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LC-MS/MS analysis of twelve neurotransmitters and amino acids in mouse cerebrospinal fluid.
Journal of Neuroscience Methods ( IF 2.7 ) Pub Date : 2020-05-16 , DOI: 10.1016/j.jneumeth.2020.108760
María Encarnación Blanco 1 , Olga Barca Mayo 2 , Tiziano Bandiera 3 , Davide De Pietri Tonelli 2 , Andrea Armirotti 4
Affiliation  

BACKGROUND So far, analytical investigation of neuroactive molecules in cerebrospinal fluid (CSF) of rodent models has been limited to rats, given the intrinsic anatomic difficulties related to mice sampling and the corresponding tiny amounts of CSF obtained. This poses a challenge for the research in neuroscience, where many, if not most, animal models for neuronal disorders rely on mice. NEW METHOD We introduce a new, sensitive and robust LC-MS/MS method to analyze a panel of twelve neuroactive molecules (NM) from mouse CSF (aspartic acid, serine, glycine, glutamate, γ-aminobutyric acid, norepinephrine, epinephrine, acetylcholine, dopamine, serotonin, histamine and its metabolite 1-metylhistamine). The paper describes the sampling procedure that allows the collection of 1-2 microliters of pure CSF from individual mouse specimens. RESULTS To test its applicability, we challenged our method on the field, by sampling 37 individual animals, thus demonstrating its strength and reliability. COMPARISON WITH EXISTING METHOD(S) Compared to other methods, our procedure does not involve any extraction nor derivatization steps: samples are simply diluted and analyzed as such by LC-MS/MS, using a dedicated ion pairing agent in the chromatographic setup. The panel of neuroactive molecules that is analyzed in a single run is also significantly higher compared to other methods. CONCLUSIONS Given the number of mouse models used in the neuroscience research, we believe that our work will pave new ways to more advanced research in this field.

中文翻译:

LC-MS / MS分析小鼠脑脊液中的十二种神经递质和氨基酸。

背景技术到目前为止,鉴于与小鼠采样有关的固有解剖学困难和获得的相应少量CSF,啮齿动物模型脑脊液(CSF)中神经活性分子的分析研究仅限于大鼠。这对神经科学研究提出了挑战,在神经科学研究中,许多(如果不是大多数)神经元疾病的动物模型都依赖于小鼠。新方法我们引入了一种新的,灵敏且可靠的LC-MS / MS方法,可分析来自小鼠CSF(天冬氨酸,丝氨酸,甘氨酸,谷氨酸,γ-氨基丁酸,去甲肾上腺素,肾上腺素,乙酰胆碱)的十二种神经活性分子(NM)。 ,多巴胺,5-羟色胺,组胺及其代谢物1-甲基组胺)。本文介绍了可以从单个小鼠标本中收集1-2微升纯CSF的采样程序。结果为了测试其适用性,我们通过对37只动物进行采样,在野外挑战了我们的方法,从而证明了其强度和可靠性。与现有方法的比较与其他方法相比,我们的程序不涉及任何提取或衍生步骤:样品可以通过色谱设置中的专用离子对试剂通过LC-MS / MS进行简单稀释和分析。与其他方法相比,单次运行中分析的神经活性分子组也明显更高。结论鉴于神经科学研究中使用的小鼠模型数量众多,我们相信我们的工作将为该领域的更高级研究铺平新的道路。与现有方法的比较与其他方法相比,我们的程序不涉及任何提取或衍生步骤:样品可以通过色谱设置中的专用离子对试剂通过LC-MS / MS进行简单稀释和分析。与其他方法相比,单次运行中分析的神经活性分子组也明显更高。结论鉴于神经科学研究中使用的小鼠模型数量众多,我们相信我们的工作将为该领域的更高级研究铺平道路。与现有方法的比较与其他方法相比,我们的程序不涉及任何提取或衍生步骤:样品可以通过色谱设置中的专用离子对试剂通过LC-MS / MS进行简单稀释和分析。与其他方法相比,单次运行中分析的神经活性分子组也明显更高。结论鉴于神经科学研究中使用的小鼠模型数量众多,我们相信我们的工作将为该领域的更高级研究铺平道路。与其他方法相比,单次运行中分析的神经活性分子组也明显更高。结论鉴于神经科学研究中使用的小鼠模型数量众多,我们相信我们的工作将为该领域的更高级研究铺平道路。与其他方法相比,单次运行中分析的神经活性分子组也明显更高。结论鉴于神经科学研究中使用的小鼠模型数量众多,我们相信我们的工作将为该领域的更高级研究铺平道路。
更新日期:2020-05-16
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