本没有潜力。因此，为了提高亚麻籽粕的附加值利用率，我们建议对Alcalase 水解产物进行进一步研究。但它刺激了 HaCaT 细胞的生长。此外，在诱导氧化应激后，在 HaCaT 细胞中检测到 FPH-A 的温和保护作用。通过 Neutrase (FPH-N) 和 Protamex (FPH-P) 获得的亚麻籽蛋白水解物在抗氧化或抗增殖活性方面不太明显或根本没有潜力。因此，为了提高亚麻籽粕的附加值利用率，我们建议对Alcalase 水解产物进行进一步研究。但它刺激了 HaCaT 细胞的生长。此外，在诱导氧化应激后，在 HaCaT 细胞中检测到 FPH-A 的温和保护作用。通过 Neutrase (FPH-N) 和 Protamex (FPH-P) 获得的亚麻籽蛋白水解物在抗氧化或抗增殖活性方面不太明显或根本没有潜力。因此，为了提高亚麻籽粕的附加值利用率，我们建议对Alcalase 水解产物进行进一步研究。