Extracellular vesicles (EV), structures surrounded by a biological membrane, transport biologically active molecules, and represent a recently identified way of intercellular communication. Colorectal cancer (CRC), one of the most common cancer types in the Western countries, is composed of both tumor and stromal cells and the amount of stromal fibroblasts negatively correlates with patient survival. Here we show that normal colon fibroblasts (NCF) release EVs with a characteristic miRNA cargo profile when stimulated with TGFβ, one of the most important activating factors of fibroblasts, without a significant increase in the amount of secreted EVs. Importantly, fibroblast-derived EVs induce cell proliferation in epidermal growth factor (EGF)-dependent patient-derived organoids, one of the best current systems to model the intra-tumoral heterogeneity of human cancers. In contrast, fibroblast-derived EVs have no effect in 3D models where EGF is dispensible. This EV-induced cell proliferation did not depend on whether NCFs or cancer-associated fibroblasts were studied or on the pre-activation by TGFβ, suggesting that TGFβ-induced sorting of specific miRNAs into EVs does not play a major role in enhancing CRC proliferation. Mechanistically, we provide evidence that amphiregulin, transported by EVs, is a major factor in inducing CRC cell proliferation. We found that neutralization of EV-bound amphiregulin blocked the effects of the fibroblast-derived EVs. Collectively, our data suggest a novel mechanism for fibroblast-induced CRC cell proliferation, coupled to EV-associated amphiregulin.

细胞外囊泡（EV）由生物膜包围，可转运生物活性分子，并代表最近确定的细胞间通讯方式。结直肠癌（CRC）是西方国家最常见的癌症类型之一，由肿瘤和基质细胞组成，并且基质成纤维细胞的数量与患者的存活率呈负相关。在这里，我们显示正常的结肠成纤维细胞（NCF）在受TGFβ（成纤维细胞最重要的激活因子之一）刺激时释放具有特征性miRNA货物特征的EV，而分泌的EV数量却没有显着增加。重要的是，成纤维细胞源的电动汽车在表皮生长因子（EGF）依赖患者的类器官中诱导细胞增殖，目前用于模拟人类癌症的肿瘤内异质性的最佳系统之一。相反，成纤维细胞源的电动汽车在可不需要EGF的3D模型中没有作用。EV诱导的细胞增殖并不取决于是否研究了NCF或与癌症相关的成纤维细胞，也不取决于TGFβ的预激活作用，这表明TGFβ诱导的特定miRNA进入EV的分类在增强CRC增殖中不发挥主要作用。从机理上讲，我们提供证据表明，电动汽车运输的双调蛋白是诱导CRC细胞增殖的主要因素。我们发现，中和EV结合的双调蛋白会阻止成纤维细胞来源的EV的影响。总的来说，我们的数据表明成纤维细胞诱导的CRC细胞增殖的新机制，与EV相关的双调蛋白偶联。成纤维细胞来源的电动汽车在不需要EGF的3D模型中没有作用。EV诱导的细胞增殖并不取决于是否研究了NCF或与癌症相关的成纤维细胞，也不取决于TGFβ的预激活作用，这表明TGFβ诱导的特定miRNA进入EV的分类在增强CRC增殖中不发挥主要作用。从机理上讲，我们提供证据表明，电动汽车运输的双调蛋白是诱导CRC细胞增殖的主要因素。我们发现，中和EV结合的双调蛋白会阻止成纤维细胞来源的EV的影响。总的来说，我们的数据表明成纤维细胞诱导的CRC细胞增殖的新机制，与EV相关的双调蛋白偶联。成纤维细胞来源的电动汽车在不需要EGF的3D模型中没有作用。EV诱导的细胞增殖并不取决于是否研究了NCF或癌症相关的成纤维细胞，也不取决于TGFβ的预激活作用，这表明TGFβ诱导的特定miRNA进入EV的分类在增强CRC增殖中不发挥主要作用。从机制上讲，我们提供证据表明，电动汽车运输的双调蛋白是诱导CRC细胞增殖的主要因素。我们发现，中和EV结合的双调蛋白会阻止成纤维细胞来源的EV的影响。总的来说，我们的数据表明成纤维细胞诱导的CRC细胞增殖的新机制，与EV相关的双调蛋白偶联。EV诱导的细胞增殖并不取决于是否研究了NCF或与癌症相关的成纤维细胞，也不取决于TGFβ的预激活作用，这表明TGFβ诱导的特定miRNA进入EV的分类在增强CRC增殖中不发挥主要作用。从机制上讲，我们提供证据表明，电动汽车运输的双调蛋白是诱导CRC细胞增殖的主要因素。我们发现，中和EV结合的双调蛋白会阻止成纤维细胞来源的EV的影响。总的来说，我们的数据表明成纤维细胞诱导的CRC细胞增殖的新机制，与EV相关的双调蛋白偶联。EV诱导的细胞增殖并不取决于是否研究了NCF或癌症相关的成纤维细胞，也不取决于TGFβ的预激活作用，这表明TGFβ诱导的特定miRNA进入EV的分类在增强CRC增殖中不发挥主要作用。从机理上讲，我们提供证据表明，电动汽车运输的双调蛋白是诱导CRC细胞增殖的主要因素。我们发现，中和EV结合的双调蛋白会阻止成纤维细胞来源的EV的影响。总的来说，我们的数据表明成纤维细胞诱导的CRC细胞增殖的新机制，与EV相关的双调蛋白偶联。我们提供的证据表明，电动汽车运输的双调蛋白是诱导CRC细胞增殖的主要因素。我们发现，中和EV结合的双调蛋白会阻止成纤维细胞来源的EV的影响。总的来说，我们的数据表明成纤维细胞诱导的CRC细胞增殖的新机制，与EV相关的双调蛋白偶联。我们提供的证据表明，电动汽车运输的双调蛋白是诱导CRC细胞增殖的主要因素。我们发现，中和EV结合的双调蛋白会阻止成纤维细胞来源的EV的影响。总的来说，我们的数据表明成纤维细胞诱导的CRC细胞增殖的新机制，与EV相关的双调蛋白偶联。