The availability of highly pure animal antibodies is critical in the production of diagnostic tools and biosensors. The peptoid PL16, previously isolated from an ensemble of peptoid variants of the IgG‐binding peptide HWRGWV, was utilized in this work as affinity ligand on WorkBeads resin for the purification of immunoglobulin G (IgG) from a variety of mammalian sources and chicken immunoglobulin Y (IgY). The chromatographic protocol initially optimized for murine serum and ascites was subsequently employed for processing rabbit, goat and sheep, donkey, llama, and chicken sera. The PL16‐WorkBeads resin proved able to recover all antibody targets with values of yield between 50 and 90%, and purity consistently above 90%. Notably, PL16 not only binds a broader spectrum of animal immunoglobulins than the reference ligands Protein A and G, but it also binds equally well with all their subclasses. Unlike the protein ligands, in fact, PL16 afforded excellent values of yield and purity of mammalian polyclonal IgG, namely murine (47 and 94%), rabbit (66.5 and 91.7%), caprine IgG (63 and 91–95%), donkey, and llama (93 and 97%), as well as chicken IgY (42 and 92%). Of notice, it is also the ability of PL16 to target monomeric IgG without binding aggregated IgG; when challenged with a mixture of monomeric and aggregated murine IgG, PL16 eluted <3% of fed aggregates, against 11–13% eluted by Protein A and G. Collectively, these results prove the potential of the proposed peptoid ligand for large‐scale purification of animal immunoglobulins.

中文翻译：

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使用拟肽亲和配体纯化动物免疫球蛋白 G (IgG)。

高纯度动物抗体的可用性对于诊断工具和生物传感器的生产至关重要。先前从 IgG 结合肽 HWRGWV 的拟肽变体集合中分离的拟肽 PL16 在这项工作中用作 WorkBeads 树脂上的亲和配体，用于从各种哺乳动物来源和鸡免疫球蛋白 Y 中纯化免疫球蛋白 G (IgG) (IgY)。最初针对鼠血清和腹水优化的色谱方案随后用于处理兔、山羊和绵羊、驴、美洲驼和鸡的血清。事实证明，PL16-WorkBeads 树脂能够回收所有抗体靶标，产率值在 50% 到 90% 之间，纯度始终高于 90%。值得注意的是，与参考配体蛋白 A 和 G 相比，PL16 不仅结合更广谱的动物免疫球蛋白，但它也与它们的所有子类绑定得同样好。与蛋白质配体不同，事实上，PL16 提供了哺乳动物多克隆 IgG，即鼠（47% 和 94%）、兔（66.5% 和 91.7%）、山羊 IgG（63 和 91–95%）、驴的出色产量和纯度值和美洲驼（93% 和 97%），以及鸡 IgY（42% 和 92%）。值得注意的是，PL16 还具有靶向单体 IgG 而不结合聚集 IgG 的能力；当用单体和聚集的鼠 IgG 的混合物进行挑战时，PL16 洗脱的饲料聚集体少于 3%，而蛋白质 A 和 G 洗脱的 11-13%。总的来说，这些结果证明了拟议的拟肽配体用于大规模纯化的潜力动物免疫球蛋白。PL16 为哺乳动物多克隆 IgG，即鼠类（47% 和 94%）、兔（66.5% 和 91.7%）、山羊 IgG（63% 和 91–95%）、驴和美洲驼（93% 和 97%）的产量和纯度提供了极好的值)，以及鸡 IgY（42% 和 92%）。值得注意的是，PL16 还具有靶向单体 IgG 而不结合聚集 IgG 的能力；当用单体和聚集的鼠 IgG 的混合物进行挑战时，PL16 的洗脱量小于进料聚集体的 3%，而蛋白质 A 和 G 则洗脱了 11-13%。总的来说，这些结果证明了拟议的拟肽配体用于大规模纯化的潜力动物免疫球蛋白。PL16 为哺乳动物多克隆 IgG，即鼠类（47% 和 94%）、兔（66.5% 和 91.7%）、山羊 IgG（63% 和 91–95%）、驴和美洲驼（93% 和 97%）的产量和纯度提供了极好的值)，以及鸡 IgY（42% 和 92%）。值得注意的是，PL16 还具有靶向单体 IgG 而不结合聚集 IgG 的能力；当用单体和聚集的鼠 IgG 的混合物进行挑战时，PL16 的洗脱量小于进料聚集体的 3%，而蛋白质 A 和 G 则洗脱了 11-13%。总的来说，这些结果证明了拟议的拟肽配体用于大规模纯化的潜力动物免疫球蛋白。这也是 PL16 在不结合聚集 IgG 的情况下靶向单体 IgG 的能力；当用单体和聚集的鼠 IgG 的混合物进行挑战时，PL16 洗脱的饲料聚集体少于 3%，而蛋白质 A 和 G 洗脱的 11-13%。总的来说，这些结果证明了拟议的拟肽配体用于大规模纯化的潜力动物免疫球蛋白。这也是 PL16 在不结合聚集 IgG 的情况下靶向单体 IgG 的能力；当用单体和聚集的鼠 IgG 的混合物进行挑战时，PL16 的洗脱量小于进料聚集体的 3%，而蛋白质 A 和 G 则洗脱了 11-13%。总的来说，这些结果证明了拟议的拟肽配体用于大规模纯化的潜力动物免疫球蛋白。