Abstract This study has been designed to optimize the semen freezing protocol in rabbits, in this regard we compared a Tris-citrate-glucose (TCG) extender with a commercial one (Cortalap®), that to the best of our knowledge has never been used up to now on the in vitro freezability and fertilizing ability of cryopreserved rabbit semen. Two different inseminating semen doses were considered. Five pooled semen samples were divided into two subsamples and each of them were diluted to a ratio 1:1 (v:v) with a freezing extender composed of TCG or Cortalap® containing 16% of dimethylsulfoxide and 0.1 mol/L of sucrose. The extended semen was filled into 0.25 mL plastic straws and frozen above a liquid nitrogen surface. After thawing (50°C/10 seconds) we determined sperm motility, viability, membrane functionality, acrosome and DNA integrity. Our results showed that the Cortalap® extender significantly improved the in vitro post-thaw sperm quality, in comparison to TCG. When we compared the extenders in vivo, no significant differences in the reproductive performances were observed independently by inseminating doses used. In this study we demonstrated that Cortalap® extender can be used as an alternative to TCG. Thus, the Cortalap® being a ready to use extender, implies a reduction of time, mistakes and microbial contaminations during its preparation. This discovery results as significant because it provides beyond an important contribution to the creation of the first Italian semen cryobank of rabbit breeds and also for livestock rabbit farms based on artificial insemination (AI) program.

中文翻译：

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改进兔精液冷冻保存方案：两种稀释剂和授精剂量之间的比较

摘要 本研究旨在优化兔子的精液冷冻方案，在这方面，我们将 Tris-citrate-glucose (TCG) 增补剂与商业增补剂 (Cortalap®) 进行了比较，据我们所知，该增补剂从未被使用过。冻存兔精液的体外冷冻能力和受精能力的研究至今。考虑了两种不同的授精精液剂量。五个合并的精液样本被分成两个子样本，每个子样本都用由 TCG 或 Cortalap® 组成的冷冻补充剂稀释到 1:1 (v:v) 的比例，其中含有 16% 的二甲基亚砜和 0.1 mol/L 的蔗糖。将延长的精液装入 0.25 mL 塑料吸管中并在液氮表面上方冷冻。解冻（50°C/10 秒）后，我们确定了精子的活力、活力、膜功能、顶体和 DNA 完整性。我们的结果表明，与 TCG 相比，Cortalap® 稀释剂显着提高了体外解冻后精子的质量。当我们在体内比较稀释剂时，通过使用的授精剂量独立地观察到繁殖性能没有显着差异。在本研究中，我们证明 Cortalap® 增量剂可用作 TCG 的替代品。因此，Cortalap® 是一种即用型增量剂，意味着在其制备过程中减少了时间、错误和微生物污染。这一发现意义重大，因为它不仅为创建意大利第一个兔品种精液冷冻库以及基于人工授精 (AI) 计划的家兔养殖场做出了重要贡献。与TCG相比。当我们在体内比较稀释剂时，通过使用的授精剂量独立地观察到繁殖性能没有显着差异。在本研究中，我们证明 Cortalap® 增量剂可用作 TCG 的替代品。因此，Cortalap® 是一种即用型增量剂，意味着在其制备过程中减少了时间、错误和微生物污染。这一发现意义重大，因为它不仅为创建意大利第一个兔品种精液冷冻库以及基于人工授精 (AI) 计划的家兔养殖场做出了重要贡献。与TCG相比。当我们在体内比较稀释剂时，通过使用的授精剂量独立地观察到繁殖性能没有显着差异。在本研究中，我们证明 Cortalap® 增量剂可用作 TCG 的替代品。因此，Cortalap® 是一种即用型增量剂，意味着在其制备过程中减少了时间、错误和微生物污染。这一发现意义重大，因为它不仅为创建意大利第一个兔品种精液冷冻库以及基于人工授精 (AI) 计划的家兔养殖场做出了重要贡献。在本研究中，我们证明 Cortalap® 增量剂可用作 TCG 的替代品。因此，Cortalap® 是一种即用型增量剂，意味着在其制备过程中减少了时间、错误和微生物污染。这一发现意义重大，因为它不仅为创建意大利第一个兔品种精液冷冻库以及基于人工授精 (AI) 计划的家兔养殖场做出了重要贡献。在本研究中，我们证明 Cortalap® 增量剂可用作 TCG 的替代品。因此，Cortalap® 是一种即用型增量剂，意味着在其制备过程中减少了时间、错误和微生物污染。这一发现之所以意义重大，是因为它不仅为创建意大利第一个兔品种精液冷冻库以及基于人工授精 (AI) 计划的家兔养殖场做出了重要贡献。